Aktivering af et kutan inflammasom i huden på Hidradenitis Suppurativa-patienter

Formålet er at undersøge ex vivo det inflammatoriske respons i hidradenitis suppurativa (aktivering af et inflammasom, rollen af ​​pro-inflammatoriske cytokiner) i huden hos patienter, der behandles kirurgisk for denne sygdom.

Efterforskerne antager, at Th17-afledte cytokiner, især IL-17, kunne tjene som et relæ i den inflammatoriske proces, der fører til HS-sværhedsgrad og gentagelser. For at opfylde dette forslag vil efterforskerne sigte mod at påvise og karakterisere tilstedeværelsen af ​​et inflammasom forbundet med HS-sygdom - Hypotese Det er almindeligt accepteret, at hyperkeratinisering og follikulær okklusion forårsager infektion deraf, der forårsager hudbetændelse. Forskerne her antog, at værts-afledte faresignaler førte til frigivelse af inflammatoriske mediatorer såsom IL-1β ved at aktivere en inflammasomstruktur.

Inflammasomet er en molekylær platform, der styrer ekspressionen og aktiveringen af ​​IL-1β via forskellige sensorer. Det proinflammatoriske cytokin IL-1β kunne efterfølgende føre til rekruttering og orientering af lymfocytter mod en Th17-subtype, der skaber en feedback-loop, der opretholder overdreven vævsinflammation i HS.

Hvis en sådan kompleks inflammatorisk proces er til stede i HS, vil blokering af både den bakterie-inducerede (IL-1 β) og den steril-associerede (IL-17) inflammation i vid udstrækning forbedre den terapeutiske fordel for HS-patienter.

- Eksperimentel tilgang

Efterforskerne vil søge at fremhæve tilstedeværelsen af ​​inflammasomsensorer og effektorer i hudeksplantater fra HS sammenlignet med kontrolhud. Til denne originale fysiopatologiske undersøgelse vil 10 læsionale skind, der er udskåret fra HS-patienter eller kontroller (plastikkirurgi), efter at de har underskrevet informeret samtykke som krævet af det etiske bedømmelsesudvalg (CPP accepteret den 23-01-2015), blive undersøgt. HS sygdoms sværhedsgrad vil være baseret på stadieinddeling i henhold til Hurley stadieinddeling. Seks mm skindstanser vil blive høstet fra kontroleksplantater og fra både in situ og perilæsionelle steder af HS hudeksplantater. Hudprøver vil blive håndteret enten direkte (dag 0) eller efter en periode med vævskultur på 4 dage med eller uden behandlinger.

Alle eksperimenter vil blive udført som følger:

• Ex vivo hudvævsprøver vil blive indsat i et Transwell® filter og dyrket over en periode på 4 dage med eller uden antibiotika (Rifampicin, Clindamycin).

• Både på dag 0 og dag 4:

  • et sæt hudprøver vil blive indlejret for at analysere tilstedeværelsen af ​​inflammasomsensorer og effektorer ved immunhistokemi (IHC)
  • Et andet sæt vil blive homogeniseret til cytokinbestemmelse (ELISA) og cellestimulering (se nedenfor)
• Homogeniserede prøver vil blive behandlet eller ej med anti-cytokinantistoffer (Secukinumab vs isotype) i 4 timer før tilsætning til keratinocytcellelinje eller monocyt/makrofagecellelinje. Indflydelsen af ​​IL-17 og bakteriel infektion på inflammasomaktivering i disse cellelinjer vil blive undersøgt som beskrevet ovenfor og forbundet med PCR-teknik.