Wpływ wybranych bakterii probiotycznych na mikroflorę jelit, wskaźniki stresu i stan żywieniowy młodych dorosłych (PROBASTRESS)

WPROWADZENIE liczba osób otrzymujących usługi psychiatryczne rośnie w ciągu ostatnich kilku lat. W Polsce liczba osób z zaburzeniami psychicznymi w opiece ambulatoryjnej wzrosła o 150 000 w ostatnich latach, osiągając łącznie ponad 1,2 miliona pacjentów. Oczekuje się, że liczba osób wymagających opieki psychicznej i psychiatrycznej wzrośnie w nadchodzących dziesięcioleciach. Zastosowana psychofarmakoterapia nie zawsze daje oczekiwane wyniki leczenia. W rezultacie coraz więcej uwagi zwraca się na interakcje niefarmakologiczne. W ostatnich latach coraz więcej badań dotyczą relacji między odżywianiem a jego wpływem na stan psychiczny osób z zaburzeniami psychicznymi. Nauka o żywności i żywienia, psychodietyka i odżywianie, kwitnące dziedziny naukowe zyskują na znaczeniu. Wyniki badań wskazują, że zasoby odżywiania i stresu wpływają na zdrowie jednostki. Rola bakterii probiotycznych Lactobacillus helveticus i Bifidobacterium longum w ramach ludzkiego mikrobiomu badano również w tej kuli i wynika z rosnącej liczby papierów potwierdza ich szeroki zakres zastosowań i pozytywne skutki dla różnych dziedzin zdrowia. Wcześniejsze badania wykazały, że suplementacja bifidobacterium longum lub złożonym z nich z innymi szczepami bakteryjnymi pozytywnie wpłynęło między innymi, między innymi na zdrowie kości po menopauzie, złagodził dyskomfort w przewodzie pokarmowym, zmniejszony postrzegany stres i ulepszone depresję, lęk i nastrój u dorosłych różnych osób. Z drugiej strony suplementacja złożonym złożonym z kilku szczepów bakteryjnych, w tym Lactobacillus helveticus i Bifidobacterium longum, wpłynęła na zmniejszenie masy tłuszczu u osób otyłych i nadwagi. Wydaje się, że suplementacja probiotyczna ma ogromny potencjał do poprawy zdrowia i jakości życia, w tym zapobiegania i leczenia zaburzeń depresyjnych i lękowych oraz zdolności radzenia sobie ze stresem. Niemniej jednak w tym obszarze nadal brakuje badań, szczególnie dotyczące samego Lactobacillus helveticus i połączenia szczepów Lactobacillus helveticus i Bifidobacterium longum.

Mając to na uwadze, zaplanowano projekt badawczy w celu zbadania wpływu zarówno suplementów probiotycznych, jak i jakości diety na szeroki zakres wyników psychologicznych, mikrobiologicznych, biochemicznych i klinicznych. Badanie miało na celu ocenę skutków ukierunkowanej suplementacji za pomocą nowego składu szczepów probiotycznych Lactobacillus helveticus i Bifidobacterium longum na skład mikroflory jelitowej i jakość, gęstość stresu, które różniły się w jakości neuroendokrynne, w zakresie jakości diety. Postawiliśmy hipotezę, że suplementacja bakteriami probiotycznymi w dziennej dawce 3 x 109 CFU, niezależnie od jakości diety, spowodowałaby zmiany w mikroflory jelit w kierunku wyższych proporcji korzystnych bakterii, zmniejsza markery neuroendokrynne i intensywność komponentów i jego objawów psychosomatycznych oraz poprawianie stresu, a potencjał beneficynatywny w zakresie neuroendokrynnych i intensywności komponentów komponentowych i komponentów i i na jego objawach psychosomatycznych. Gęstość kości u zdrowych młodych kobiet, w porównaniu z placebo.

