Surveillance et évaluation de la réponse précoce à l'aide de l'ADN du VPH - Une étude sur des patients atteints d'un cancer de la gorge positif au VPH (MER-HPV) (MER-HPV)

Arrière plan:

Il y a une augmentation annuelle de l'incidence du carcinome oropharyngé (OPC) d'env. 5% en Suède, principalement chez les hommes. Plus de 80 % des tumeurs sont positives au VPH (virus du papillome humain). Pour cette raison, la mesure de l'ADN du VPH tumoral circulant (ctHPVDNA) dans le plasma en tant que marqueur de la réponse au traitement et en complément de la surveillance est devenue une possibilité attrayante.

En Suède, les patients destinés à un traitement curatif de l'OPC sont généralement traités par (chimio)radiothérapie (c)RT. Une petite proportion est soumise à une intervention chirurgicale avec ou sans radiothérapie adjuvante. L'étalon-or pour l'évaluation du traitement après la (c)RT définitive est une tomographie par émission de positrons (TEP-CT) réalisée 12 semaines après la fin de la (c)RT. Le résultat du PET-CT est le plus important pour déterminer la nécessité d'une dissection du cou chez les patients présentant une maladie avec envahissement ganglionnaire au moment du diagnostic.

Selon les publications précédentes sur le sujet du ctHPVDNA, il existe les raisons suivantes d'explorer davantage la valeur du ctHPVDNA dans la pratique clinique de routine chez les patients atteints d'OPC HPV-positif :

1. Le ctHPVDNA pourrait limiter ou presque distinguer le problème avec les résultats du PET-CT évalués comme une réponse équivoque à l'évaluation du traitement. Une combinaison du résultat PET-CT et de l'analyse ctHPVDNA semble augmenter la précision.
2. Le ctHPVDNA a un grand potentiel pour détecter les récidives avant que les symptômes subjectifs n'apparaissent et avant qu'ils ne deviennent apparents à l'examen clinique. La détection précoce des métastases à distance dans ce groupe de patients pourrait être utile, car ils ont le potentiel de prolonger la survie globale après un traitement de sauvetage par rapport aux patients HPV négatifs. Et la détection d'une petite charge tumorale pourrait encore améliorer la survie.
3. Une détection précise des récidives avec ctHPVDNA dans le plasma pourrait conduire à une discussion sur la réduction des rendez-vous de suivi programmés et le suivi des patients avec des échantillons de plasma à la place.

Tous les patients avec une OPC prouvée par biopsie référés au service d'oto-rhino-laryngologie-chirurgie cervico-faciale (ORL-HNS) de l'hôpital universitaire de Skåne et prévus pour un traitement définitif tel que décidé par le comité multidisciplinaire des tumeurs (MDT) seront invités à participer. Seuls les patients porteurs d'une tumeur HPV-positive sont éligibles à l'inclusion.

Taille de l'échantillon calculée pour le critère d'évaluation principal :

Une sensibilité de 65 % pour le ctHPVDNA détectable à un mois a été considérée comme ayant une valeur clinique pour prédire une tumeur résiduelle ou récurrente dans les deux ans suivant la fin du traitement. On a estimé que 15 % des patients n'atteignaient pas la rémission complète après la (c)RT primaire ou souffraient de récidive au cours d'une période de suivi de deux ans. Ainsi, une sensibilité d'au moins 65 % nécessite une taille d'échantillon de 150 patients avec une puissance de 80 %. Clopper-Pearson a été utilisé pour calculer l'IC binomial de 95 %.

On s'attend à ce que 2/3 des patients soient des hommes, selon l'épidémiologie de l'OPC en Suède.

Procédure et échantillons de ctHPVDNA pendant le traitement :

Les patients recevront des informations orales et écrites sur l'étude lors de leur première visite au Département d'oncologie/Dept. de l'ORL.

Le consentement éclairé sera recueilli au service d'oncologie. Les patients seront suivis pendant cinq ans. L'étude sera clôturée lorsque le dernier patient inclus aura été suivi pendant trois ans après le traitement.

Des échantillons de plasma pour l'analyse de l'ADNctHPV seront prélevés avant le début de la (c)RT ou avant la chirurgie.

Des prélèvements hebdomadaires, soit sept, sont prévus au cours de la radiothérapie (RT).

Chez les patients traités chirurgicalement, deux échantillons seront prélevés. Le premier au 1er jour postopératoire et le second au 3e jour postopératoire. Si le patient se voit recommander une (c)RT adjuvante, des échantillons hebdomadaires seront prélevés comme décrit ci-dessus.

Évaluation du traitement :

Pour l'évaluation et la surveillance du traitement, le plasma ctHPVDNA sera analysé un mois après la fin du traitement, puis tous les trois mois pendant les deux premières années et tous les six mois deux à cinq ans après le traitement, c'est-à-dire en même temps que les rendez-vous de suivi prévus selon aux directives nationales.

