Activering van een cutaan ontstekingsmasker in de huid van Hidradenitis Suppurativa-patiënten

Het doel is om ex vivo de ontstekingsreactie bij hidradenitis suppurativa (activering van een ontstekingsmasker, rol van pro-inflammatoire cytokines) te onderzoeken in de huid van patiënten die chirurgisch voor deze ziekte werden behandeld.

De onderzoekers veronderstellen dat Th17-afgeleide cytokines, vooral IL-17, zouden kunnen dienen als een relais in het ontstekingsproces dat leidt tot HS-ernst en recidieven. Om aan dit voorstel te voldoen, zullen de onderzoekers ernaar streven de aanwezigheid van een ontstekingsmasker geassocieerd met HS-ziekte - Hypothese Het is algemeen aanvaard dat hyperkeratinisatie en folliculaire occlusie de oorzaak zijn van een infectie daarvan die huidontsteking veroorzaakt. De onderzoekers veronderstelden hier dat van de gastheer afkomstige gevaarsignalen leidden tot het vrijkomen van ontstekingsmediatoren zoals IL-1β door een ontstekingsstructuur te activeren.

Het ontstekingsmasker is een moleculair platform dat de expressie en activering van IL-1β regelt via verschillende sensoren. Het pro-inflammatoire cytokine IL-1β zou vervolgens kunnen leiden tot de rekrutering en oriëntatie van lymfocyten naar een Th17-subtype, waardoor een feedbacklus ontstaat die overmatige weefselontsteking in HS in stand houdt.

Als een dergelijk complex ontstekingsproces aanwezig is bij HS, zou het blokkeren van zowel de bacterieel-geïnduceerde (IL-1 β) als de steriel-geassocieerde (IL-17) ontsteking het therapeutische voordeel voor HS-patiënten grotendeels verbeteren.

- Experimentele benadering

De onderzoekers zullen proberen de aanwezigheid van ontstekingssensoren en effectoren in huidexplantaten van HS te benadrukken in vergelijking met controlehuid. Voor deze originele fysiopathologische studie zullen 10 laesiehuiden worden onderzocht die zijn weggesneden bij HS-patiënten of controles (plastische chirurgie) nadat ze een geïnformeerde toestemming hebben ondertekend, zoals vereist door de ethische toetsingscommissie (CPP geaccepteerd op 23-01-2015). De ernst van de HS-ziekte zal gebaseerd zijn op stadiëring volgens Hurley-stadiëring. Huidponsen van zes mm zullen worden geoogst van controle-explantaten en van zowel in situ als peri-laesieplaatsen van HS-huidexplantaten. Huidmonsters worden direct behandeld (dag 0) of na een periode van weefselkweek van 4 dagen met of zonder behandelingen.

Alle experimenten worden als volgt uitgevoerd:

• Ex vivo huidweefselmonsters worden in een Transwell®-filter geplaatst en gedurende een periode van 4 dagen gekweekt met of zonder antibiotica (rifampicine, clindamycine).

• Zowel op dag 0 als op dag 4:

  • één set huidmonsters zal worden ingebed om de aanwezigheid van ontstekingssensoren en effectoren te analyseren door middel van immunohistochemie (IHC)
  • Een andere set wordt gehomogeniseerd voor bepaling van cytokines (ELISA) en celstimulatie (zie hieronder)
• Gehomogeniseerde monsters worden al dan niet behandeld met anti-cytokine-antilichamen (Secukinumab versus isotype) gedurende 4 uur vóór toevoeging aan de keratinocytencellijn of monocyten/macrofaagcellijn. De invloed van IL-17 en bacteriële infectie op ontstekingsactivatie in deze cellijnen zal worden onderzocht zoals hierboven beschreven en geassocieerd met PCR-techniek.