L'impact des bactéries probiotiques sélectionnées sur le microbiote intestinal, les indicateurs de stress et l'état nutritionnel des jeunes adultes (PROBASTRESS)

Introduction Le nombre de personnes qui reçoivent des services psychiatriques ont augmenté au cours des dernières années. En Pologne, le nombre de personnes souffrant de troubles mentaux dans les soins ambulatoires a augmenté de 150 000 ces dernières années, atteignant un total de plus de 1,2 million de patients. Le nombre de personnes nécessitant des soins psychologiques et psychiatriques devrait croître au cours des prochaines décennies. La psychopharmacothérapie utilisée ne produit pas toujours les résultats attendus du traitement. En conséquence, de plus en plus d'attention est accordée aux interactions non pharmacologiques. Ces dernières années, il y a eu un ensemble croissant de recherches sur la relation entre la nutrition et son impact sur l'état mental des personnes souffrant de troubles mentaux. Les sciences alimentaires et nutritionnelles, les psychodietics et la nutripsychiatrie, les domaines scientifiques prospères, gagnent en importance. Les résultats de la recherche indiquent que les ressources de nutrition et de stress qui font le stress affectent la santé d'un individu. Le rôle des bactéries probiotiques Lactobacillus helveticus et Bifidobacterium longum dans le cadre du microbiome humain a également été étudiée dans cette sphère, et les résultats d'un nombre croissant d'articles confirment leur large gamme d'applications et des effets positifs sur divers domaines de la santé. Des études antérieures ont montré que la supplémentation avec Bifidobacterium longum ou un composite d'entre elles avec d'autres souches bactériennes affectées positivement, entre autres, la santé osseuse des femmes ménopausées, atténué l'inconfort gastro-intestinal, réduit le stress perçu et amélioration de la dépression, de l'anxiété et des indicateurs d'humeur des adultes de divers âges. D'un autre côté, la supplémentation avec un composite de plusieurs souches bactériennes, dont Lactobacillus helveticus et Bifidobacterium longum, a affecté la réduction de la masse des graisses chez les individus obèses et en surpoids. La supplémentation probiotique semble avoir un grand potentiel pour améliorer la santé et la qualité de vie, y compris la prévention et le traitement des troubles dépressifs et anxieux et la capacité de faire face au stress. Néanmoins, il y a encore un manque de recherche dans ce domaine, en particulier concernant Lactobacillus helveticus seul et la combinaison des souches de Lactobacillus helveticus et Bifidobacterium longum.

Dans cet esprit, un projet de recherche a été prévu pour étudier les effets des suppléments probiotiques et la qualité alimentaire sur un large éventail de résultats psychologiques, microbiologiques, biochimiques et cliniques. L'étude visait à évaluer les effets de la supplémentation ciblée par une nouvelle composition de souches probiotiques Lactobacillus helveticus et Bifidobacterium longum sur la composition et la qualité du microbiote intestinal, les marqueurs neuroendocriniens liés au stress, la santé mentale, l'intensité du stress perçue, la réponse psychosomatique et les stratégies de co-alimentation ainsi que la composition corporelle et la dente osseuse dans les jeunes femmes dans la qualité du régime alimentaire. We hypothesised that supplementation with probiotic bacteria at a daily dose of 3 x 109 CFU, irrespective of diet quality, would result in changes in the gut microbiota towards higher proportions of beneficial bacteria, reduce stress-related neuroendocrine markers and the intensity of perceived stress and its psychosomatic symptoms, and improve stress-coping strategies, mental health potential and have a beneficial effect on body composition components et la densité osseuse chez les jeunes femmes en bonne santé, par rapport au placebo.

