La détection des mutations de l'EGFR dans les échantillons de cytologie à base de liquide

La présence de mutations activatrices du récepteur du facteur de croissance épidermique (EGFR) identifie les patients atteints d'adénocarcinome pulmonaire chez qui les inhibiteurs de la tyrosine kinase (TKI) de l'EGFR peuvent constituer un traitement potentiel de première ligne. Les TKI actuellement disponibles sont l'erlotinib, le gefitinib et l'afatinib, qui agissent en bloquant l'activité du récepteur tyrosine kinase, stoppant ainsi la prolifération cellulaire et provoquant la mort cellulaire. Plusieurs études ont montré que le traitement TKI de première intention prolonge la survie sans progression par rapport à la chimiothérapie standard, et est également associé à une tolérance plus favorable et à moins d'effets indésirables.

Des échantillons pour l'analyse des mutations de l'EGFR sont prélevés sur des patients par aspiration à l'aiguille transbronchique guidée par échographie endobronchique (EBUS-TBNA) et brossages et lavages bronchiques. EBUS-TBNA fournit une méthode peu invasive pour le prélèvement de tissus à partir de ganglions lymphatiques radiologiquement suspects dans la poitrine à l'aide d'une aiguille fine. Les échantillons obtenus sont collectés et envoyés au laboratoire pour traitement. À l'heure actuelle, les laboratoires s'appuient sur l'utilisation d'échantillons inclus dans la paraffine fixée au formol (FFPE) pour les tests EGFR. Par conséquent, des caillots sont produits en laboratoire à l'aide des fragments de tissu collectés. L'échantillon coagulé doit ensuite être fixé dans du formol avant d'être traité dans le laboratoire d'histologie pour produire des lames pour examen microscopique par le pathologiste consultant. Une fois l'adénocarcinome diagnostiqué, des échantillons de FFPE sont ensuite envoyés pour analyse de la mutation EGFR. Le processus de laboratoire actuel prend environ 5 jours.

Les échantillons de cytologie en milieu liquide (LBC) obtenus par les mêmes procédures d'échantillonnage sont également préparés en laboratoire et fixés à l'aide d'une solution à base de méthanol (PreservCyt). Des recherches antérieures ont été menées pour déterminer si les échantillons LBC peuvent être utilisés à la place des échantillons FFPE pour la détection des mutations EGFR avec des résultats favorables. Des exemples de ceci incluent les recherches de Zhao et al (2017), Satouchi et al (2017), De Luca et al (2017) et Malapelle et al (2016). Un passage à l'utilisation d'échantillons LBC pour le test EGFR supprimerait plusieurs étapes de traitement dans le cheminement de l'échantillon vers le test de mutation. L'immunocytochimie sera nécessaire dans la majorité des cas pour confirmer l'adénocarcinome. Cette voie plus rapide serait bénéfique dans les cas d'adénocarcinome déjà confirmé pour les tests de traitement EGFR de deuxième ligne (T790M) et dans les cas où l'échantillon de cytologie résiduel, qui serait normalement jeté, peut être utilisé pour les tests, optimisant ainsi le potentiel de l'échantillonnage.

Cette étude examinera si les échantillons LBC sont une alternative réalisable aux échantillons FFPE pour la détection des mutations EGFR à l'aide de la plateforme Biocartis Idylla.

Si les échantillons de cytologie à base de liquide s'avèrent être une alternative réalisable, cela pourrait entraîner :

• Délai d'obtention des résultats plus rapide en cas d'adénocarcinome non équivoque. Cela fournirait un accès plus précoce aux ITK permettant une prise en charge optimale des patients.
• Préparation simplifiée des échantillons au sein du laboratoire
• Permettrait une utilisation efficace de tout le matériel acquis à partir des procédures d'échantillonnage. Par exemple, des tests supplémentaires pourraient être effectués sur le tissu FFPE à la place des tests EGFR, ce qui pourrait aider au diagnostic. L'augmentation de l'utilisation efficace du matériel pourrait également empêcher les répétitions de la procédure EBUS sur les patients.
• Le méthanol s'est avéré être un fixateur supérieur au formol. L'utilisation d'échantillons de cytologie à base de liquide peut permettre de meilleurs résultats des tests moléculaires.
• Soutiendrait l'idée que des tests moléculaires pour d'autres cancers pourraient être effectués sur des échantillons de cytologie à base de liquide, par exemple des tests de mutation BRAF pour le mélanome. Prend également en charge l'utilisation d'autres échantillons liquides pour les tests moléculaires tels que les échantillons de sang qui pourraient être testés pour les cellules tumorales circulantes (échantillonnage moins invasif).