Mieszany wskaźnik kliniczny molekularny (MMCI) w rozlanym chłoniaku z dużych komórek B (DLBCL) (MMCI)

Rozlany chłoniak z dużych komórek B (DLBCL) to heterogenna grupa nowotworów sklasyfikowanych razem na podstawie morfologii, immunofenotypu, zmian genetycznych i zachowania klinicznego. Podział DLBCL na kategorie komórek pochodzenia (COO), w oparciu o wzorce ekspresji genów przypominające (komórki B centrum rozrodczego – grupa GC i aktywowane komórki B – grupa ABC), jak zdefiniowano i scharakteryzowano przez chłoniaka & Leukemia Molecular Profiling Project (LLMPP), ma głębokie implikacje biologiczne, prognostyczne i potencjalne terapeutyczne, a ponadto negatywny wpływ prognostyczny onkogenu myelocytomatozy (MYC), chłoniaka z komórek B 2 (BCL2) i chłoniaka z komórek B-6 (BCL6 ) wykazano, że zmiany w DLBCL są w dużej mierze zależne od podtypów COO. Ponadto połączenie zmian BCL2, MYC i BCL6 z IPI (International Prognostic Index) identyfikuje wyraźnie gorsze grupy prognostyczne w obrębie poszczególnych podtypów COO. Oryginalne metody użyte do zdefiniowania tych jednostek obejmowały profilowanie ekspresji genów (GEP) przy użyciu mikromacierzy na RNA pochodzącym z zamrożonej tkanki (FT). Następnie, próbując określić COO w standardowej praktyce przy użyciu powszechnie dostępnych tkanek utrwalonych w formalinie i zatopionych w parafinie (FFPE), zastosowano mniej precyzyjne, ale stosunkowo niedrogie binarne metody immunohistochemiczne (IHC). Jednak w szczególności w przypadku innych niż GC wskaźnik zgodności był niezadowalający. Zamiast tego wykazano wysoki stopień zgodności w określaniu COO, z sygnaturą 20 genów z utrwalonych w formalinie próbek guza zatopionych w parafinie (FFPE), z zestawem Lymph2Cx (technologia nCounter®, NanoString Technologies), stając się złotym standardem sugerowanym w World Klasyfikacja Organizacji Zdrowia (WHO). Jednak ostatnio wykazano, że status COO i BCL2, MYC, BCL6 nie wystarcza do opisania ryzyka molekularnego tych pacjentów, co sugeruje podstrukturę genetyczną, która wciąż pozostaje do odkrycia. Ponadto mikrośrodowisko guza, aw szczególności stosunek efektorów immunologicznych i cząsteczek punktów kontrolnych, również odgrywa rolę prognostyczną w DLBCL. Poza tym podwyższona częstość występowania miofibroblastów, komórek dendrytycznych i klastra limfocytów T dodatnich pod względem różnicowania 4 (CD4) korelowała z lepszymi wynikami.

Podsumowując, kompleksowa analiza genomiczna tych pacjentów oraz dogłębna charakterystyka przedziału immunologicznego i punktów kontrolnych układu odpornościowego (nanostring, immunohistochemia dla BCL2, MYC, BCL6, analiza mutacji, analiza proteomiczna itp.) połączona z wynikiem IPI, pozwoli na stworzenie mieszany, molekularny, kliniczny wskaźnik (MMCI) w celu zidentyfikowania wyjątkowo słabych grup prognostycznych, w ramach każdego podtypu COO, w celu rozważenia leczenia dostosowanego do ryzyka w przyszłości.

Jest to prospektywne badanie obserwacyjne trwające łącznie 36 miesięcy. Głównym celem jest identyfikacja nowych biomarkerów prognostycznych dla pacjentów z DLBCL pod względem przeżycia wolnego od progresji (PFS) i możliwość dodania zdolności predykcyjnej do uznanych ważnych czynników klinicznych.

Cele drugorzędne to:

• zidentyfikować nowe biomarkery związane z całkowitym przeżyciem (OS) i odsetkiem obiektywnych odpowiedzi (ORR);
• scharakteryzowanie tkanki i krążącego mikrośrodowiska immunologicznego pacjentów z DLBCL za pomocą transkryptomiki masowej i pojedynczej komórki;
• ocena korelacji między ekspresją genów immunologicznych - punktów kontrolnych a sygnaturą mRNA;
• opisanie stanu mutacji panelu genów istotnych dla patogenezy DLBCL;
• ocenić korelację między ekspresją białka, statusem mutacji i sygnaturą mRNA.

Dla każdego zakwalifikowanego pacjenta każdy Zakład Patologii wykona oznaczenia immunohistochemiczne: COO (typ GC o ABC według algorytmu Hansa), ocena CD20, CD5, CD10, Bcl6, Bcl2 (cut off>50%), MUM1/IRF4, c-myc (odcięcie> 40%) i Ki67, FISH dla c-myc i jeśli przegrupowane, dla Bcl2 e Bcl6). Ponadto próbki guza zatopione w parafinie (FFPE) zostaną zebrane w celu ekstrakcji RNA i analizy ekspresji mRNA i scentralizowane w IRST-IRCCS.