Conception et population de l'étude Cet essai d'intervention en double aveugle randomisé, contrôlé par placebo, à 2 bras, parallèle et en double aveugle a été mené en quelques vagues de septembre 2023 à mars 2024 2023 au Département de la nutrition humaine et de la diététique (Univrsity des sciences de la vie). Chaque vague a commencé pendant les mois d'automne et a été achevée pendant les mois d'hiver. La taille de l'échantillon a été calculée à l'aide du logiciel GPower (version 3.1.9.7, Universität Düsseldorf, Allemagne). En bref, pour détecter un changement significatif du niveau de stress perçu avec un test t bilatéral, un niveau de signification de 5% et une puissance statistique de 80%, une taille d'échantillon de 110 a été déterminée, compte tenu d'un taux d'abandon de 30%. Initialement, 120 femmes étaient inscrites à cette étude. Ce ne sont que des femmes au début de l'âge adulte. Les critères d'éligibilité pour l'étude comprenaient le sexe féminin, l'âge de 20 à 30 ans, l'IMC <30 kg / m2. Les critères d'exclusion étaient: diagnostiqué des troubles de la santé chroniques et / ou graves (par ex. Diabète, asthme, hypertension, maladies rénales), grossesse, en prenant des probiotiques pendant 8 semaines avant l'inscription au protocole d'étude, un traitement antibiotique récent et actuel, l'utilisation du minerai de traitement antidépresseur pharmaceutique. Tous les participants étaient des bénévoles en bonne santé qui ont été pleinement informés des objectifs de l'étude et ont donné un consentement éclairé à la participation avant de participer à l'étude. Le protocole d'étude a été examiné et approuvé par le comité de bioéthique de l'Université des sciences médicales de Karol Marcinkowski à Poznan, Pologne (permission no. 244/23, publié le 9 mars 2023). L'étude est conforme à l'énoncé de consort sur des essais randomisés. Toutes les procédures ont suivi les directives de la Déclaration de 2013 d'Helsinki et de bonnes pratiques cliniques.

Les volontaires inscrits étaient également attribués, et aveuglément au groupe d'intervention (LH + BL), de recevoir des bactéries probiotiques ou du groupe placebo (PLA) pendant 12 semaines de supplémentation. La randomisation a été réalisée par le fabricant de suppléments avec des codes générés par ordinateur à l'aide de Research Randomizer (www.randomizer.org). L'ensemble du protocole de l'étude comprenait la familiarisation et deux visites en laboratoire au Département de nutrition humaine et de diététique au départ et à la fin de l'étude (T1, T2; avant / après la supplémentation en LH + BL [LH + BL PRE et LH + BL Post] et complémentation PLA [plapre et plapost]). Le protocole principal de l'étude comprenait une évaluation des habitudes alimentaires lors de la visite de l'étude T1. Des mesures du poids, de la taille, de la composition corporelle, de la densité osseuse, de la réponse au stress et des stratégies de copie du stress, de l'évaluation de la santé mentale ainsi que de l'échantillonnage de la salive et des selles ont été effectuées lors de chacune des visites d'étude T1 et T2. Les principales mesures des résultats sont la composition du microbiote, l'intensité du stress perçue et les marqueurs neuroendocriniens liés au stress (cortisol salivaire, DHEA salivaire et cortisol salivaire: rapport DHEA, cortisol fécal); Les mesures des résultats secondaires sont les stratégies de stress, les symptômes psychosomatiques, le sentiment de cohérence, la composition corporelle et la densité osseuse). Tous les tests ont été effectués le matin en même temps pour le participant. Les participants ont déclaré qu'ils n'avaient introduit aucun changement dans leurs modes de vie, leur nutrition ou leur supplémentation pendant le protocole d'étude et ont été préparés pour chaque visite de la même manière. De plus, le contact téléphonique a été maintenu en cas de non-conformité avec le protocole ou les symptômes gastro-intestinaux ou les événements indésirables.

Il y avait 20 décrocheurs du protocole d'étude. Les principales raisons de l'abandon ont été l'antibiothérapie pendant le protocole (n = 10) et l'arrêt de l'étude sans raison avant la deuxième visite (n = 10). Il y avait 11 décrocheurs dans le LH + BL et 9 dans les groupes PLA. Enfin, 100 femmes (23,5 ± 2,7 ans; 61,6 ± 9,4 kg de masse corporelle; 1,67 ± 0,06 m de hauteur) ont terminé l'ensemble du protocole d'étude et ont été inclus dans les analyses.

