Virkningen af ​​udvalgte probiotiske bakterier på tarmmikrobiota, stressindikatorer og ernæringsstatus for unge voksne (PROBASTRESS)

Introduktion Antallet af mennesker, der modtager psykiatriske tjenester, er steget i de sidste par år. I Polen er antallet af mennesker med psykiske lidelser i poliklinisk pleje steget med 150.000 i de senere år og nået i alt mere end 1,2 millioner patienter. Antallet af mennesker, der kræver psykologisk og psykiatrisk pleje, forventes at vokse i de kommende årtier. Den anvendte psykofarmakoterapi producerer ikke altid de forventede behandlingsresultater. Som et resultat lægges der mere og mere opmærksomhed på ikke-farmakologiske interaktioner. I de senere år har der været et voksende forskningsorgan i forholdet mellem ernæring og dens indflydelse på den mentale tilstand hos mennesker med psykiske lidelser. Mad- og ernæringsvidenskab, psykodietetik og nutripsykiatri, blomstrende videnskabelige felter, vinder fremtrædende. Forskningsresultater indikerer, at ernærings- og stress-kopende ressourcer påvirker den enkeltes helbred. Rollen af ​​de probiotiske bakterier Lactobacillus Helveticus og Bifidobacterium longum som en del af det humane mikrobiom er også blevet undersøgt på denne sfære, og resultatet af et voksende antal papirer bekræfter deres brede vifte af anvendelser og positive effekter på forskellige sundhedsdomæner. Tidligere undersøgelser har vist, at tilskud med Bifidobacterium longum eller en sammensætning af dem med andre bakteriestammer, der blandt andet er påvirket af knoglesundheden for postmenopausale kvinder, lindrede gastrointestinal ubehag, reduceret opfattet stress og forbedret depression, angst og humørindikatorer hos voksne i forskellige aldre. På den anden side påvirkede tilskud med en sammensætning af flere bakteriestammer, herunder Lactobacillus Helveticus og Bifidobacterium longum, hvilket reducerede fedtmasse hos overvægtige og overvægtige individer. Probiotisk tilskud ser ud til at have et stort potentiale for at forbedre sundhed og livskvalitet, herunder forebyggelse og behandling af depressive og angstlidelser og evnen til at tackle stress. Ikke desto mindre er der stadig en mangel på forskning på dette område, især vedrørende Lactobacillus Helveticus alene og kombinationen af ​​Lactobacillus Helveticus og Bifidobacterium longum -stammer.

Med dette i tankerne var der planlagt et forskningsprojekt til at undersøge virkningerne af både probiotiske kosttilskud og diætkvalitet på en lang række psykologiske, mikrobiologiske, biokemiske og kliniske resultater. Undersøgelsen havde til formål at evaluere virkningerne af målrettet tilskud med en ny sammensætning af probiotiske stammer Lactobacillus Helveticus og Bifidobacterium longum på tarmmikrobiota-sammensætning og kvalitet, stressrelaterede neuroendokrine markører, mental sundhed, opfattede stressintensitet, psykosomatisk respons og mestringsstrategier såvel som kropssammensætning og knoglesensitet i unge kvinder, som er forskellige i diætkvalitet. We hypothesised that supplementation with probiotic bacteria at a daily dose of 3 x 109 CFU, irrespective of diet quality, would result in changes in the gut microbiota towards higher proportions of beneficial bacteria, reduce stress-related neuroendocrine markers and the intensity of perceived stress and its psychosomatic symptoms, and improve stress-coping strategies, mental health potential and have a beneficial effect on body composition components and bone Densitet hos raske unge kvinder sammenlignet med placebo.

