Index clinique moléculaire mixte (MMCI) dans le lymphome diffus à grandes cellules B (DLBCL) (MMCI)

Le lymphome diffus à grandes cellules B (DLBCL) est un groupe hétérogène de cancers classés ensemble sur la base de la morphologie, de l'immunophénotype, des altérations génétiques et du comportement clinique. La distinction du DLBCL en catégories de cellules d'origine (COO), basée sur des modèles d'expression génique rappelant (cellule B du centre germinal - le groupe GC et cellule B activée - le groupe ABC-), tel que défini et caractérisé par le Lymphome & Leukemia Molecular Profiling Project (LLMPP), a de profondes implications biologiques, pronostiques et thérapeutiques potentielles et dans la toxicomanie, l'effet pronostique négatif de l'oncogène de la myélocytomatose (MYC), du lymphome à cellules B 2 (BCL2) et du lymphome à cellules B-6 (BCL6 ) les altérations du DLBCL dépendent largement des sous-types de COO . De plus, la combinaison des altérations BCL2, MYC et BCL6 avec l'IPI (International Prognostic Index) identifie des groupes pronostiques nettement plus mauvais au sein des sous-types individuels de COO. Les méthodes originales utilisées pour définir ces entités, ont effectué le profilage de l'expression génique (GEP) à l'aide de puces à ADN sur de l'ARN dérivé de tissus congelés (FT). Par la suite, dans une tentative de déterminer le COO dans la pratique courante en utilisant des tissus inclus dans la paraffine fixés au formol (FFPE) couramment disponibles, des méthodes immunohistochimiques binaires (IHC) moins précises mais relativement peu coûteuses ont été utilisées . Cependant en particulier en non GC, le taux de concordance était insatisfaisant. Un degré élevé d'accord a été démontré à la place dans la détermination du COO, avec une signature de 20 gènes provenant d'échantillons de tumeurs inclus dans la paraffine fixée au formol (FFPE), avec le kit Lymph2Cx (nCounter® Technology, NanoString Technologies), devenant l'étalon-or suggéré dans World Classification de l'Organisation de la Santé (OMS). Cependant récemment, il a été démontré que le statut COO et BCL2, MYC, BCL6 ne suffisent pas à décrire le risque moléculaire de ces patients, suggérant une sous-structure génétique qui reste à découvrir. De plus, le microenvironnement tumoral et en particulier le rapport entre les effecteurs immunitaires et les molécules de point de contrôle ont également un rôle pronostique dans le DLBCL. En outre, la fréquence élevée des myofibroblastes, des cellules dendritiques et du groupe de cellules T positives à différenciation 4 (CD4) était corrélée à de meilleurs résultats.

En conclusion, une analyse génomique complète de ces patients et une caractérisation approfondie du compartiment immunitaire et des points de contrôle immunitaires (Nanostring, immunohistochimie pour BCL2, MYC, BCL6, analyse de mutation, analyse protéomique, etc.) associées au score IPI, permettront la création de un indice clinique, moléculaire et mixte (MMCI) pour identifier les groupes de pronostic extrêmement médiocre, au sein de chaque sous-type de COO, afin d'envisager à l'avenir des traitements adaptés au risque.

Il s'agit d'une étude observationnelle prospective d'une durée totale de 36 mois. L'objectif principal est l'identification de nouveaux biomarqueurs pronostiques pour les patients DLBCL en termes de survie sans progression (PFS) et capables d'ajouter une capacité prédictive à des facteurs cliniques importants reconnus.

Les objectifs secondaires sont :

• identifier de nouveaux biomarqueurs associés à la survie globale (OS) et au taux de réponse objective (ORR) ;
• caractériser le tissu et le microenvironnement immunitaire circulant des patients DLBCL par transcriptomique en masse et unicellulaire ;
• évaluer la corrélation entre l'expression des gènes de point de contrôle immunitaire et la signature de l'ARNm ;
• décrire le statut mutationnel d'un panel de gènes pertinents pour la pathogenèse du DLBCL ;.
• pour évaluer la corrélation entre l'expression des protéines, le statut mutationnel et la signature de l'ARNm.

Pour chaque patient inscrit, des déterminations immunohistochimiques seront effectuées par chaque Unité de Pathologie : COO (type GC ou ABC selon l'algorithme de Hans), évaluation des CD20, CD5, CD10, Bcl6, Bcl2 (seuil>50 %), MUM1/IRF4, c-myc (cut off>40 %) et Ki67, FISH pour c-myc et si réarrangé, pour Bcl2 et Bcl6). De plus, des échantillons de tumeurs inclus en paraffine (FFPE) seront collectés pour l'extraction de l'ARN et l'analyse de l'expression de l'ARNm et centralisés à l'IRST-IRCCS.