Índice Clínico Molecular Mixto (MMCI) en Linfoma Difuso de Células B Grandes (DLBCL) (MMCI)

El linfoma difuso de células B grandes (DLBCL, por sus siglas en inglés) es un grupo heterogéneo de cánceres que se clasifican juntos según la morfología, el inmunofenotipo, las alteraciones genéticas y el comportamiento clínico. La distinción de DLBCL en categorías de células de origen (COO), con base en patrones de expresión génica que recuerdan (células B del centro germinal, el grupo GC y células B activadas, el grupo ABC), tal como se define y caracteriza por el Linfoma & Leukemia Molecular Profiling Project (LLMPP), tiene profundas implicaciones biológicas, pronósticas y terapéuticas potenciales y, en adicción, el efecto pronóstico negativo del oncogén de mielocitomatosis (MYC), el linfoma de células B 2 (BCL2) y el linfoma de células B-6 (BCL6 ) se ha demostrado que las alteraciones en DLBCL dependen en gran medida de los subtipos de COO . Además, la combinación de las alteraciones de BCL2, MYC y BCL6 con el IPI (Índice de pronóstico internacional) identifica grupos de pronóstico marcadamente peor dentro de los subtipos de COO individuales. Los métodos originales utilizados para definir estas entidades realizaban perfiles de expresión génica (GEP) utilizando micromatrices en ARN derivado de tejido congelado (FT). Posteriormente, en un intento de determinar el COO en la práctica estándar utilizando tejido incluido en parafina fijado con formalina (FFPE) comúnmente disponible, se han utilizado métodos inmunohistoquímicos binarios (IHC) menos precisos pero relativamente económicos. Sin embargo, en particular en no GC, la tasa de concordancia fue insatisfactoria. En cambio, se ha demostrado un alto grado de acuerdo en la determinación de COO, con una firma de 20 genes de especímenes tumorales fijados en formalina e incrustados en parafina (FFPE), con el kit Lymph2Cx (nCounter® Technology, NanoString Technologies), convirtiéndose en el estándar de oro sugerido en World Clasificación de la Organización de la Salud (OMS). Sin embargo, recientemente se demostró que el estado de COO y BCL2, MYC, BCL6 no son suficientes para describir el riesgo molecular de estos pacientes, lo que sugiere una subestructura genética que aún está por descubrir. Además, el microambiente tumoral y, en particular, la proporción de efectores inmunitarios y moléculas de punto de control también tienen un papel pronóstico en DLBCL. Además, la frecuencia elevada de miofibroblastos, células dendríticas y células T positivas del grupo de diferenciación 4 (CD4) se correlacionaron con mejores resultados.

En conclusión, un análisis genómico completo de estos pacientes y una caracterización profunda del compartimento inmunitario y los puntos de control inmunitarios (Nanostring, inmunohistoquímica para BCL2, MYC, BCL6, análisis de mutaciones, análisis proteómico, etc.) junto con la puntuación IPI, permitirán la creación de un índice clínico molecular mixto (MMCI) para identificar grupos de pronóstico extremadamente pobre, dentro de cada subtipo de COO, para considerar tratamientos adaptados al riesgo en el futuro.

Se trata de un estudio observacional prospectivo con una duración total de 36 meses. El objetivo principal es la identificación de nuevos biomarcadores pronósticos para pacientes con DLBCL en términos de supervivencia libre de progresión (PFS) y capaces de agregar capacidad predictiva a factores clínicos importantes reconocidos.

Los objetivos secundarios son:

• para identificar nuevos biomarcadores asociados con la supervivencia global (OS) y la tasa de respuesta objetiva (ORR);
• caracterizar el tejido y el microambiente inmunitario circulante de pacientes con DLBCL mediante transcriptómica a granel y de células individuales;
• evaluar la correlación entre la expresión de genes de puntos de control inmunitarios y la firma de ARNm;
• describir el estado mutacional de un panel de genes relevantes para la patogenia del LDCBG;
• para evaluar la correlación entre la expresión de proteínas, el estado mutacional y la firma del ARNm.

Para cada paciente inscrito se realizarán determinaciones inmunohistoquímicas por cada Unidad de Patología: COO (tipo GC o ABC según algoritmo de Hans), evaluación de CD20, CD5, CD10, Bcl6, Bcl2 (cut off>50%), MUM1/IRF4, c-myc (cut off>40%) y Ki67, FISH para c-myc y si se reordena, para Bcl2 y Bcl6). Además, las muestras de tumores incluidos en parafina (FFPE) se recolectarán para la extracción de ARN y el análisis de expresión de ARNm y se centralizarán en IRST-IRCCS.