Undersøgelsesdesign og befolkning Denne randomiserede, placebokontrollerede, 2-arm, parallelle, dobbeltblinde interventionsforsøg blev udført i et par bølger fra september 2023 til marts 2024 2023 ved Institut for Human ernæring og Dietetics (Poznań Univrsity of Life Sciences). Hver bølge startede i efteråret og blev afsluttet i vintermånederne. Prøvestørrelsen blev beregnet ved hjælp af GPOWER -software (version 3.1.9.7, Universität Düsseldorf, Tyskland). Kort fortalt for at detektere en signifikant ændring i det opfattede stressniveau med en tosidet t-test, et signifikansniveau på 5%og en statistisk effekt på 80%, blev en prøvestørrelse på 110 bestemt under hensyntagen til et 30%frafald. Oprindeligt blev 120 kvinder indskrevet i denne undersøgelse. Dette var kun kvinder i den tidlige voksen alder. Kriterier for støtteberettigelse for undersøgelsen omfattede kvindelig køn, 20-30 år, BMI <30 kg/m2. Ekskluderingskriterier var: diagnosticeret kroniske og/eller alvorlige sundhedsforstyrrelser (f.eks. Diabetes, astma, hypertension, nyresygdomme), graviditet, tager enhver probiotika i 8 uger før tilmelding til undersøgelsesprotokollen, nylig og nuværende antibiotikabehandling, malmbrug af farmaceutisk antidepressiv behandling. Alle deltagere var sunde frivillige, der var fuldt informeret om undersøgelsens mål og gav informeret samtykke til deltagelse, før de kom ind i undersøgelsen. Undersøgelsesprotokollen blev gennemgået og godkendt af Bioethics Committee fra Karol Marcinkowski University of Medical Sciences i Poznan, Polen (tilladelse nr. 244/23, udstedt den 9. marts 2023). Undersøgelsen er i overensstemmelse med Consort -erklæringen om randomiserede forsøg. Alle procedurer fulgte retningslinjerne for 2013 -erklæringen om Helsinki og god klinisk praksis.

De tilmeldte frivillige var jævnt, tilfældigt og tildelt blindt til enten interventionsgruppen (LH+BL), der modtog probiotiske bakterier eller placebo (PLA) -gruppen i 12 ugers tilskud. Randomisering blev udført af supplementproducenten med computergenererede koder ved hjælp af Research Randomizer (www.randomizer.org). Hele undersøgelsesprotokollen omfattede fortrolighed og to laboratoriebesøg i Institut for Human Nutrition and Dietetics ved baseline og i slutningen af ​​undersøgelsen (T1, T2; før/efter LH+BL -tilskud [LH+BL Pre og LH+BL Post] og PLA -tilskud [Plapre og PLAPOST]). Undersøgelsens vigtigste protokol omfattede en vurdering af kostvaner ved T1 -undersøgelsesbesøget. Målinger af vægt, højde, kropssammensætning, knogletæthed, stressrespons og stress-coping-strategier, vurdering af mental sundhed samt spyt- og afføringsprøvetagning blev gennemført ved hvert af T1- og T2-undersøgelsesbesøg. De primære resultatmål er mikrobiota-sammensætning, opfattet stressintensitet og stressrelaterede neuroendokrine markører (spytcortisol, spyt DHEA og spytcortisol: DHEA-forhold, fækal cortisol); De sekundære resultatmålinger er stress-coping-strategier, psykosomatiske symptomer, følelse af sammenhæng, kropssammensætning og knogletæthed). Al test blev udført om morgenen på samme tid for deltageren. Deltagerne erklærede, at de ikke havde indført nogen ændringer i deres livsstil, ernæring eller tilskud under undersøgelsesprotokollen og var forberedt til hvert besøg på samme måde. Derudover blev telefonkontakt opretholdt i tilfælde af manglende overholdelse af protokollen eller gastrointestinale symptomer eller bivirkninger.

Der var 20 frafald fra undersøgelsesprotokollen. De vigtigste grunde til at droppe ud var antibiotikabehandling under protokollen (n = 10) og seponering af undersøgelsen uden grund før det andet besøg (n = 10). Der var 11 frafald i LH+BL og 9 i PLA -grupperne. Endelig afsluttede 100 kvinder (23,5 ± 2,7 år; 61,6 ± 9,4 kg kropsmasse; 1,67 ± 0,06 m højde) hele undersøgelsesprotokollen og blev inkluderet i analyserne.

