Aktivering av et kutant inflammasom i huden til Hidradenitis Suppurativa-pasienter

Målet er å undersøke ex vivo den inflammatoriske responsen ved hidradenitis suppurativa (aktivering av et inflammasom, rollen til pro-inflammatoriske cytokiner) i huden til pasienter som behandles kirurgisk for denne sykdommen.

Etterforskerne antar at Th17-avledede cytokiner, spesielt IL-17, kan tjene som et relé i den inflammatoriske prosessen som fører til HS-alvorlighet og tilbakefall. For å oppfylle dette forslaget vil etterforskerne ta sikte på å demonstrere og karakterisere tilstedeværelsen av et inflammasom assosiert med HS-sykdom - Hypotese Det er allment akseptert at hyperkeratinisering og follikulær okklusjon forårsaker infeksjon derav som forårsaker hudbetennelse. Etterforskerne her antok at vertsavledede faresignaler førte til frigjøring av inflammatoriske mediatorer som IL-1β ved å aktivere en inflammasomstruktur.

Inflammasomet er en molekylær plattform som kontrollerer uttrykket og aktiveringen av IL-1β via forskjellige sensorer. Det proinflammatoriske cytokinet IL-1β kan deretter føre til rekruttering og orientering av lymfocytter mot en Th17-subtype som skaper en tilbakemeldingssløyfe som opprettholder overdreven vevsbetennelse i HS.

Hvis en slik kompleks inflammatorisk prosess er tilstede i HS, vil blokkering av både den bakterieinduserte (IL-1 β) og den sterilassosierte (IL-17) betennelsen i stor grad forbedre den terapeutiske fordelen for HS-pasienter.

- Eksperimentell tilnærming

Etterforskerne vil søke å fremheve tilstedeværelsen av inflammasomsensorer og effektorer i hudeksplantater fra HS sammenlignet med kontrollhud. For denne originale fysiopatologiske studien vil 10 lesjonsskinn som er fjernet fra HS-pasienter eller kontroller (plastisk kirurgi) etter at de har signert informert samtykke som kreves av den etiske vurderingskomiteen (CPP akseptert 23.01.2015) bli undersøkt. Alvorlighetsgraden av HS-sykdommen vil være basert på stadieinndeling i henhold til Hurley-stadieinndelingen. Seks mm hudslag vil bli høstet fra kontrolleksplantater og fra både in situ og peri-lesjonelle steder av HS hudeksplantater. Hudprøver vil bli håndtert enten rett frem (dag 0) eller etter en periode med vevskultur på 4 dager med eller uten behandlinger.

Alle eksperimenter vil bli utført som følger:

• Ex vivo hudvevsprøver vil bli satt inn i et Transwell®-filter og dyrket over en periode på 4 dager med eller uten antibiotika (Rifampicin, Clindamycin).

• Både på dag 0 og dag 4:

  • ett sett med hudprøver vil bli innebygd for å analysere tilstedeværelsen av inflammasomsensorer og effektorer ved immunhistokjemi (IHC)
  • Et annet sett vil bli homogenisert for cytokinbestemmelse (ELISA) og cellestimulering (se nedenfor)
• Homogeniserte prøver vil bli behandlet eller ikke med anti-cytokinantistoffer (Secukinumab vs isotype) i 4 timer før de legges til keratinocyttcellelinje eller monocytt/makrofagcellelinje. Påvirkningen av IL-17 og bakteriell infeksjon på inflammasomaktivering i disse cellelinjene vil bli undersøkt som beskrevet ovenfor og assosiert med PCR-teknikk.