Índice Clínico Molecular Misto (MMCI) em Linfoma Difuso de Grandes Células B (DLBCL) (MMCI)

Linfoma difuso de grandes células B (DLBCL) é um grupo heterogêneo de cânceres classificados em conjunto com base na morfologia, imunofenótipo, alterações genéticas e comportamento clínico. A distinção de DLBCL em categorias de células de origem (COO), com base em padrões de expressão gênica reminiscentes (células B do centro germinativo - o grupo GC e células B ativadas - o grupo ABC -), conforme definido e caracterizado pelo linfoma & Leukemia Molecular Profiling Project (LLMPP), tem profundas implicações biológicas, prognósticas e terapêuticas potenciais e, além disso, o efeito prognóstico negativo do oncogene de mielocitomatose (MYC), linfoma de células B 2 (BCL2) e linfoma de células B-6 (BCL6 ) as alterações no DLBCL mostraram-se amplamente dependentes dos subtipos de COO. Além disso, a combinação de alterações BCL2, MYC e BCL6 com IPI (Índice Prognóstico Internacional) identifica grupos prognósticos marcadamente piores dentro de subtipos individuais de COO. Os métodos originais usados ​​para definir essas entidades realizavam perfis de expressão gênica (GEP) usando microarrays em RNA derivado de tecido congelado (FT). Posteriormente, em uma tentativa de determinar COO na prática padrão usando tecido embebido em parafina fixado em formalina (FFPE) comumente disponível, métodos imuno-histoquímicos binários (IHC) menos precisos, mas relativamente baratos, foram usados. No entanto, em particular em não GC, a taxa de concordância foi insatisfatória. Em vez disso, foi demonstrado um alto grau de concordância na determinação do COO, com uma assinatura de 20 genes de espécimes de tumor fixados em formalina e embebidos em parafina (FFPE), com o kit Lymph2Cx (nCounter® Technology, NanoString Technologies), tornando-se o padrão ouro sugerido no World Classificação da Organização de Saúde (OMS). No entanto, recentemente, foi demonstrado que o status COO e BCL2, MYC, BCL6 não são suficientes para descrever o risco molecular desses pacientes, sugerindo uma subestrutura genética ainda a ser descoberta. Além disso, o microambiente do tumor e, em particular, a proporção de efetores imunes e moléculas de checkpoint também têm um papel prognóstico no DLBCL. Além disso, a frequência elevada de miofibroblastos, células dendríticas e cluster de diferenciação 4 (CD4) células T positivas correlacionadas com melhores resultados.

Em conclusão, uma análise genômica abrangente desses pacientes e uma caracterização profunda do compartimento imune e checkpoints imunológicos (Nanostring, imuno-histoquímica para BCL2, MYC, BCL6, análise de mutações, análise proteômica etc.) um índice misto, molecular e clínico (MMCI) para identificar grupos de prognóstico extremamente ruim, dentro de cada subtipo de COO, para considerar tratamentos adaptados ao risco no futuro.

Trata-se de um estudo observacional prospectivo com duração total de 36 meses. O objetivo primário é a identificação de novos biomarcadores prognósticos para pacientes DLBCL em termos de sobrevida livre de progressão (PFS) e capazes de agregar capacidade preditiva a reconhecidos fatores clínicos importantes.

Os objetivos secundários são:

• identificar novos biomarcadores associados à sobrevida global (OS) e à taxa de resposta objetiva (ORR);
• caracterizar o tecido e o microambiente imunológico circulante de pacientes DLBCL por transcriptômica de célula única e em massa;
• avaliar a correlação entre a expressão de genes de checkpoint imunológico e a assinatura de mRNA;
• descrever o estado mutacional de um painel de genes relevantes para a patogênese DLBCL;.
• avaliar a correlação entre a expressão da proteína, o estado mutacional e a assinatura do mRNA.

Para cada paciente inscrito, serão realizadas determinações imuno-histoquímicas por cada Unidade de Patologia: COO (GC o tipo ABC de acordo com o algoritmo de Hans), avaliação de CD20, CD5, CD10, Bcl6, Bcl2 (cut off>50%), MUM1/IRF4, c-myc (cut off>40%) e Ki67, FISH para c-myc e se rearranjado, para Bcl2 e Bcl6). Além disso, espécimes tumorais embebidos em parafina (FFPE) serão coletados para extração de RNA e análise de expressão de mRNA e centralizados no IRST-IRCCS.