Attivazione di un inflammasoma cutaneo nella pelle dei pazienti con idrosadenite suppurativa

L'obiettivo è indagare ex vivo la risposta infiammatoria nell'idrosadenite suppurativa (attivazione di un inflammasoma, ruolo delle citochine pro-infiammatorie) nella pelle di pazienti trattati chirurgicamente per questa malattia.

I ricercatori ipotizzano che le citochine derivate da Th17, in particolare IL-17, potrebbero fungere da relè nel processo infiammatorio che porta alla gravità e alle recidive dell'HS. Per soddisfare questa proposta, i ricercatori mireranno a dimostrare e caratterizzare la presenza di un inflammasoma associato a Malattia da HS - Ipotesi È ampiamente riconosciuto che l'ipercheratinizzazione e l'occlusione follicolare originano un'infezione della stessa causando infiammazione cutanea. I ricercatori qui hanno ipotizzato che i segnali di pericolo derivati ​​​​dall'ospite portassero al rilascio di mediatori dell'infiammazione come IL-1β attivando una struttura inflammasoma.

L'inflammasoma è una piattaforma molecolare che controlla l'espressione e l'attivazione di IL-1β tramite diversi sensori. La citochina proinfiammatoria IL-1β potrebbe successivamente portare al reclutamento e all'orientamento dei linfociti verso un sottotipo Th17 creando un ciclo di feedback che mantiene un'eccessiva infiammazione tissutale nell'HS.

Se un processo infiammatorio così complesso è presente nell'HS, il blocco sia dell'infiammazione indotta da batteri (IL-1 β) sia di quella associata alla sterilità (IL-17) migliorerebbe ampiamente il beneficio terapeutico per i pazienti con HS.

- Approccio sperimentale

Gli investigatori cercheranno di evidenziare la presenza di sensori ed effettori dell'inflammasoma negli espianti cutanei da HS rispetto alla pelle di controllo. Per questo originale studio fisiopatologico, verranno esaminate 10 pelli lesionali asportate da pazienti affetti da HS o controlli (chirurgia plastica) dopo aver firmato il consenso informato come richiesto dal comitato di revisione etica (CPP accettato il 23-01-2015). La gravità della malattia da HS sarà basata sulla stadiazione secondo la stadiazione di Hurley. Punzoni cutanei di 6 mm saranno prelevati da espianti di controllo e da entrambi i siti in situ e peri-lesionali di espianti cutanei HS. I campioni di pelle verranno manipolati direttamente (giorno 0) o dopo un periodo di coltura tissutale di 4 giorni con o senza trattamenti.

Tutti gli esperimenti saranno condotti come segue:

• I campioni di tessuto cutaneo ex vivo saranno inseriti in un filtro Transwell® e coltivati ​​per un periodo di 4 giorni con o senza antibiotici (rifampicina, clindamicina).

• Sia al giorno 0 che al giorno 4:

  • un set di campioni di pelle sarà incorporato per analizzare la presenza di sensori ed effettori dell'inflammasoma mediante immunoistochimica (IHC)
  • Un altro set sarà omogeneizzato per la determinazione delle citochine (ELISA) e la stimolazione cellulare (vedi sotto)
• I campioni omogeneizzati saranno trattati o meno con anticorpi anti-citochine (Secukinumab vs isotipo) per 4 ore prima dell'aggiunta alla linea cellulare di cheratinociti o monociti/macrofagi. L'influenza dell'IL-17 e dell'infezione batterica sull'attivazione dell'inflammasoma in queste linee cellulari sarà studiata come sopra descritto e associata alla tecnica PCR.