Supplémentation Dans la procédure expérimentale, chaque participant a été complété par une dose chronique de 1 capsule par jour de LH + Bl ou PLA dans une séquence parallèle randomisée. Les participants ont reçu des paquets de cloques de capsules LH + BL contenant 3 x 109 CFU de souches probiotiques combinées lyophilisées des bactéries probiotiques bifidobacterium longum Rosell®-175 et Lactobacillus helveticus Rosell®-52 (nom commercial: SANPROBI®STRESS) ou PLAPSULES PRESULES contenant un produit Isoenergée pour l'essai. Les capsules PLA ne contenaient que l'amidon de pommes de terre et le stéarate de magnésium sous forme de charges. La coquille de capsule était composée d'hydroxypropylméthylcellulose et le poids d'une seule capsule était de 420 mg. Les probiotiques étaient dans des capsules identiques comme PLA et ne pouvaient pas être distinguées par l'apparence et le goût. Les capsules LH + BL et PLA ont été obtenues auprès de Sanprobi SP. Z O.O. Sp. K., (Szczecin, Pologne). La combinaison et la concentration de probiotiques utilisées dans cette étude étaient basées sur les recommandations du fabricant. Les préparatifs ont été administrés à chaque participant dans des enveloppes marquées d'un code unique. Selon la procédure aveuglante recommandée, les formulations ont été préparées à l'avance par le laboratoire du fabricant, qui n'était pas directement impliqué dans l'étude. Quant à la double aveugle, ni les chercheurs ni les participants ne savaient si LH + BL ou PLA était administré. Les détails de la randomisation ont été anonymisés et divulgués après l'arrêt du protocole.

Régime et style de vie

Les données alimentaires ont été collectées à l'aide du questionnaire de fréquence alimentaire Kompan® validé publié sur la plate-forme de partage de fichiers Google Drive. Le questionnaire comprenait des aliments couramment consommés par la population polonaise, regroupés en 25 catégories d'aliments. Les participants ont été invités à sélectionner la fréquence à laquelle ils ont consommé chaque type de nourriture au cours des 12 derniers mois. Les réponses de fréquence disponibles ont été converties dans les fréquences quotidiennes et consistaient en jamais (0 fois / jour), 1 à 3 fois par mois (0,06 fois / jour), une fois par semaine (0,14 fois / jour), quelques fois par semaine (0,5 fois / jour), une fois par jour (1,0 fois / jour), ou quelques fois par jour (2,0 fois / jour). La qualité de l'alimentation a été décrite par deux scores de qualité de l'alimentation: l'indice de régime pro-santé (PhDI) et l'indice de régime malsain (NHDI). Les deux scores de qualité de l'alimentation ont été calculés comme la somme des fréquences quotidiennes (en temps / jour) de la consommation de produits alimentaires. Le PhDI comprenait 10 articles représentant des aliments potentiellement pro-santé (pain à grains entiers, céréales à grains entiers, lait, boissons laitières fermentées, fromage cottage, viande blanche, poisson, légumineuses, fruits et légumes) avec un score total allant de 0 à 20 fois / jour. Le NHDI comprenait 14 aliments représentant des aliments potentiellement malsains (pain blanc, céréales raffinées, restauration rapide, aliments frits, beurre, saindoux, fromage, coupes à froid, viande rouge, bonbons, viandes en conserve, boissons sucrées, boissons énergisantes, alcool) avec un score total de 0 à 28 fois / jour. Les deux scores de qualité de l'alimentation ont été recalculés pour normaliser la plage de score totale à 0 à 100 points pour chacun. Les formules suivantes ont été utilisées:

PhDI (en points) = (100/20) × somme de la fréquence de consommation de 10 aliments (temps / jour) NHDI (en points) = (100/28) × somme de la fréquence de consommation de 14 aliments (temps / jour), les comportements de style de vie, le tabagisme, etc.