Projekt badania i populacja To randomizowane, kontrolowane placebo, 2-ramionowe, równoległe, podwójnie ślepe badanie interwencyjne przeprowadzono w kilku falach od września 2023 r. Do marca 2024 r. 2023 r. W Departamencie Żywienia i dietetyki paznańskiej Univrsity of Life). Każda fala rozpoczęła się w miesiącach jesiennych i została ukończona w miesiącach zimowych. Rozmiar próbki obliczono przy użyciu oprogramowania GPower (wersja 3.1.9.7, Universität Düsseldorf, Niemcy). W skrócie, aby wykryć znaczącą zmianę postrzeganego poziomu naprężenia z dwustronnym testem t, poziom istotności wynoszący 5%i moc statystyczną 80%, określono wielkość próby 110, biorąc pod uwagę 30%szybkość rezygnacji. Początkowo do tego badania zapisano 120 kobiet. Były to tylko kobiety we wczesnym wieku dorosłym. Kryteria kwalifikowalności do badania obejmowały płeć żeńską, wiek 20-30 lat, BMI <30 kg/m2. Kryteria wykluczenia były: zdiagnozowane przewlekłe i/lub poważne zaburzenia zdrowotne (np. Cukrzyca, astma, nadciśnienie, choroby nerek), ciąża, przyjmowanie jakiegoś probiotyków przez 8 tygodni przed włączeniem do protokołu badania, niedawne i obecne leczenie antybiotykami, stosowanie rudy leczenia przeciwdepresyjnego. Wszyscy uczestnicy byli zdrowymi wolontariuszami, którzy zostali w pełni poinformowani o celach badania i przedstawieni do udziału w badaniu. Protokół badania został przejrzany i zatwierdzony przez komitet bioetyki Karol Marcinkowski University of Medical Sciences w Poznan, Polska (nr pozwolenia. 244/23, wydane 9 marca 2023 r.). Badanie jest zgodne z oświadczeniem Consort w sprawie randomizowanych badań. Wszystkie procedury były zgodne z wytycznymi Deklaracji Helsinek z 2013 r. I dobrej praktyki klinicznej.

Zarejestrowani wolontariusze byli równomiernie, losowo i ślepo przypisani do grupy interwencyjnej (LH+BL), otrzymując bakterie probiotyczne lub grupę placebo (PLA) przez 12 tygodni suplementacji. Randomizację przeprowadził producent suplementów z kodami generowanymi komputerowo przy użyciu Research Randomizer (www.randomizer.org). Cały protokół badania obejmował zapoznanie się i dwie wizyty laboratoryjne w Departamencie Żywienia Człowieka i dietetyki na początku i pod koniec badania (T1, T2; przed/po suplementacji LH+BL [LH+BL Pre i LH+BL POST] oraz suplementacja PLA [PLAPRE i PLAPOST]). Główny protokół badania obejmował ocenę nawyków dietetycznych podczas wizyty w badaniu T1. Pomiary masy, wysokości, składu ciała, gęstości kości, reakcji na stres i strategii związanych z ograniczaniem stresu, oceny zdrowia psychicznego, a także próbkowania śliny i stołka przeprowadzono przy każdej wizycie w badaniu T1 i T2. Pierwotnymi pomiarami wyników są skład mikroflory, postrzegana intensywność stresu i markery neuroendokrynne związane z stresem (kortyzol w ślinie, DHEA ślinki i kortyzol ślinowy: DHEA, kortyzol kałowy); Wtórnymi pomiarami wyników są strategie związane ze stresem, objawy psychosomatyczne, poczucie spójności, skład ciała i gęstość kości). Wszystkie testy przeprowadzono rano w tym samym czasie dla uczestnika. Uczestnicy oświadczyli, że nie wprowadzili żadnych zmian w swoim stylu życia, odżywianiu lub suplementacji podczas protokołu badania i byli przygotowani na każdą wizytę w ten sam sposób. Ponadto kontakt telefoniczny utrzymywano w przypadku niezgodności z protokołem lub objawami przewodu pokarmowego lub zdarzeń niepożądanych.

Z protoku badań było 20 osób porzuconych. Głównymi powodami porzucenia były antybiotykoterapia podczas protokołu (n = 10) i przerwanie badania bez powodu przed drugą wizytą (n = 10). W LH+BL i 9 w grupach PLA było 11 osób. Wreszcie 100 kobiet (23,5 ± 2,7 lat; 61,6 ± 9,4 kg masy ciała; 1,67 ± 0,06 m wysokości) zakończyło cały protokół badania i zostało włączonych do analiz.

