Il rilevamento delle mutazioni dell'EGFR nei campioni di citologia a base liquida

La presenza di mutazioni attivanti del recettore del fattore di crescita epidermico (EGFR) identifica i pazienti con adenocarcinoma polmonare in cui gli inibitori della tirosin-chinasi (TKI) dell'EGFR possono essere un potenziale trattamento di prima linea. I TKI attualmente disponibili sono erlotinib, gefitinib e afatinib, che agiscono bloccando l'attività del recettore tirosin-chinasico, arrestando così la proliferazione cellulare e provocandone la morte. Diversi studi hanno scoperto che il trattamento di prima linea con TKI prolunga la sopravvivenza libera da progressione rispetto alla chemioterapia standard ed è anche associato a una tollerabilità più favorevole e meno effetti avversi.

I campioni per l'analisi della mutazione dell'EGFR vengono raccolti dai pazienti mediante agoaspirato transbronchiale endobronchiale guidato da ultrasuoni (EBUS-TBNA) e spazzolamento e lavaggio bronchiale. EBUS-TBNA fornisce un metodo minimamente invasivo per il prelievo di tessuto da linfonodi radiologicamente sospetti nel torace utilizzando un ago di calibro sottile. I campioni ottenuti vengono raccolti e inviati al laboratorio per l'elaborazione. Attualmente, i laboratori si affidano all'uso di campioni inclusi in paraffina fissati in formalina (FFPE) per i test EGFR, pertanto i coaguli vengono prodotti in laboratorio utilizzando i frammenti di tessuto raccolti. Il campione coagulato deve quindi essere fissato in formalina prima di essere processato nel laboratorio di istologia per produrre vetrini per l'esame microscopico da parte del consulente patologo. Una volta diagnosticato l'adenocarcinoma, i campioni FFPE vengono quindi inviati per l'analisi della mutazione EGFR. L'attuale processo di laboratorio richiede circa 5 giorni.

Anche i campioni per citologia su base liquida (LBC) ottenuti mediante le stesse procedure di campionamento vengono preparati in laboratorio e fissati utilizzando una soluzione a base di metanolo (PreservCyt). Sono state condotte ricerche precedenti per determinare se i campioni LBC possono essere utilizzati al posto dei campioni FFPE per il rilevamento delle mutazioni EGFR con risultati favorevoli. Esempi di ciò includono la ricerca di Zhao et al (2017), Satouchi et al (2017), De Luca et al (2017) e Malapelle et al (2016). Un passaggio all'uso di campioni LBC per il test EGFR eliminerebbe più passaggi di elaborazione nel percorso del campione per il test di mutazione. L'immunocitochimica sarà richiesta nella maggior parte dei casi per la conferma dell'adenocarcinoma. Questo percorso più rapido sarebbe vantaggioso nei casi di adenocarcinoma già confermato per il test di trattamento con EGFR di seconda linea (T790M) e nei casi in cui il campione citologico residuo, che normalmente verrebbe scartato, può essere utilizzato per il test, ottimizzando il potenziale del campionamento.

Questo studio esaminerà se i campioni LBC sono un'alternativa fattibile ai campioni FFPE per il rilevamento delle mutazioni EGFR utilizzando la piattaforma Biocartis Idylla.

Se i campioni citologici a base liquida si rivelano un'alternativa fattibile, ciò potrebbe comportare:

• Tempi di consegna più rapidi dei risultati nei casi di adenocarcinoma inequivocabile. Ciò fornirebbe un accesso anticipato ai TKI consentendo una gestione ottimale del paziente.
• Preparazione del campione più semplice all'interno del laboratorio
• Consentirebbe un uso efficiente di tutto il materiale acquisito dalle procedure di campionamento. Ad esempio, potrebbero essere eseguiti ulteriori test sul tessuto FFPE al posto del test EGFR che potrebbe aiutare nella diagnosi. L'aumento dell'uso efficiente del materiale potrebbe anche prevenire ripetizioni della procedura EBUS sui pazienti.
• Il metanolo è risultato essere un fissativo superiore rispetto alla formalina. L'uso di campioni citologici a base liquida può consentire risultati migliori dai test molecolari.
• Fornirebbe supporto all'idea che i test molecolari per altri tipi di cancro potrebbero essere eseguiti su campioni di citologia a base liquida, ad esempio test di mutazione BRAF per il melanoma. Fornisce inoltre il supporto dell'uso di altri campioni liquidi per test molecolari come campioni di sangue che potrebbero essere testati per le cellule tumorali circolanti (campionamento meno invasivo).