Évaluation de la masse corporelle et de la composition corporelle Les mesures anthropométriques ont été prises au début de chaque visite d'étude pour assurer des conditions égales pour les procédures de test. Avant l'analyse de la composition corporelle, le poids et la hauteur ont été mesurés à 0,1 cm et 0,1 kg les plus proches, pour la taille et le poids, respectivement, en utilisant une échelle calibrée avec un stadiomètre (WB3007311, Tanita Corporation, Japon) et l'indice de masse corporelle (IMC) a été calculé. L'analyse de la composition corporelle (FM et FFM) a été réalisée à la fois par absorptiométrie aux rayons X à double énergie (Ge Lunar Prodigy Device - General Electrics Healthcare Medical Systems, Europe, Belgium) et la pléthysmographie de déplacement à l'aide de bod pod (Life Measurement Inc., Concord, CA, USA). Toutes les mesures ont été effectuées le matin (7h30 à 10h00) et pendant le jeûne (la consommation d'eau a été recommandée), la température ambiante maintenue à 20-22 ° C. Tous les participants ont évité l'exercice intense pendant au moins 24 heures avant chaque visite.

Mesures de densité minérale osseuse Tous les participants à l'étude ont subi une absorptiométrie à rayons X à double énergie (DXA) par le même technicien en utilisant un densitomètre prodige Ge Lunar (General Electrics Healthcare Medical Systems, Europe, Belgique). La dose effective (μsv) pour ce densitomètre est de 0,05. Les paramètres obtenus à partir de la mesure comprenaient la teneur en minéraux osseux (BMC, G) et la densité minérale osseuse (BMD, G / CM2). Les scores Z de BMD ont été générés à l'aide de l'ECO du logiciel de base de données DXA Sex, Race et Specific et selon l'âge. Les normes de la Société internationale de densitométrie clinique (ISCD) recommandent l'utilisation de z-scores pour évaluer la DMO chez les femmes préménopausées. La densité minérale osseuse (DMO) a été comparée aux jeunes femmes en bonne santé à chaque mesure (colonne vertébrale lombaire, hanche totale, col fémoral, rayon) et un score T a été calculé. Selon la définition de l'Organisation mondiale de la santé, l'ostéoporose est indiquée par un score T inférieur à -2,5 ET et l'ostéopénie par un score T entre -1 et -2,5 SD. Les paramètres osseux ont été mesurés en fonction de la méthodologie de densitométrie adoptée et de la Société internationale pour les recommandations de densitométrie clinique. Un programme de contrôle de la qualité standard a été utilisé, qui comprenait la vérification de l'équipement DXA pour vérifier la stabilité du système et une revue visuelle de toutes les images par un examinateur expérimenté. Le scanner a été calibré quotidiennement comme le fabricant DXA GE Lunar Prodigy le recommandait. Un bloc d'étalonnage standard a été utilisé. L'étude a été réalisée par une équipe avec les certifications nécessaires pour effectuer la densitométrie et l'expérience périphériques et axiales en densitométrie.

La collecte de salive et l'analyse des échantillons de marqueurs neuroendocriniens liés au stress, à savoir le cortisol salivaire et la DHEA, seront mesurés, ainsi que le rapport cortisol: DHEA. Avant la collecte de salive en laboratoire, les participants ont été invités à s'abstenir de consommer de la caféine et / ou de la nicotine pendant au moins 4 heures et de l'alcool pendant au moins 24 heures. Des échantillons de salive non stimulés ont été prélevés auprès des participants à jeun dans des tubes en plastique Eppendorf jetables en utilisant la méthode de crachat pendant 10 minutes pendant que les sujets reposaient. Les participants ont d'abord été invités à se rincer la bouche avec de l'eau pendant environ 30 secondes et 10 minutes avant de fournir un échantillon de salive. La salive a été collectée entre 9h00 et 11h00 pour minimiser les différences circadiennes. Des échantillons du matériau (2 tubes par personne), immédiatement après la collecte, ont été placés dans un congélateur à -80 ° C et stockés jusqu'à l'expédition en laboratoire (Sanprobi Research and Development Center in Szczecin). Avant l'analyse, les échantillons seront réchauffés et centrifugés à 1000 x g pendant 20 minutes pour éliminer le matériau particulaire. Le cortisol et la DHEA dans la salive humaine seront mesurés avec des kits disponibles dans le commerce en utilisant une méthode immunoenzymatique selon les instructions du fabricant. Tous les échantillons seront traités en double pendant le même test. Des analyses statistiques seront effectuées en utilisant la moyenne des deux mesures répétées. Les valeurs brutes seront transformées en logarithme et des observations supérieures à trois SD de la moyenne pour chaque temps d'échantillonnage seront exclues.

