Gemischter molekularer klinischer Index (MMCI) bei diffusem großzelligem B-Zell-Lymphom (DLBCL) (MMCI)

Das diffuse großzellige B-Zell-Lymphom (DLBCL) ist eine heterogene Gruppe von Krebsarten, die auf der Grundlage von Morphologie, Immunphänotyp, genetischen Veränderungen und klinischem Verhalten zusammen klassifiziert werden. Die Unterscheidung von DLBCL in Herkunftszellen (COO)-Kategorien, basierend auf Mustern der Genexpression, die an das Lymphom erinnern (Keimzentrum B-Zelle – die GC-Gruppe und aktivierte B-Zelle – die ABC-Gruppe –), wie sie durch das Lymphom definiert und gekennzeichnet sind & Leukemia Molecular Profiling Project (LLMPP), hat tiefgreifende biologische, prognostische und potenzielle therapeutische Implikationen und in Abhängigkeit, die negative prognostische Wirkung von Myelozytomatose-Onkogen (MYC), B-Zell-Lymphom 2 (BCL2) und B-Zell-Lymphom-6 (BCL6 ) Veränderungen in DLBCL wurden weitgehend abhängig von COO - Subtypen gezeigt . Darüber hinaus identifiziert die Kombination von BCL2-, MYC- und BCL6-Veränderungen mit IPI (International Prognostic Index) deutlich schlechtere prognostische Gruppen innerhalb einzelner COO-Subtypen. Die ursprünglichen Methoden, die zur Definition dieser Entitäten verwendet wurden, führten Genexpressionsprofilierung (GEP) unter Verwendung von Microarrays auf RNA aus gefrorenem Gewebe (FT) durch. Anschließend wurden in einem Versuch, COO in der Standardpraxis unter Verwendung allgemein verfügbarer formalinfixierter, in Paraffin eingebetteter Gewebe (FFPE) zu bestimmen, weniger präzise, ​​aber relativ kostengünstige binäre immunhistochemische (IHC) Methoden verwendet . Allerdings war insbesondere bei Nicht-GC die Übereinstimmungsrate unbefriedigend. Stattdessen wurde ein hohes Maß an Übereinstimmung bei der COO-Bestimmung gezeigt, wobei eine Signatur von 20 Genen aus formalinfixierten, in Paraffin eingebetteten (FFPE) Tumorproben mit dem Lymph2Cx-Kit (nCounter®-Technologie, NanoString Technologies) zum in World vorgeschlagenen Goldstandard wurde Klassifikation der Gesundheitsorganisation (WHO) . Kürzlich wurde jedoch gezeigt, dass der COO- und BCL2-, MYC-, BCL6-Status nicht ausreichen, um das molekulare Risiko dieser Patienten zu beschreiben, was auf eine noch zu entdeckende genetische Unterstruktur hindeutet . Darüber hinaus spielen auch die Tumormikroumgebung und insbesondere das Verhältnis von Immuneffektoren und Checkpoint-Molekülen eine prognostische Rolle bei DLBCL. Außerdem korrelierte eine erhöhte Häufigkeit von Myofibroblasten, dendritischen Zellen und Cluster of Differentiation 4 (CD4) positiven T-Zellen mit besseren Ergebnissen.

Zusammenfassend lässt sich sagen, dass eine umfassende Genomanalyse dieser Patienten und eine tiefgreifende Charakterisierung des Immunkompartiments und der Immunkontrollpunkte (Nanostring, Immunhistochemie für BCL2, MYC, BCL6, Mutationsanalyse, Proteomikanalyse usw.), verbunden mit dem IPI-Score, die Erstellung von ermöglichen wird ein gemischter, molekularer, klinischer Index (MMCI) zur Identifizierung von Gruppen mit extrem schlechter Prognose innerhalb jedes COO-Subtyps, um in Zukunft eine risikoangepasste Behandlung in Betracht zu ziehen.

Es handelt sich um eine prospektive Beobachtungsstudie mit einer Gesamtdauer von 36 Monaten. Das primäre Ziel ist die Identifizierung neuer prognostischer Biomarker für DLBCL-Patienten in Bezug auf das progressionsfreie Überleben (PFS) und die Fähigkeit, anerkannten wichtigen klinischen Faktoren Vorhersagekapazität hinzuzufügen.

Die sekundären Ziele sind:

• um neue Biomarker im Zusammenhang mit dem Gesamtüberleben (OS) und der objektiven Ansprechrate (ORR) zu identifizieren;
• Charakterisierung des Gewebes und der zirkulierenden Immunmikroumgebung von DLBCL-Patienten durch Massen- und Einzelzell-Transkriptomik;
• um die Korrelation zwischen der Expression von Immun-Checkpoint-Genen und der mRNA-Signatur zu bewerten;
• um den Mutationsstatus einer Reihe von Genen zu beschreiben, die für die DLBCL-Pathogenese relevant sind;.
• um die Korrelation zwischen Proteinexpression, Mutationsstatus und der mRNA-Signatur zu beurteilen.

Für jeden eingeschriebenen Patienten werden von jeder Pathologieabteilung immunhistochemische Bestimmungen durchgeführt: COO (GC oder ABC-Typ gemäß Hans-Algorithmus), Bewertung von CD20, CD5, CD10, Bcl6, Bcl2 (Cut-off > 50 %), MUM1/IRF4, c-myc (abgetrennt > 40 %) und Ki67, FISH für c-myc und, falls umgeordnet, für Bcl2 und Bcl6). Darüber hinaus werden in Paraffin eingebettete (FFPE) Tumorproben für die RNA-Extraktion und mRNA-Expressionsanalyse gesammelt und am IRST-IRCCS zentralisiert.