Der Nachweis von EGFR-Mutationen in flüssigkeitsbasierten Zytologieproben

Das Vorhandensein von Mutationen des aktivierenden epidermalen Wachstumsfaktorrezeptors (EGFR) identifiziert Patienten mit Lungenadenokarzinom, bei denen EGFR-Tyrosinkinase-Inhibitoren (TKI) eine potenzielle Erstlinienbehandlung sein können. Die derzeit verfügbaren TKIs sind Erlotinib, Gefitinib und Afatinib, die die Aktivität der Rezeptortyrosinkinase blockieren, wodurch die Zellproliferation gestoppt und der Zelltod verursacht wird. Mehrere Studien haben gezeigt, dass die Erstlinien-TKI-Behandlung das progressionsfreie Überleben im Vergleich zur Standard-Chemotherapie verlängert und auch mit einer günstigeren Verträglichkeit und weniger Nebenwirkungen verbunden ist.

Proben für die EGFR-Mutationsanalyse werden von Patienten durch endobronchiale Ultraschall-geführte transbronchiale Nadelaspiration (EBUS-TBNA) und bronchiale Bürsten und Waschen gesammelt. EBUS-TBNA bietet eine minimal-invasive Methode zur Gewebeentnahme aus radiologisch verdächtigen Lymphknoten im Brustkorb mit einer feinen Nadel. Die erhaltenen Proben werden gesammelt und zur Verarbeitung an das Labor geschickt. Derzeit verlassen sich Labors auf die Verwendung von formalinfixierten, in Paraffin eingebetteten (FFPE) Proben für EGFR-Tests, daher werden Gerinnsel im Labor unter Verwendung der gesammelten Gewebefragmente hergestellt. Die geronnene Probe muss dann in Formalin fixiert werden, bevor sie im Histologielabor verarbeitet wird, um Objektträger für die mikroskopische Untersuchung durch den beratenden Pathologen herzustellen. Sobald ein Adenokarzinom diagnostiziert wurde, werden FFPE-Proben zur EGFR-Mutationsanalyse geschickt. Der aktuelle Laborprozess dauert ca. 5 Tage.

Flüssigkeitsbasierte Zytologieproben (LBC), die durch die gleichen Probenahmeverfahren gewonnen wurden, werden ebenfalls im Labor vorbereitet und mit einer Lösung auf Methanolbasis (PreservCyt) fixiert. Frühere Untersuchungen wurden durchgeführt, um festzustellen, ob LBC-Proben anstelle von FFPE-Proben zum Nachweis von EGFR-Mutationen mit günstigen Ergebnissen verwendet werden können. Beispiele hierfür sind Untersuchungen von Zhao et al. (2017), Satouchi et al. (2017), De Luca et al. (2017) und Malapelle et al. (2016). Eine Umstellung auf die Verwendung von LBC-Proben für EGFR-Tests würde mehrere Verarbeitungsschritte im Probenweg zum Mutationstest beseitigen. In den meisten Fällen ist zur Bestätigung eines Adenokarzinoms eine Immunzytochemie erforderlich. Dieser schnellere Weg wäre in Fällen von bereits bestätigtem Adenokarzinom für Zweitlinien-EGFR-Behandlungstests (T790M) und in Fällen, in denen die verbleibende zytologische Probe, die normalerweise verworfen würde, für Tests verwendet werden kann, von Vorteil, wodurch das Potenzial der Probenahme optimiert wird.

In dieser Studie wird untersucht, ob LBC-Proben eine praktikable Alternative zu FFPE-Proben für den Nachweis von EGFR-Mutationen mit der Biocartis Idylla-Plattform sind.

Wenn sich herausstellt, dass flüssigkeitsbasierte Zytologieproben eine praktikable Alternative darstellen, könnte dies zu Folgendem führen:

• Schnellere Bearbeitungszeit der Ergebnisse bei eindeutigem Adenokarzinom. Dies würde einen früheren Zugang zu TKIs ermöglichen und ein optimales Patientenmanagement ermöglichen.
• Einfachere Probenvorbereitung im Labor
• Würde eine effiziente Nutzung des gesamten Materials ermöglichen, das aus den Probenahmeverfahren gewonnen wird. Zum Beispiel könnten anstelle von EGFR-Tests zusätzliche Tests am FFPE-Gewebe durchgeführt werden, die bei der Diagnose hilfreich sein könnten. Eine Steigerung der effizienten Materialnutzung könnte auch Wiederholungen des EBUS-Verfahrens bei Patienten verhindern.
• Methanol hat sich als besseres Fixiermittel als Formalin erwiesen. Die Verwendung von Zytologieproben auf Flüssigkeitsbasis kann bessere Ergebnisse bei molekularen Tests ermöglichen.
• Würde die Idee unterstützen, dass molekulare Tests für andere Krebsarten möglicherweise an flüssigkeitsbasierten Zytologieproben durchgeführt werden können, zum Beispiel BRAF-Mutationstests für Melanome. Unterstützt auch die Verwendung anderer flüssiger Proben für molekulare Tests, wie z. B. Blutproben, die auf zirkulierende Tumorzellen getestet werden könnten (weniger invasive Probenahme).