La collecte des échantillons fécaux et l'analyse du microbiote et de l'analyse du cortisol ont été effectués comme suit: les excréments ont été collectés à la maison le jour de l'arrivée au laboratoire ou la veille, refroidis immédiatement après la défécation au réfrigérateur du sujet du test et transféré au laboratoire. Les échantillons ont été stockés à -80 ◦C jusqu'à l'analyse. L'analyse du microbiote intestinal sera effectuée dans le laboratoire de Centre de recherche et de développement de Sanprobi à Szczecin en utilisant la technologie de séquençage de nouvelle génération Illumina. L'extraction d'ADN de l'échantillon fécal sera effectuée à l'aide de kits d'isolement disponibles dans le commerce, suivis d'une évaluation de la qualité (intégrité) de l'isolat. L'étape suivante est l'amplification de l'ADN par PCR en utilisant des amorces spécifiques complémentaires de séquences de gènes conservées de chaque côté de la région cible. Les fragments hypervariables V2 et V3 de la région, composés d'environ 400 à 500 paires de bases du gène RRN procaryotes 16S, sont dupliqués. Les amplicons de chaque échantillon sont codés à barres avec une courte séquence de "code-barres" unique à chaque échantillon. Enfin, le séquençage "multiplexé" à haut débit de tous les échantillons est effectué dans une seule exécution de séquençage.

Les échantillons fécaux pour l'analyse du cortisol seront réchauffés et dilués avec de l'eau, et la procédure ultérieure est la même que pour les échantillons de salive préparés pour l'analyse du cortisol, comme décrit ci-dessus.

Dimensions de la personnalité L'échelle de l'inventaire de la personnalité à dix éléments (TIPI) est un questionnaire auto-administré à 10 éléments validé conçu pour évaluer les facteurs psychosociaux. Le tipi a été conçu par Gosling et al. En tant qu'instrument bref pour mesurer les cinq grandes dimensions de la personnalité avec deux éléments pour chaque trait (un élément standard et un élément de scored inversé dans chaque trait). Ces dimensions de la personnalité comprennent l'extraversion (être sociale, enthousiaste), l'agréabilité (fiabilité, être empathique), la conscience (auto-discipline, la fiabilité, l'auto-efficacité), la stabilité émotionnelle (la dimension opposée à la névrosisme; être équilibré, calme, capabilité de la stable restante), et l'ouverture (curiosité et créativité, étant l'esprit ouvert). Les réponses dans l'échelle de personnalité ont été mesurées sur une échelle de Likert à sept points et notées comme 1 = fortement en désaccord, 2 = en désaccord modérément, 3 = en désaccord un peu, 4 = n'est ni d'accord ni en désaccord, 5 = d'accord un peu, 6 = d'accord modérément, 7 = d'accord fortement. Les réponses aux éléments à scoreries inversées ont été recodées pour être cohérentes avec les éléments standard. Ensuite, la moyenne de l'élément standard et l'élément recodé à balayage inversé ont été calculés pour compenser le score d'échelle de chaque dimension, qui variait de 1 à 7. Les scores d'échelle plus élevés reflètent un niveau plus élevé de chaque trait.

Chaque score de l'échelle de Tipi a été classé par l'approche conceptuelle, qui divisait l'échelle en fonction de la question de savoir si les scores étaient égaux à être "d'accord" ou plus (en moyenne) pour créer deux catégories: les Tipi inférieurs (<5 en désaccord) et les catégories Tipi plus élevées (5-7 en accord). Tout score d'échelle de dimension qui a produit des scores d'accord et plus élevés a indiqué un niveau plus élevé de ce trait et a été considéré comme une catégorie Tipi plus élevée. La fiabilité interne de ce questionnaire avec une valeur alpha de Cronbach était de 0,59. Le questionnaire Tipi n'a été administré qu'une seule fois lors de la visite initiale du T1.