Suplementację w procedurze eksperymentalnej, każdy uczestnik uzupełniono przewlekłą dawką 1 kapsułki na dzień LH+BL lub PLA w randomizowanej, równoległej sekwencji. Uczestnikom wyposażono w pęcherzyki z kapsułkami LH+BL zawierającymi 3 x 109 CFU połączonych liofilizowanych szczepów probiotycznych bakterii probiotycznych bifidobacterium longum Rosell®-175 i produktu Lactobacillus helveticus Rosell®-52 (nazwa handlowa: SanProbi®-Merce). Kapsułki PLA zawierały tylko skrobię ziemniaka i stearynian magnezu jako wypełniacze. Skorupa kapsułki składała się z hydroksypropylometylocelulozy, a masa pojedynczej kapsułki wynosiła 420 mg. Probiotyki znajdowały się w identycznych kapsułkach jak PLA i nie można ich rozróżnić wyglądem i smakiem. Kapsułki LH+BL i PLA uzyskano z Sanprobi sp. Z O.O. sp. K., (Szczecin, Polska). Połączenie i stężenie probiotyków zastosowanych w tym badaniu oparto na zaleceń producenta. Przygotowania zostały podawane każdemu uczestnikowi w kopertach oznaczonych unikalnym kodem. Zgodnie z zalecaną procedurą oślepiania preparaty zostały wcześniej przygotowane przez laboratorium producenta, które nie było bezpośrednio zaangażowane w badanie. Jeśli chodzi o podwójne ślepe, ani naukowcy, ani uczestnicy nie wiedzieli, czy podawano LH+BL ani PLA. Szczegóły randomizacji zostały zanonimizowane i ujawnione po zaprzestaniu protokołu.

Dieta i styl życia

Dane dietetyczne zostały zebrane przy użyciu zatwierdzonego kwestionariusza częstotliwości żywności Kompan® opublikowanych na platformie udostępniania plików Drive. Kwestionariusz obejmował żywność powszechnie spożywaną przez polską populację, pogrupowaną w 25 kategorii żywności. Uczestnicy zostali poproszeni o wybór, jak często spożywali każdy rodzaj żywności w ciągu ostatnich 12 miesięcy. Dostępne odpowiedzi częstotliwości zostały przekonwertowane w dziennych częstotliwościach i składały się z nigdy (0 razy dziennie), 1-3 razy w miesiącu (0,06 razy dziennie), raz w tygodniu (0,14 razy dziennie), kilka razy w tygodniu (0,5 razy dziennie), raz dziennie (1,0 razy dziennie) lub kilka razy dziennie (2,0 razy dziennie). Jakość diety została opisana przez dwa wyniki jakości diety: wskaźnik diety Pro Healthy (PhDI) i niezdrowym wskaźnikiem diety (NHDI). Oba wyniki jakości diety obliczono jako sumę dziennych częstotliwości (w ciągu dnia/dnia) spożycia przedmiotów żywności. Phdi obejmowało 10 przedmiotów reprezentujących potencjalnie pro-healgy pokarmy (chleb pełnoziarnisty, zboża pełnoziarniste, mleko, sfermentowane napoje mleczne, twarogowe ser, białe mięso, ryby, rośliny strączkowe, owoce i warzywa) z całkowitym wynikiem od 0-20 razy dziennie. NHDI obejmowało 14 artykułów spożywczych reprezentujących potencjalnie niezdrową żywność (biały chleb, wyrafinowane zboża, fast food, smażone potrawy, masło, smalec, ser, zimne skaleczenia, czerwone mięso, słodycze, puszki, słodzone napoje, napoje energetyczne, alkohol) z całkowitym zakresem wyników 0-28 razy/dzień. Oba wyniki jakości diety zostały ponownie obliczone, aby standaryzować całkowity zakres wyników do 0-100 punktów dla każdego z nich. Zastosowano następujące formuły:

Phdi (w punktach) = (100/20) × Suma częstotliwości spożywania 10 produktów żywnościowych (czasy/dzień) NHDI (w punktach) = (100/28) × Sumę częstotliwości spożywania 14 przedmiotów żywnościowych (czasy dziennie) Szacowane zachowania w stylu życia obejmowały częstotliwość codziennych posiłków, przeżycie, sól i cukier, aktywność fizyczną, dymowanie itp.

Na początku każdej wizyty w badaniu dokonano oceny masy ciała i składu ciała antropometrycznego, aby zapewnić równe warunki dla procedur testowych. Przed analizą składu ciała mierzono wagę i wysokość odpowiednio z najbliższymi 0,1 cm i 0,1 kg, odpowiednio dla wysokości i masy, przy użyciu skalibrowanej skali ze stadiometrem (WB3007311, Tanita Corporation, Japonia) i wskaźnik masy ciała (BMI). Analizę składu ciała (FM i FFM) przeprowadzono zarówno za pomocą absorpcji rentgenowskiej z podwójną energią (urządzenie Prodigy GE Lunar-General Electrics Healthcare Medical Systems, Europe, Belgia), jak i listy przemieszczenia przy użyciu POD (Life Measurement Inc., Concord, CA, USA). Wszystkie pomiary przeprowadzono rano (7: 30-10: 00 AM) i podczas postu (zalecano spożycie wody), z temperaturą otoczenia utrzymaną w temperaturze 20-22 ° C. Wszyscy uczestnicy unikali uciążliwych ćwiczeń przez co najmniej 24 godziny przed każdą wizytą.