Tilskud i den eksperimentelle procedure blev hver deltager suppleret med en kronisk dosis på 1 kapsel pr. Dag af LH+BL eller PLA i en randomiseret, parallel sekvens. Deltagerne blev forsynet med blisterpakker med LH+BL-kapsler indeholdende 3 x 109 CFU af kombinerede frysetørrede probiotiske stammer af de probiotiske bakterier Bifidobacterium longum rosell®-175 og Lactobacillus Helveticus rosell®-52 (handelsnavn: Sanprobi®Stress) eller Pla Capsules indeholdt en isoengeticprodukter til de forsøg. PLA -kapslerne indeholdt kun kartoffelstivelse og magnesiumstearat som fyldstoffer. Kapselskallen bestod af hydroxypropylmethylcellulose, og vægten af ​​en enkelt kapsel var 420 mg. Probiotika var i identiske kapsler som PLA og kunne ikke skelnes ved udseende og smag. LH+BL- og PLA -kapsler blev opnået fra Sanprobi sp. Z O.O. sp. k., (Szczecin, Polen). Kombinationen og koncentrationen af ​​probiotika, der blev anvendt i denne undersøgelse, var baseret på producentens anbefalinger. Forberedelserne blev administreret til hver deltager i konvolutter markeret med en unik kode. I henhold til den anbefalede blændende procedure blev formuleringerne på forhånd forberedt af producentens laboratorium, som ikke var direkte involveret i undersøgelsen. Hvad angår dobbeltblindende, vidste hverken forskerne eller deltagerne, om LH+BL eller PLA blev administreret. Detaljer om randomisering blev anonymiseret og afsløret efter protokollens ophør.

Diæt og livsstil

Diætdata blev indsamlet ved hjælp af det validerede Kompan®-fødevarefrekvensspørgeskema, der blev lagt på Google Drive-fildelingsplatformen. Spørgeskemaet omfattede fødevarer, der ofte blev konsumeret af den polske befolkning, grupperet i 25 madkategorier. Deltagerne blev bedt om at vælge, hvor ofte de forbrugte hver type mad i de sidste 12 måneder. Tilgængelige frekvensresponser blev konverteret i daglige frekvenser og bestod af aldrig (0 gange/dag), 1-3 gange om måneden (0,06 gange/dag), en gang om ugen (0,14 gange/dag), et par år om ugen (0,5 gange/dag), en gang om dagen (1,0 gange/dag) eller et par gange om dagen (2,0 gange/dag). Diætkvaliteten blev beskrevet af to diætkvalitetsresultater: Pro-Sundt Diet Index (PHDI) og det usunde diætindeks (NHDI). Begge diætkvalitetsresultater blev beregnet som summen af ​​daglige frekvenser (i tider/dag) af forbrug af fødevarepost. PHDI inkluderede 10 genstande, der repræsenterede potentielt pro-sunde fødevarer (fuldkornsbrød, kornkorn, mælk, gæret mælkedrikke, hytteost, hvidt kød, fisk, bælgfrugter, frugt og grøntsager) med en total score i området fra 0-20 gange/dag. NHDI omfattede 14 fødevarer, der repræsenterede potentielt usunde fødevarer (hvidt brød, raffinerede korn, fastfood, stegt mad, smør, smult, ost, koldt skår, rødt kød, slik, dåse kød, sødede drikkevarer, energidrikke, alkohol) med et samlet scoreområde 0-28 gange/dag. Begge diætkvalitetsresultater blev genberegnet for at standardisere det samlede score-interval til 0-100 point for hver. Følgende formler blev anvendt:

PhDI (i point) = (100/20) × summen af ​​hyppigheden af ​​forbrug af 10 fødevarer (tidspunkter/dag) NHDI (i punkter) = (100/28) × Summen af ​​hyppigheden af ​​forbrug af 14 fødevarer (tider/dag) estimeret livsstilsadfærd inkluderede frekvens af daglige måltider, snacking, saltet og sukkerbrug, fysisk aktivitet, røgning osv.

