La detección de mutaciones de EGFR en muestras de citología de base líquida

La presencia de mutaciones activadoras del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR) identifica a los pacientes con adenocarcinoma de pulmón en los que los inhibidores de la tirosina quinasa (TKI) del EGFR pueden ser un posible tratamiento de primera línea. Los TKI actualmente disponibles son erlotinib, gefitinib y afatinib, que actúan bloqueando la actividad de la tirosina quinasa del receptor, lo que detiene la proliferación celular y provoca la muerte celular. Varios estudios han encontrado que el tratamiento con TKI de primera línea prolonga la supervivencia libre de progresión en comparación con la quimioterapia estándar y también se asocia con una tolerabilidad más favorable y menos efectos adversos.

Las muestras para el análisis de la mutación del EGFR se obtienen de los pacientes mediante aspiración con aguja transbronquial guiada por ecografía endobronquial (EBUS-TBNA) y lavados y cepillados bronquiales. EBUS-TBNA proporciona un método mínimamente invasivo para la toma de muestras de tejido de los ganglios linfáticos del tórax radiológicamente sospechosos con una aguja de calibre fino. Las muestras obtenidas se recogen y se envían al laboratorio para su procesamiento. En la actualidad, los laboratorios confían en el uso de muestras incluidas en parafina fijadas con formalina (FFPE) para las pruebas de EGFR, por lo tanto, los coágulos se producen en el laboratorio utilizando los fragmentos de tejido recolectados. Luego, la muestra coagulada debe fijarse en formalina antes de ser procesada en el laboratorio de histología para producir portaobjetos para el examen microscópico por parte del patólogo consultor. Una vez que se diagnostica el adenocarcinoma, las muestras de FFPE se envían para el análisis de mutación de EGFR. El proceso de laboratorio actual toma aproximadamente 5 días.

Las muestras de citología en base líquida (LBC) obtenidas a través de los mismos procedimientos de muestreo también se preparan en el laboratorio y se fijan con una solución a base de metanol (PreservCyt). Se han llevado a cabo investigaciones anteriores para determinar si las muestras de LBC se pueden utilizar en lugar de las muestras de FFPE para la detección de mutaciones de EGFR con resultados favorables. Ejemplos de esto incluyen la investigación de Zhao et al (2017), Satouchi et al (2017), De Luca et al (2017) y Malapelle et al (2016). Un cambio al uso de muestras de LBC para la prueba de EGFR eliminaría múltiples pasos de procesamiento en el camino de la muestra para la prueba de mutación. Se requerirá inmunocitoquímica en la mayoría de los casos para confirmar el adenocarcinoma. Esta vía más rápida sería beneficiosa en casos de adenocarcinoma ya confirmado para pruebas de tratamiento de EGFR de segunda línea (T790M) y en casos en los que la muestra de citología residual, que normalmente se descartaría, pueda utilizarse para la prueba, optimizando el potencial de la muestra.

Este estudio investigará si las muestras LBC son una alternativa factible a las muestras FFPE para la detección de mutaciones de EGFR utilizando la plataforma Biocartis Idylla.

Si se determina que las muestras de citología de base líquida son una alternativa factible, esto podría resultar en:

• Tiempo de respuesta más rápido de resultados en casos de adenocarcinoma inequívoco. Esto proporcionaría un acceso más temprano a los inhibidores de la tirosina quinasa, lo que permitiría un manejo óptimo del paciente.
• Preparación de muestras más sencilla en el laboratorio
• Permitiría el uso eficiente de todo el material adquirido de los procedimientos de muestreo. Por ejemplo, se podrían realizar pruebas adicionales en el tejido FFPE en lugar de las pruebas de EGFR que podrían ayudar en el diagnóstico. El aumento en el uso eficiente del material también podría evitar repeticiones del procedimiento EBUS en los pacientes.
• Se ha encontrado que el metanol es un fijador superior a la formalina. El uso de muestras de citología de base líquida puede permitir obtener mejores resultados de las pruebas moleculares.
• Proporcionaría apoyo a la idea de que las pruebas moleculares para otros tipos de cáncer pueden llevarse a cabo en muestras de citología de base líquida, por ejemplo, pruebas de mutación BRAF para melanoma. También respalda el uso de otras muestras líquidas para pruebas moleculares, como muestras de sangre que podrían analizarse en busca de células tumorales circulantes (muestreo menos invasivo).