Évaluation perçue du stress et de la santé mentale, nous avons collecté 5 échelles d'auto-évaluation (sous) liées à de larges domaines de stress perçu et de santé physique / mentale: échelle de stress perçue (PSS-10), brèves orientations d'adaptation aux problèmes de l'inventaire expérimenté (Bref-Cope), Sense of Coherence 13-Item Scale (SOC-13), Questionnelle générale GHQ-28 et Inventaire de la personnalité de dix élément (TIPLI). Tous les tests (dans une version polonaise standardisée) étaient basés sur des questionnaires d'auto-évaluation publiés sur la plate-forme de partage de fichiers Google Drive.

La forme PSS-10 a été utilisée pour évaluer l'intensité du stress liée à ses propres expériences de vie au cours du dernier mois et était une version modifiée de l'échelle de stress perçue développée par Cohen. Les répondants ont rapporté une échelle de Likert à 5 points (0 = jamais, 1 = presque jamais, 2 = parfois, 3 = Très souvent, 4 = très souvent) dans quelle mesure les situations de leur vie au cours du mois dernier étaient imprévisibles, incontrôlables et écrasantes. Les scores des quatre éléments identifiés positivement (articles 4, 5, 7, 8) sont inversés. Le score maximal est de 40, avec des scores plus élevés indiquant des niveaux plus élevés de stress perçu. Selon les instructions, les scores de la plage de 0-13 indiquent un faible niveau de contrainte, les scores de la plage de 14-26 indiquent un niveau de contrainte modéré et les scores de la plage de 27-40 indiquent un niveau élevé de contrainte perçue. Dans cette étude, l'échelle avait un alpha (α) de Cronbach de 0,85. Les scores sur l'échelle ont été comparés entre les évaluations initiales et finales.

Le Brief Cope est une version raccourcie en 28 éléments du questionnaire sur les stocks Cope par Carver et al. et a été utilisé pour évaluer les stratégies d'adaptation situationnelles (façons dont les gens font face à un événement stressant spécifique) et aux stratégies d'adaptation dispositionnelles (les gens habituels font face au stress dans la vie quotidienne). Dans sa version originale, cet inventaire a révélé des niveaux adéquats de cohérence interne, en plus de montrer la preuve de la validité de sa structure factorielle. Nous avons utilisé le mini-cope, la version polonaise raccourcie du questionnaire sur les stocks Cope. L'échelle mesure 14 stratégies d'adaptation théoriques ou empiriquement fondées (sous-échelles d'adaptation, chacune avec deux éléments): auto-distraction, coach actif, reframation de substance, humour émotionnel, soutien instrumental, religion comportementale et auto-noir. Pour chaque élément, les répondants indiquent s'ils utilisent la réponse d'adaptation sur une échelle de Likert à quatre points (0 = je ne le fais généralement pas du tout du tout; 1 = je le fais généralement rarement; 2 = je le fais généralement souvent; 3 = je le fais généralement presque toujours).

Ces sous-échelles ont été avancées en place en modèle de facteur de second ordre, qui consistait en des "stratégies d'adaptation adaptatives" (utilisation du soutien émotionnel, recadrage positif, acceptation, religion, humour, adaptation active, planification et utilisation du soutien instrumental) et "les stratégies de copulation inadaptée" (ventilation, déni, utilisation des substances, désengagement comportemental, auto-distraction et auto-professeur). L'alpha de Cronbach pour les sous-échelles d'origine variait de 0,66 à 0,70. Le score global de chaque stratégie d'adaptation est la somme des scores de deux éléments.