Kropsmasse og kropssammensætningsvurdering Antropometriske målinger blev foretaget i begyndelsen af ​​hvert undersøgelsesbesøg for at sikre lige betingelser for testprocedurerne. Før kropssammensætningsanalyse blev vægt og højde målt til henholdsvis den nærmeste 0,1 cm og 0,1 kg for henholdsvis højde og vægt ved anvendelse af en kalibreret skala med et stadiometer (WB3007311, Tanita Corporation, Japan) og Body Mass Index (BMI) blev beregnet. Body Composition Analysis (FM og FFM) blev udført af både dobbeltenergi røntgenabsorptiometri (GE Lunar Prodigy Device-General Electrics Healthcare Medical Systems, Europe, Belgien) og forskydningsbelastning ved hjælp af BOD POD (Life Måling Inc., Concord, CA, USA). Alle målinger blev udført om morgenen (7: 30-10: 00 AM), og mens faste (vandindtagelse blev anbefalet), med den omgivende temperatur opretholdt ved 20-22 ° C. Alle deltagere undgik anstrengende træning i mindst 24 timer før hvert besøg.

Målinger af knoglemineraltæthed Alle undersøgelsesdeltagere gennemgik dobbeltenergi-røntgenabsorptiometri (DXA) af den samme tekniker ved hjælp af et Ge Lunar-vidunderbarntætometer (General Electrics Healthcare Medical Systems, Europe, Belgien). Den effektive dosis (μsv) til dette densitometer er 0,05. Parametre opnået fra målingen inkluderede knoglemineralindhold (BMC, G) og knoglemineraltæthed (BMD, G/CM2). BMD Z-score blev genereret ved hjælp af sex-, race- og aldersspecifikke normative DXA-databasesoftware Enco. International Society for Clinical Densitometry (ISCD) standarder anbefaler brugen af ​​Z-scores til vurdering af BMD hos premenopausale kvinder. Knoglemineraltæthed (BMD) blev sammenlignet med raske unge kvinder ved hver måling (lændehvirvelsøjle, total hofte, lårbenshals, radius), og en T-score blev beregnet. I henhold til Definitionen af ​​Verdenssundhedsorganisationen er osteoporose indikeret af en T -score mindre end -2,5 SD og osteopeni ved en T -score mellem -1 og -2,5 SD. Benparametre blev målt i henhold til den vedtagne densitometri -metodologi og International Society for Clinical Densitometry -anbefalinger. Et standardkvalitetskontrolprogram blev anvendt, som omfattede kontrol af DXA -udstyret for at verificere systemstabilitet og en visuel gennemgang af alle billeder af en erfaren eksaminator. Scanneren blev kalibreret dagligt, da DXA GE Lunar Prodigy Producent anbefalede. En standardkalibreringsblok blev anvendt. Undersøgelsen blev udført af et team med de nødvendige certificeringer til at udføre perifere og aksiale densitometri og erfaring i densitometri.

Spytopsamling og prøveanalyse Stressrelaterede neuroendokrine markører, nemlig spytcortisol og DHEA, måles såvel som cortisol: DHEA-forholdet. Før spytopsamling i laboratoriet blev deltagerne bedt om at afstå fra at indtage koffein og/eller nikotin i mindst 4 timer og alkohol i mindst 24 timer. Ustimulerede spytprøver blev opsamlet fra fastende deltagere i engangs eppendorf plastrør under anvendelse af spyttemetoden i 10 minutter, mens forsøgspersonerne hvilede. Deltagerne blev først bedt om at skylle munden med vand i cirka 30 sekunder og 10 minutter før de leverede en spytprøve. Spyt blev indsamlet mellem 9:00 og 11:00 for at minimere døgnforskelle. Prøver af materialet (2 rør pr. Person), umiddelbart efter opsamling, blev anbragt i en fryser ved -80 ° C og opbevaret indtil forsendelse til laboratoriet (Sanprobi Research and Development Center i Szczecin). Før analyse opvarmes og er der opvarmet prøver ved 1000 x g i 20 minutter for at fjerne partikelformigt materiale. Cortisol og DHEA i human spyt måles med kommercielt tilgængelige sæt ved hjælp af en immunoenzymatisk metode ifølge producentens instruktioner. Alle prøver behandles i duplikat under det samme assay. Statistiske analyser udføres ved hjælp af gennemsnittet af de to replikatmålinger. Rå værdier vil blive log-transformeret, og observationer, der er større end tre SD'er fra gennemsnittet for hver prøveudtagningstid, udelukkes.

