Обнаружение мутаций EGFR в образцах жидкостной цитологии

Наличие мутаций рецептора активирующего эпидермального фактора роста (EGFR) позволяет выявить пациентов с аденокарциномой легкого, у которых ингибиторы тирозинкиназы EGFR (TKI) могут быть потенциальной терапией первой линии. Доступными в настоящее время ИТК являются эрлотиниб, гефитиниб и афатиниб, которые блокируют активность рецепторной тирозинкиназы, тем самым останавливая пролиферацию клеток и вызывая гибель клеток. Несколько исследований показали, что лечение ИТК первой линии продлевает выживаемость без прогрессирования по сравнению со стандартной химиотерапией, а также связано с более благоприятной переносимостью и меньшим количеством побочных эффектов.

Образцы для анализа мутации EGFR собирают у пациентов с помощью эндобронхиальной трансбронхиальной аспирации иглой под ультразвуковым контролем (EBUS-TBNA), а также чисткой и промыванием бронхов. EBUS-TBNA представляет собой минимально инвазивный метод забора ткани из рентгенологически подозрительных лимфатических узлов грудной клетки с использованием тонкой иглы. Полученные образцы собираются и отправляются в лабораторию для обработки. В настоящее время лаборатории полагаются на использование фиксированных формалином залитых парафином образцов (FFPE) для тестирования EGFR, поэтому сгустки получают в лаборатории с использованием собранных фрагментов ткани. Сгустившийся образец затем должен быть зафиксирован в формалине перед обработкой в ​​гистологической лаборатории для получения предметных стекол для микроскопического исследования консультантом-патологом. После диагностики аденокарциномы образцы FFPE отправляются на анализ мутации EGFR. Текущий лабораторный процесс занимает примерно 5 дней.

Образцы жидкостной цитологии (LBC), полученные с помощью тех же процедур отбора проб, также готовятся в лаборатории и фиксируются раствором на основе метанола (PreservCyt). Предыдущее исследование было проведено, чтобы определить, можно ли использовать образцы LBC вместо образцов FFPE для обнаружения мутаций EGFR с благоприятными результатами. Примеры этого включают исследования Чжао и др. (2017 г.), Сатоучи и др. (2017 г.), Де Лука и др. (2017 г.) и Малапель и др. (2016 г.). Переход на использование образцов LBC для тестирования EGFR устранит несколько этапов обработки на пути образца к тестированию на мутацию. Иммуноцитохимия потребуется в большинстве случаев для подтверждения аденокарциномы. Этот более быстрый путь был бы полезен в случаях уже подтвержденной аденокарциномы для тестирования лечения второй линии EGFR (T790M) и в случаях, когда остаточный образец цитологии, который обычно выбрасывается, может быть использован для тестирования, оптимизируя потенциал отбора проб.

В этом исследовании будет изучено, являются ли образцы LBC реальной альтернативой образцам FFPE для обнаружения мутаций EGFR с использованием платформы Biocartis Idylla.

Если жидкие цитологические образцы будут признаны приемлемой альтернативой, это может привести к:

• Более быстрое получение результатов в случаях однозначной аденокарциномы. Это обеспечило бы более ранний доступ к ИТК, что позволило бы оптимизировать ведение пациентов.
• Упрощение пробоподготовки в лаборатории
• Позволит эффективно использовать весь материал, полученный в результате процедур отбора проб. Например, можно провести дополнительное тестирование ткани FFPE вместо тестирования EGFR, что может помочь в диагностике. Повышение эффективности использования материала также может предотвратить повторение процедуры EBUS у пациентов.
• Было обнаружено, что метанол является лучшим фиксатором, чем формалин. Использование жидких цитологических образцов может позволить получить лучшие результаты молекулярного тестирования.
• Окажет поддержку идее о том, что молекулярное тестирование на другие виды рака можно проводить на жидких цитологических образцах, например, при тестировании на мутацию BRAF для меланомы. Также обеспечивает поддержку использования других жидких образцов для молекулярного тестирования, таких как образцы крови, которые могут быть проверены на наличие циркулирующих опухолевых клеток (менее инвазивный отбор).