L'échelle de cohérence du sens de la cohérence SOC-13 est une échelle de 13 éléments adaptée d'une échelle plus longue de 29 éléments développée par Antonovsky. Cette échelle est un questionnaire d'auto-évaluation et se compose de trois sous-échelles: la signification (quatre éléments), la compréhensibilité (cinq éléments) et la gestion (quatre éléments). Chaque élément contient des réponses qui changent entre les questions et sont évaluées de 1 à 7 sur une échelle de Likert. Cinq variables (éléments 1, 2, 3, 7 et 10) sont formulées négativement et sont donc codées inversées lorsque les éléments sont additionnés pour obtenir un total d'élément. Le SOC a été calculé comme la moyenne pour chaque individu qui avait répondu à au moins 10 des 13 éléments (plage, 1,0-7,0) Un score plus élevé représente un plus grand sentiment de cohérence. Les études des propriétés psychométriques de l'échelle SOC-13 ont montré des niveaux élevés de validité et de fiabilité, et la cohérence interne est très bonne, avec des alphas de Cronbach allant de 0,70 à 0,92 dans les 127 études utilisant le SOC-13. Dans la présente étude, les estimations de fiabilité de cette échelle vont de α = 0,77-0,79.

Le questionnaire GHQ-28 General Health a été développé par Goldberg en 1978. C'est une mesure de la détresse émotionnelle au cours des dernières semaines qui contient 28 éléments et pourrait être utilisée comme outil de dépistage de la communauté et pour la détection de troubles psychiatriques non spécifiques chez les individus en milieu de soins primaires. Les participants ont été interrogés sur les symptômes et / ou l'inconfort qu'ils avaient récemment vécu. Chaque élément est évalué sur une échelle de Likert à 4 points pour indiquer la gravité des symptômes de 0 à 3 (0 = pas du tout, 1 = pas plus que d'habitude, 2 = un peu plus que d'habitude, 3 = beaucoup plus que d'habitude). Les scores pour les sept éléments identifiés positivement (éléments 4, 5, 7, 8) sont inversés (1 = plus que d'habitude, 2 = comme d'habitude, 3 = moins que d'habitude, 4 = beaucoup moins que d'habitude). Les éléments sont additionnés sur quatre sous-échelles: symptômes somatiques (éléments 1-7), anxiété / insomnie (éléments 8-14), dysfonction sociale (éléments 15-21) et dépression majeure (éléments 22-28). Un score GHQ-28 élevé indique un cas psychiatrique probable. Les données normatives pour la population générale évaluée indiquent un point de coupure ≥ 5. La fiabilité a été calculée en utilisant le coefficient alpha de Cronbach et était de 0,89-0,90.

Le statut socioéconomique et les événements stressants Un questionnaire supplémentaire a été formulé par les auteurs, y compris le statut socioéconomique (SSE) (âge, lieu de résidence, statut familial, niveau d'éducation) et questions sur tout événement stressant (SSE) vécu au cours du mois précédent.

Analyse statistique Les variables continues sont présentées sous forme de déviation moyenne et standard et de variables par rapport à la mise à l'échelle en tant que médianes et gammes interquartiles (25% à 75%). Les variables catégorielles sont présentées sous forme de fréquences. Les différences entre les variables catégorielles sont analysées par le test exact de Fisher. Toutes les variables continues sont testées pour une distribution normale en utilisant le test Shapiro-Wilk, ainsi que la kurtosis, l'asymétrie et une évaluation graphique de la distribution de chaque données variables. Les procédures de transformation des données (par exemple, la transformation de la boîte-cox) sont prises en compte si elles se traduisent par une distribution normale de toutes les variables transformées. Les comparaisons entre les points temporels de base et post-suppléments (visites T1 et T2) dans les groupes LH + BL ou PLA sont déterminées en utilisant le test t pour les variables dépendantes et la taille de l'effet exprimée en d de Cohen. Les comparaisons entre les groupes dans les changements pré-post au sein des variables sont déterminées en utilisant le test t pour les variables indépendantes. Si la normalité est violée, les données sont analysées à l'aide du test de classement signé Wilcoxon avec la taille de l'effet exprimée comme le coefficient de corrélation de rang (RC). Le test de Mann-Whitney U est utilisé pour comparer les variables pour tester les différences entre les groupes placebo et prébiotiques. Un alpha <0,05 est considéré comme statistiquement significatif. Les données sont analysées à l'aide du logiciel Statistica 13.3 (StatSoft Inc., USA).