Fækal prøveopsamling og mikrobiota og cortisol -analyse Fækal prøveudtagning blev udført som følger: fæces blev opsamlet hjemme på dagen for ankomst til laboratoriet eller dagen før, afkølet umiddelbart efter afføring i testpersonens køleskab og overført til laboratoriet. Prøver blev opbevaret ved -80 ◦C indtil analyse. Analyse af tarmmikrobiotaen vil blive udført i Sanprobi Research and Development Center Laboratory i Szczecin ved hjælp af Illumina Next-Generations-sekventeringsteknologi. DNA -ekstraktion fra den fækale prøve udføres under anvendelse af kommercielt tilgængelige isoleringssæt, efterfulgt af en vurdering af kvaliteten (integriteten) af isolatet. Det næste trin er DNA -amplifikation ved PCR ved anvendelse af specifikke primere komplementære til konserverede gensekvenser på hver side af målområdet. V2- og V3-hypervariable fragmenter af regionen, der består af ca. 400-500 basepar af det prokaryotiske 16S RRN-gen, er duplikeret. Amplikonerne fra hver prøve er stregkodet med en kort "stregkode" -sekvens, der er unik for hver prøve. Endelig udføres "multiplexeret" sekventering af høj kapacitet af alle prøver i et enkelt sekventeringsløb.

Fækale prøver til cortisolanalyse opvarmes og fortyndes med vand, og den efterfølgende procedure er den samme som for spytprøver, der er fremstillet til cortisolanalyse, som beskrevet ovenfor.

Personlighedsdimensioner Ten Personality Inventory (TIPI) skalaen er en valideret 10-punkts selvadministreret spørgeskema designet til at evaluere de psykosociale faktorer. Tipi blev designet af Gosling et al. Som et kort instrument til at måle de store fem personlighedsdimensioner med to genstande for hver egenskab (en standardartikel og en omvendt-scoret vare i hver egenskab). Disse personlighedsdimensioner omfatter ekstraversion (at være social, entusiastisk), behagelighed (pålidelighed, være empatisk), samvittighedsfuldhed (selvdisciplin, pålidelighed, selveffektivitet), følelsesmæssig stabilitet (den modsatte dimension til neurotik; være afbalanceret, rolig, resterende stabilitet) og åbenhed (nushed og skabelse, der er åben). Svarene i personlighedsskalaen blev målt på en syv-punkts Likert-skala og scoret som 1 = stærkt uenig, 2 = uenig moderat, 3 = uenig lidt, 4 = hverken er enig eller uenig, 5 = enig lidt, 6 = enig moderat, 7 = Enig stærkt. Svarene på omvendt-scorede genstande blev kodet til at være i overensstemmelse med standardartikler. Derefter blev gennemsnittet af standardposten og den omkodede omvendte-scorede vare beregnet for at udgøre hver dimensions skala-score, der varierede fra 1 til 7. scoringer i højere skala afspejler et højere niveau af hver egenskab.

Hver TIPI-skala-score blev kategoriseret efter den konceptuelle tilgang, der delte skalaen afhængigt af om scoringerne var lig med at være "enige" eller højere (i gennemsnit) for at skabe to kategorier: lavere tipi (<5 som uenige) og højere TIPI-kategorier (5-7 som enig). Enhver dimensionsskala score, der producerede enige og højere score, indikerede et højere niveau af denne egenskab og blev betragtet som en højere TIPI -kategori. Dette spørgeskemas interne pålidelighed med en Cronbachs alfa -værdi var 0,59. TIPI -spørgeskemaet blev kun administreret en gang under det indledende T1 -besøg.

