화농땀샘염 환자의 피부에서 피부 Inflammasome의 활성화

목적은 이 질병에 대해 외과적으로 치료받은 환자의 피부에서 화농땀샘염(인플라마솜의 활성화, 전 염증성 사이토카인의 역할)의 염증 반응을 생체 외에서 조사하는 것입니다.

연구자들은 Th17 유래 사이토카인, 특히 IL-17이 HS 중증도 및 재발로 이어지는 염증 과정에서 중계 역할을 할 수 있다고 가정합니다. 이 제안을 이행하기 위해 연구자들은 HS 질병 - 가설 과각화 및 모낭 폐색이 피부 염증을 유발하는 감염을 유발한다는 것이 널리 받아들여지고 있습니다. 여기에서 연구자들은 숙주 유래 위험 신호가 인플라마좀 구조를 활성화하여 IL-1β와 같은 염증 매개체의 방출로 이어진다는 가설을 세웠습니다.

inflammasome은 다양한 센서를 통해 IL-1β의 발현과 활성화를 제어하는 ​​분자 플랫폼입니다. 전 염증성 사이토 카인 IL-1β는 이후에 Th17 하위 유형을 향한 림프구의 모집 및 방향으로 이어져 HS에서 과도한 조직 염증을 유지하는 피드백 루프를 생성할 수 있습니다.

이러한 복잡한 염증 과정이 HS에 존재하는 경우 세균 유발(IL-1β) 염증과 불임 관련(IL-17) 염증을 모두 차단하면 HS 환자의 치료 효과가 크게 향상될 것입니다.

- 실험적 접근

연구자들은 대조군 피부와 비교하여 HS의 피부 외식편에서 인플라마좀 센서 및 이펙터의 존재를 강조하고자 합니다. 이 최초의 생리병리학적 연구를 위해 윤리 검토 위원회(2015년 1월 23일에 승인된 CPP)에서 요구하는 정보에 입각한 동의서에 서명한 후 HS 환자 또는 대조군(성형 수술)에서 절제된 10개의 병변 피부를 조사할 것입니다. HS 질병 중증도는 Hurley 병기에 따른 병기를 기반으로 합니다. 6mm 피부 펀치는 대조 이식편과 HS 피부 이식편의 원 위치 및 병변 주변 부위 모두에서 수확됩니다. 피부 샘플은 바로 처리하거나(0일) 처리하거나 처리하지 않고 4일의 조직 배양 기간 후에 처리합니다.

모든 실험은 다음과 같이 수행됩니다.

• 생체 외 피부 조직 샘플을 Transwell® 필터에 삽입하고 항생제(리팜피신, 클린다마이신)를 사용하거나 사용하지 않고 4일 동안 배양합니다.

• 0일과 4일 모두:

  • 면역조직화학(IHC)을 통해 인플라마좀 센서 및 이펙터의 존재를 분석하기 위해 한 세트의 피부 샘플을 삽입합니다.
  • 또 다른 세트는 사이토카인 측정(ELISA) 및 세포 자극을 위해 균질화됩니다(아래 참조).
• 균질화된 샘플은 케라티노사이트 세포주 또는 단핵구/대식세포 세포주에 첨가하기 전에 4시간 동안 항-사이토카인 항체(세쿠키누맙 대 아이소타입)로 처리되거나 처리되지 않을 것입니다. 이들 세포주에서 인플라마좀 활성화에 대한 IL-17 및 세균 감염의 영향을 PCR 기술과 관련하여 위에서 기술한 바와 같이 조사할 것이다.