De detectie van EGFR-mutaties in op vloeistof gebaseerde cytologiemonsters

De aanwezigheid van activerende mutaties in de epidermale groeifactorreceptor (EGFR) identificeert patiënten met longadenocarcinoom waarbij EGFR-tyrosinekinaseremmers (TKI) een potentiële eerstelijnsbehandeling kunnen zijn. De TKI's die momenteel beschikbaar zijn, zijn erlotinib, gefitinib en afatinib, die werken door de activiteit van receptortyrosinekinase te blokkeren, waardoor celproliferatie wordt gestopt en celdood wordt veroorzaakt. Verschillende studies hebben aangetoond dat eerstelijns TKI-behandeling de progressievrije overleving verlengt in vergelijking met standaardchemotherapie, en ook geassocieerd wordt met een gunstigere verdraagbaarheid en minder bijwerkingen.

Monsters voor EGFR-mutatieanalyse worden bij patiënten verzameld door middel van endobronchiale echogeleide transbronchiale naaldaspiratie (EBUS-TBNA) en bronchiale poetsbeurten en spoelingen. EBUS-TBNA biedt een minimaal invasieve methode voor weefselbemonstering van radiologisch verdachte lymfeklieren in de borst met behulp van een fijne naald. De verkregen monsters worden verzameld en voor verwerking naar het laboratorium gestuurd. Momenteel vertrouwen laboratoria op het gebruik van in formaline gefixeerde, in paraffine ingebedde (FFPE) monsters voor EGFR-testen, daarom worden in het laboratorium stolsels geproduceerd met behulp van de verzamelde weefselfragmenten. Het gestolde monster moet vervolgens in formaline worden gefixeerd voordat het in het histologielaboratorium wordt verwerkt tot objectglaasjes voor microscopisch onderzoek door de patholoog-anatoom. Zodra adenocarcinoom is gediagnosticeerd, worden FFPE-monsters verzonden voor EGFR-mutatieanalyse. Het huidige laboratoriumproces duurt ongeveer 5 dagen.

Cytologiemonsters op vloeistofbasis (LBC) die via dezelfde bemonsteringsprocedures zijn verkregen, worden ook in het laboratorium geprepareerd en gefixeerd met behulp van een oplossing op basis van methanol (PreservCyt). Er is eerder onderzoek gedaan om te bepalen of LBC-monsters kunnen worden gebruikt in plaats van FFPE-monsters voor de detectie van EGFR-mutaties met gunstige resultaten. Voorbeelden hiervan zijn onderzoek van Zhao et al (2017), Satouchi et al (2017), De Luca et al (2017) en Malapelle et al (2016). Een overstap naar het gebruik van LBC-monsters voor EGFR-testen zou meerdere verwerkingsstappen in het monstertraject naar mutatietesten elimineren. Immunocytochemie zal in de meeste gevallen vereist zijn voor bevestiging van adenocarcinoom. Deze snellere route zou gunstig zijn in gevallen van reeds bevestigd adenocarcinoom voor tweedelijns EGFR-behandelingstests (T790M) en in gevallen waarin het resterende cytologiemonster, dat normaal gesproken zou worden weggegooid, kan worden gebruikt voor testen, waardoor het potentieel van de bemonstering wordt geoptimaliseerd.

Deze studie zal onderzoeken of LBC-stalen een haalbaar alternatief zijn voor FFPE-stalen voor de detectie van EGFR-mutaties met behulp van het Biocartis Idylla-platform.

Als cytologiemonsters op vloeistofbasis een haalbaar alternatief blijken te zijn, kan dit resulteren in:

• Snellere doorlooptijd van resultaten in gevallen van ondubbelzinnig adenocarcinoom. Dit zou eerder toegang geven tot TKI's, waardoor een optimaal patiëntenbeheer mogelijk is.
• Eenvoudigere monstervoorbereiding in het laboratorium
• Zou een efficiënt gebruik mogelijk maken van al het materiaal dat is verkregen uit de bemonsteringsprocedures. Er kunnen bijvoorbeeld aanvullende tests worden uitgevoerd op het FFPE-weefsel in plaats van EGFR-testen, wat zou kunnen helpen bij de diagnose. Toename van efficiënt gebruik van materiaal zou ook herhaling van de EBUS-procedure bij patiënten kunnen voorkomen.
• Methanol blijkt een superieur fixeermiddel te zijn dan formaline. Het gebruik van op vloeistof gebaseerde cytologiemonsters kan zorgen voor betere resultaten van moleculaire testen.
• Zou het idee ondersteunen dat moleculaire tests voor andere kankers mogelijk kunnen worden uitgevoerd op op vloeistof gebaseerde cytologiemonsters, bijvoorbeeld BRAF-mutatietests voor melanoom. Biedt ook ondersteuning voor het gebruik van andere vloeibare monsters voor moleculaire tests, zoals bloedmonsters die kunnen worden getest op circulerende tumorcellen (minder invasieve bemonstering).