Pomiary gęstości minerałów kostnych Wszyscy uczestnicy badań przeszli absorpcjometrię rentgenowską podwójną energię (DXA) przez tego samego technika za pomocą densytometru Prodigy Prodigy GE (General Electrics Healthcare Medical Systems, Europe, Belgia). Efektywna dawka (μSV) dla tego densytometru wynosi 0,05. Parametry uzyskane z pomiaru obejmowały zawartość minerałów kości (BMC, G) i gęstość mineralna kości (BMD, G/CM2). Wyniki Z BMD zostały wygenerowane przy użyciu seksu, wyścigu i wieku normatywnego oprogramowania do bazy danych DXA ENCO. Standardy Międzynarodowego Towarzystwa Densytometrii Klinicznej (ISCD) zalecają stosowanie S-wyników do oceny BMD u kobiet przedprzepustowych. Gęstość mineralna kości (BMD) porównano ze zdrowymi młodymi kobietami przy każdym pomiarze (kręgosłup lędźwiowy, biodro, szyja kości udowej, promień) i wynik T. Zgodnie z definicją Światowej Organizacji Zdrowia osteoporoza wskazuje wynik T mniejszy niż -2,5 SD, a osteopenia przez wynik T między -1 do -2,5 SD. Parametry kości mierzono zgodnie z przyjętą metodologią densytometrii i Międzynarodowym Towarzystwa Zaleceń densytometrii klinicznej. Zastosowano standardowy program kontroli jakości, który obejmował sprawdzenie sprzętu DXA w celu weryfikacji stabilności systemu i wizualnego przeglądu wszystkich obrazów przez doświadczonego egzaminatora. Skaner kalibrowano codziennie, jak zalecił producent DXA GE Lunar Prodigy. Zastosowano standardowy blok kalibracyjny. Badanie zostało przeprowadzone przez zespół z niezbędnymi certyfikatami do wykonywania densytometrii obwodowej i osiowej oraz doświadczenia w densytometrii.

Zbieranie zbierania śliny i analiza próbek związane ze stresem markery neuroendokrynne, a mianowicie kortyzol ślinowy i DHEA, będą mierzone, a także współczynnik kortyzolu: DHEA. Przed zbieraniem śliny w laboratorium uczestnicy zostali poinstruowani, aby powstrzymali się od spożywania kofeiny i/lub nikotyny przez co najmniej 4 godziny i alkoholu przez co najmniej 24 godziny. Niestymulowane próbki śliny zebrano od uczestników na czczo w jednorazowych plastikowych rur Eppendorf przy użyciu metody plucia przez 10 minut, podczas gdy osoby odpoczynkowe. Uczestnicy zostali najpierw poproszeni o spłukanie ust za pomocą wody przez około 30 sekund i 10 minut przed dostarczeniem próbki śliny. Śliną zebrano między 9:00 a 11:00, aby zminimalizować różnice okołodobowe. Próbki materiału (2 rurki na osobę), natychmiast po pobraniu, umieszczono w zamrażarce w -80 ° C i przechowywano do wysyłki do laboratorium (Sanprobi Research and Development Center w Szczecynie). Przed analizą próbki zostaną rozgrzane i wirowane przy 1000 x g przez 20 minut w celu usunięcia materiału cząstek. Kortyzol i DHEA w ludzkiej ślinie będą mierzone za pomocą zestawów dostępnych w handlu przy użyciu metody immunoenzymatycznej zgodnie z instrukcjami producenta. Wszystkie próbki będą przetwarzane w duplikatach podczas tego samego testu. Analizy statystyczne zostaną przeprowadzone przy użyciu średniej z dwóch powtórzeń pomiarów. Wartości surowe będą transformowane logarytmicznie, a obserwacje większe niż trzy SDS ze średniej dla każdego czasu próbkowania zostaną wykluczone.