Pour l'évaluation du traitement à trois mois après la (C)RT, les niveaux de ctHPVDNA seront pris en considération en tant qu'informations complémentaires à la TEP CT pour l'évaluation de la réponse au traitement. Si le PET-CT est évalué comme NI-RADS 1-2 mais que le taux de ctHPVDNA est en augmentation par rapport au taux de fin de traitement, un nouveau test sera réalisé deux semaines plus tard pour décider si un bilan complémentaire est recommandé. Les patients avec une réponse TEP CT complète (c'est-à-dire NI-RADS 1-2) et des niveaux non détectables d'ADNctHPV passeront directement au régime de suivi. Des examens supplémentaires, par exemple, le moment de répéter l'imagerie ou d'autres examens supplémentaires seront à la discrétion du MDT.

Pour l'évaluation du traitement trois mois après la chirurgie primaire, l'augmentation des niveaux d'ADNctHPV entraînera un test de confirmation deux semaines plus tard pour décider si un bilan est indiqué. Si le patient a des niveaux décroissants de ctHPVDNA, le participant passera au régime de suivi.

Au cours du suivi (c'est-à-dire à partir de six mois), un test ctHPVDNA positif sera confirmé par un nouveau test deux semaines plus tard. Si une confirmation des niveaux détectables de ctHPVDNA est obtenue, un bilan de récidive sera initié, y compris PET CT et d'autres examens à la discrétion du MDT et programmés en conséquence.

Données de base et de suivi :

Les données de base comprennent l'âge, le sexe, le statut tabagique, tout cancer antérieur de la tête et du cou (HNC), la date du diagnostic, le sous-site de la tumeur primaire, la classification/stade TNM, le statut p16, le sous-type HPV dans la tumeur primaire, les niveaux d'ADNctHPV avant le traitement.

Les données de suivi comprennent le traitement reçu, la réponse clinique trois mois après le traitement, l'état clinique lors des examens cliniques programmés ainsi que des examens supplémentaires pour suspicion clinique de récidive, la réponse TEP-TDM à 12 semaines après le traitement selon NI-RADS, les résultats de toute imagerie supplémentaire liée au HNC, au plasma ctHPVDNA i, aux raisons de l'interruption du traitement et/ou à la fin des examens programmés, à toute récidive, à la date du décès, à la cause du décès, vivant avec ou sans maladie à cinq ans de suivi ou à la fin de l'étude .

Récurrence:

Si le patient est diagnostiqué avec une tumeur résiduelle ou une récidive prévue à des fins curatives, le schéma d'échantillonnage de plasma pour le ctHPVDNA sera recommencé. Si un traitement palliatif est commencé après une récidive, aucun autre échantillon de plasma ne sera prélevé. Une récidive est diagnostiquée lorsqu'une cytologie ou une biopsie positive confirme le cancer ou si la progression de la maladie est vérifiée à l'imagerie. La date à laquelle la cytologie ou la biopsie a été effectuée servira de date de récidive. La première suspicion de récidive radiologiquement définie servira de date de récidive si le patient est jugé inapte à être confirmé par cytologie ou biopsie.

Méthode d'analyse HPV-ADN :

L'identification et la quantification du type d'ADN-VPH à partir de la tumeur primaire et la quantification de l'ADN-ctHPV dans le plasma, de chaque patient, sont réalisées avec Luminex et ddPCR, respectivement. Luminex est réalisée au Département de microbiologie et la réaction en chaîne par polymérase en gouttelettes numériques (ddPCR) au Center for Molecular Diagnostics (CMD), Lund.

Tumeur primaire :

L'échantillon de tumeur, dans du formol, est envoyé au Dept. of Microbiology, Lund. Ensuite, des coupes de tissu tumoral fixé au formol et inclus en paraffine (FFPE) sont livrées au département de microbiologie. L'ADN du tissu fixé au formol et inclus en paraffine (FFPE) sera extrait selon les méthodes standard établies au Département de microbiologie. Le type de VPH sera déterminé par PCR suivi d'un génotypage basé sur Luminex. Si la tumeur est positive au VPH, la charge virale quantitative (nombre de copies de VPH par cellule humaine) sera déterminée par ddPCR contenant des amorces et des sondes spécifiques du type de VPH mis en évidence dans la tumeur.

Plasma:

Un échantillon de sang de 8,5 ml est prélevé dans un tube Vacutainer (tube BD ACD-A) et envoyé au Département de microbiologie, Lund. Le plasma est séparé par centrifugation à 1700 xRPM au Département de microbiologie. Ensuite, le ctDNA est automatiquement extrait du plasma par un robot QIAsymphony à l'aide du kit DSP Circulating DNA (Qiagen) (3 ml d'entrée et 60 uL de sortie). Une ddPCR spécifique au type de HPV, avec des amorces et des sondes spécifiques au type de HPV démontré dans la tumeur, sera réalisée pour déterminer la charge virale (nombre de copies de HPV par ml de plasma).

Surveillance des données :

L'étude est en partie exploratoire et en partie réalisée comme une évaluation du ctHPVDNA comme moyen de surveiller l'état de la maladie. Aucun effet indésirable n'est attendu. Il n'y a pas de comité de surveillance ni de consignes d'arrêt. Une analyse intermédiaire sera réalisée après l'inclusion de 50 patients pour sécuriser le rythme d'inclusion et évaluer les problèmes inattendus. Une validation interne sera effectuée.