A Detecção de Mutações EGFR em Amostras Citológicas de Base Líquida

A presença de mutações ativadoras do receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR) identifica pacientes com adenocarcinoma pulmonar nos quais os inibidores de tirosina quinase (TKI) do EGFR podem ser um potencial tratamento de primeira linha. Os TKIs atualmente disponíveis são erlotinib, gefitinib e afatinib, que funcionam bloqueando a atividade da tirosina quinase do receptor, interrompendo assim a proliferação celular e causando a morte celular. Vários estudos descobriram que o tratamento de primeira linha com TKI prolonga a sobrevida livre de progressão em comparação com a quimioterapia padrão e também está associado a uma tolerabilidade mais favorável e menos efeitos adversos.

Amostras para análise de mutação de EGFR são coletadas de pacientes por aspiração por agulha transbrônquica guiada por ultrassom endobrônquico (EBUS-TBNA) e escovados e lavagens brônquicas. EBUS-TBNA fornece um método minimamente invasivo para amostragem de tecido de gânglios linfáticos suspeitos radiologicamente no tórax usando uma agulha de calibre fino. As amostras obtidas são coletadas e enviadas ao laboratório para processamento. Atualmente, os laboratórios contam com o uso de amostras fixadas em formalina e embebidas em parafina (FFPE) para testes de EGFR, portanto, os coágulos são produzidos no laboratório usando os fragmentos de tecido coletados. A amostra coagulada deve então ser fixada em formalina antes de ser processada no laboratório de histologia para produzir lâminas para exame microscópico pelo patologista consultor. Uma vez diagnosticado o adenocarcinoma, as amostras FFPE são então enviadas para análise de mutação EGFR. O processo laboratorial atual leva aproximadamente 5 dias.

As amostras de citologia líquida (LBC) obtidas através dos mesmos procedimentos de amostragem também são preparadas no laboratório e fixadas usando uma solução à base de metanol (PreservCyt). Pesquisas anteriores foram realizadas para determinar se amostras LBC podem ser usadas em vez de amostras FFPE para a detecção de mutações EGFR com resultados favoráveis. Exemplos disso incluem pesquisas de Zhao et al (2017), Satouchi et al (2017), De Luca et al (2017) e Malapelle et al (2016). Uma mudança para o uso de amostras LBC para teste de EGFR removeria várias etapas de processamento no caminho da amostra para o teste de mutação. A imunocitoquímica será necessária na maioria dos casos para a confirmação do adenocarcinoma. Essa via mais rápida seria benéfica em casos de adenocarcinoma já confirmado para teste de tratamento de segunda linha com EGFR (T790M) e em casos em que a amostra citológica residual, que normalmente seria descartada, pode ser utilizada para teste, otimizando o potencial da amostragem.

Este estudo investigará se as amostras LBC são uma alternativa viável às amostras FFPE para detecção de mutações EGFR usando a plataforma Biocartis Idylla.

Se as amostras de citologia baseadas em líquido forem consideradas uma alternativa viável, isso pode resultar em:

• Tempo de resposta mais rápido de resultados em casos de adenocarcinoma inequívoco. Isso forneceria acesso antecipado aos TKIs, permitindo o gerenciamento ideal do paciente.
• Preparação de amostras mais fácil dentro do laboratório
• Permitiria o uso eficiente de todo o material adquirido nos procedimentos de amostragem. Por exemplo, testes adicionais podem ser realizados no tecido FFPE no lugar do teste EGFR, o que pode ajudar no diagnóstico. O aumento no uso eficiente de material também pode evitar a repetição do procedimento EBUS em pacientes.
• Verificou-se que o metanol é um fixador superior ao da formalina. O uso de amostras de citologia baseadas em líquido pode permitir melhores resultados de testes moleculares.
• Forneceria suporte para a ideia de que o teste molecular para outros cânceres pode ser realizado em amostras de citologia de base líquida, por exemplo, teste de mutação BRAF para melanoma. Também fornece suporte para o uso de outras amostras líquidas para testes moleculares, como amostras de sangue que podem ser testadas para células tumorais circulantes (amostragem menos invasiva).