Oplevet stress og mental sundhedsvurdering Vi indsamlede 5 selvrapporteringsskalaer relateret til brede domæner af opfattet stress og fysisk/mental sundhed: opfattet stressskala (PSS-10), korte mestringsorienteringer til problemer, der er oplevet inventar (kort-cope), sans for kohærens 13-punktskala (SOC-13), generel sundhedsspørgsmål GHQ-28 og Ten Personality Inventory (Tipi). Alle tests (i en standardiseret polsk version) var baseret på spørgeskemaer med selvvurderinger, der blev lagt ud på Google Drive File-delingsplatformen.

PSS-10-formularen blev brugt til at vurdere intensiteten af ​​stress relateret til ens egne livserfaringer i den sidste måned og var en modificeret version af den opfattede stressskala udviklet af Cohen. Respondenterne rapporterede på en 5-punkts Likert-skala (0 = aldrig, 1 = næsten aldrig, 2 = nogle gange, 3 = ganske ofte, 4 = meget ofte), i hvilket omfang situationer i deres liv i løbet af den sidste måned var uforudsigelig, ukontrollerbar og overvældende. Resultaterne for de fire positivt identificerede poster (poster 4, 5, 7, 8) vendes. Den maksimale score er 40 med højere score, der indikerer højere niveauer af opfattet stress. I henhold til instruktionerne indikerer scoringer i området 0-13 et lavt niveau af stress, scoringer i området 14-26 indikerer et moderat niveau af stress, og scoringer i området 27-40 indikerer et højt niveau af opfattet stress. I denne undersøgelse havde skalaen en Cronbachs alfa (α) på 0,85. Resultater på skalaen blev sammenlignet mellem de indledende og endelige vurderinger.

Den korte COPE er en forkortet 28-punkts version af Cope Inventory-spørgeskemaet af Carver et al. og blev brugt til at vurdere situationelle mestringsstrategier (måder, hvorpå folk håndterer en specifik stressende begivenhed) og dispositions mestringsstrategier (sædvanlige måder, folk håndterer stress i hverdagen). I sin originale version afslørede denne beholdning tilstrækkelige niveauer af intern konsistens, ud over at vise bevis for gyldigheden af ​​dens faktorstruktur. Vi brugte mini-cope, den forkortede polske version af Cope Inventory-spørgeskemaet. Skalaen måler 14 teoretisk eller empirisk forankret mestringsstrategier (mestring af underskalaer, hver med to genstande): selvdistraktion, aktiv mestring, benægtelse, stofbrug, følelsesmæssig støtte, instrumentel støtte, adfærdsmæssig frigørelse, udluftning, positiv breaming, planlægning, humor, humor, accept, religion og selv-slam. For hver vare angiver respondenterne, om de bruger mestringsresponsen på en fire-punkts Likert-skala (0 = Jeg gør normalt ikke dette næsten overhovedet; 1 = Jeg gør normalt dette sjældent; 2 = Jeg gør normalt dette ofte; 3 = Jeg gør normalt dette næsten altid).

Disse underskalaer blev futher kategoriseret i andenordens faktormodel, der bestod af "adaptive mestringsstrategier" (anvendelse af følelsesmæssig støtte, positive reframing, accept, religion, humor, aktiv mestring, planlægning og brug af instrumentel støtte) og "maladaptive mestringsstrategier" (udluftning, benægtelse, stofbrug, adfærdsopdatering, selvdistraktion og selvbelastning). Cronbachs alfa for de originale underskalaer varierede fra 0,66 til 0,70. Den samlede score for hver mestringsstrategi er summen af ​​scoringerne af to poster.

Følelsen af ​​kohærensskala SOC-13 er en skala med 13 punkter tilpasset fra en længere 29-punkts skala udviklet af Antonovsky. Denne skala er et selvrapporteringsspørgeskema og består af tre underskalaer: meningsfuldhed (fire poster), forståelighed (fem poster) og håndterbarhed (fire poster). Hver vare indeholder svar, der ændrer sig mellem spørgsmål og vurderes fra 1 til 7 på en Likert -skala. Fem variabler (poster 1, 2, 3, 7 og 10) er negativt formuleret og er derfor omvendt kodet, når genstande summeres for at opnå en vare i alt. SOC blev beregnet som gennemsnittet for hver enkelt person, der havde besvaret mindst 10 af de 13 varer (rækkevidde, 1.0-7.0) En højere score repræsenterer en større følelse af sammenhæng. Undersøgelser af de psykometriske egenskaber i SOC-13-skalaen har vist høje niveauer af gyldighed og pålidelighed, og den interne konsistens er meget god, med Cronbachs alphas, der spænder fra 0,70 til 0,92 i de 127 undersøgelser ved hjælp af SOC-13. I den aktuelle undersøgelse varierer pålidelighedsestimater for denne skala fra α = 0,77-0,79.

GHQ-28 Generelle sundhedsspørgeskema blev udviklet af Goldberg i 1978. Det er et mål for følelsesmæssig nød i de sidste par uger, der indeholder 28 genstande og kan bruges som et samfundsscreeningsværktøj og til påvisning af ikke-specifikke psykiatriske lidelser blandt personer i primærplejeindstillinger. Deltagerne blev spurgt om symptomer og/eller ubehag, de for nylig havde oplevet. Hver vare er klassificeret på en 4-punkts Likert-skala for at indikere symptomens sværhedsgrad fra 0 til 3 (0 = slet ikke, 1 = ikke mere end normalt, 2 = lidt mere end normalt, 3 = meget mere end normalt). Resultater for de syv positivt identificerede poster (poster 4, 5, 7, 8) vendes (1 = mere end sædvanligt, 2 = som sædvanligt, 3 = mindre end normalt, 4 = meget mindre end normalt). Elementer summeres på fire underskalaer: somatiske symptomer (genstande 1-7), angst/søvnløshed (genstande 8-14), social dysfunktion (genstande 15-21) og større depression (genstande 22-28). En høj GHQ-28-score indikerer en sandsynlig psykiatrisk sag. Normative data for den generelle befolkning, der er evalueret, indikerer et cutoff-punkt ≥ 5. Pålidelighed blev beregnet under anvendelse af Cronbach alfa-koefficient og var 0,89-0,90.

Socioøkonomisk status og stressende begivenheder blev et yderligere spørgeskema formuleret af forfatterne, herunder socioøkonomisk status (SES) (alder, bopæl, familiestatus, uddannelsesniveau) og spørgsmål om eventuelle stressende begivenheder (SES), der blev oplevet i løbet af den foregående måned.

Statistisk analyse Kontinuerlige variabler præsenteres som gennemsnit og standardafvigelse og variabler fra skalering som medianer og interkvartilområder (25% til 75%). Kategoriske variabler præsenteres som frekvenser. Forskelle mellem kategoriske variabler analyseres ved Fishers nøjagtige test. Alle kontinuerlige variabler testes for normal distribution ved hjælp af Shapiro-Wilk-testen såvel som kurtose, skævhed og en grafisk evaluering af fordelingen af ​​hver variabel data. Datatransformationsprocedurer (f.eks. Box-Cox-transformation) overvejes, hvis de resulterer i en normal fordeling af alle transformerede variabler. Sammenligninger mellem baseline- og post-tillægget tidspunkter (T1- og T2-besøg) i LH+BL- eller PLA-grupperne bestemmes ved anvendelse af t-testen for afhængige variabler og effektstørrelse udtrykt som Cohens d. Sammenligninger mellem grupper i ændringer før posten inden for variabler bestemmes ved anvendelse af t-testen for uafhængige variabler. Hvis normaliteten overtrædes, analyseres data ved hjælp af Wilcoxon-signeret-rank-testen med effektstørrelse udtrykt som rangkorrelationskoefficient (RC). Mann-Whitney U-test bruges til at sammenligne variablerne til test for forskelle mellem placebo og prebiotiske grupper. En alfa på <0,05 betragtes som statistisk signifikant. Data analyseres ved hjælp af Statistica 13.3 -software (Statsoft Inc., USA).