Zbieranie próbek kału oraz analiza mikroflory i kortyzolu pobieranie pobierania próbek kału przeprowadzono w następujący sposób: Odchody zebrano w domu w dniu przybycia do laboratorium lub dzień wcześniej, schłodzono natychmiast po defekacji w lodówce badanego i przeniesiono do laboratorium. Próbki przechowywano w temperaturze -80 ◦C aż do analizy. Analiza mikroflory jelitowej zostanie przeprowadzona w Sanprobi Research and Development Center Laboratory w Szczecynie przy użyciu technologii sekwencjonowania nowej generacji Illumina. Ekstrakcja DNA z próbki kału zostanie wykonana przy użyciu dostępnych w handlu zestawów izolacyjnych, a następnie oceny jakości (integralności) izolatu. Następnym krokiem jest amplifikacja DNA przez PCR przy użyciu określonych starterów uzupełniających się do zachowanych sekwencji genów po obu stronach regionu docelowego. Fragmenty hiperwarialne V2 i V3 w regionie, składające się z około 400-500 par prokariotycznego genu RRN 16S, są zduplikowane. Amplikony z każdej próbki są kodowane kody z krótką sekwencją „kodu kreskowego” unikalną dla każdej próbki. Wreszcie, wysokowydajne sekwencjonowanie „multipleksowanego” wszystkich próbek jest wykonywane w jednym przebiegu sekwencjonowania.

Próbki kału do analizy kortyzolu zostaną podgrzane i rozcieńczone wodą, a późniejsza procedura jest taka sama jak w przypadku próbek śliny przygotowanych do analizy kortyzolu, jak opisano powyżej.

Wymiary osobowości Skala Inwentarza Osobowości Dziesięciu pozycji (TIPI) to zatwierdzony 10-elementowy kwestionariusz samozadowolony zaprojektowany w celu oceny czynników psychospołecznych. TIPI zostały zaprojektowane przez Gosling i in. Jako krótki instrument do pomiaru wymiarów osobowości Wielkiej Piątki z dwoma elementami dla każdej cechy (standardowy element i pozycja w odwróconej cenie w każdej cechy). Te wymiary osobowości obejmują ekstrawersję (będąc społeczną, entuzjastyczną), ugodowości (wiarygodność, empatyczna), sumienność (samodyscyplina, niezawodność, samoocenienie), stabilność emocjonalna (przeciwny wymiar do neurotyzmu; bycie zrównoważonym, spokojnym, zdolnością pozostałej stabilnej) i otwartości (ostrożność i kreiźność, bycie oskarżonym). Odpowiedzi w skali osobowości zostały zmierzone w siedmiopunktowej skali Likerta i oceniono jako 1 = zdecydowanie się nie zgadzam, 2 = nie zgadzam się umiarkowanie, 3 = nie zgadzaj się trochę, 4 = ani zgadzam się ani nie zgadzam, 5 = zgadzam się trochę, 6 = Zgadzam się umiarkowanie, 7 = Zgadzam się silnie. Odpowiedzi na elementy wsteczne zostały przekodowane, aby były spójne ze standardowymi elementami. Następnie obliczono średnią standardowego elementu i przekodowanej pozycji z odwrotną cechą w celu uzupełnienia oceny skali każdego wymiaru, który wahał się od 1 do 7. Wyniki wyższej skali odzwierciedlają wyższy poziom każdej cechy.

Każdy wynik skali TIPI został skategoryzowany przez podejście pojęciowe, które dzieliło skalę w zależności od tego, czy wyniki były równe „zgadzam się” lub wyższym (średnio), aby utworzyć dwie kategorie: niższe TIPI (<5 jako nie zgadzają się) i wyższe kategorie TIPI (5-7 jako zgoda). Każdy wynik skali wymiaru, który spowodował zgodę, a wyższe wyniki wskazywały na wyższy poziom tej cechy i został uznany za wyższą kategorię TIPI. Wewnętrzna wiarygodność kwestionariusza z wartością alfa Cronbacha wynosiła 0,59. Kwestionariusz TIPI podano tylko raz podczas pierwszej wizyty T1.

Postrzegana ocena stresu i zdrowia psychicznego zebrali 5 samoocennych (sub) skal związanych z szerokimi dziedzinami postrzeganego stresu i zdrowia fizycznego/psychicznego: postrzegana skala stresu (PSS-10), krótkie orientacje radzenia sobie z problemami doświadczonymi inwentaryzatorami (krótko-kółka), poczucie koherencji 13-elementowej skali (SOC-13), ogólnego stanu zdrowia GHQ-28 i dziesięciu przedmiotów (tipi). Wszystkie testy (w znormalizowanej polskiej wersji) były oparte na kwestionariuszach samooceny opublikowanych na platformie udostępniania plików Dysu Google.

Formularz PSS-10 zastosowano do oceny intensywności stresu związanego z własnymi doświadczeniami życiowymi w ciągu ostatniego miesiąca i była zmodyfikowaną wersją postrzeganej skali stresu opracowanej przez Cohena. Respondenci zgłaszali w 5-punktowej skali Likerta (0 = nigdy, 1 = prawie nigdy, 2 = czasami 3 = dość często, 4 = bardzo często), w jakim sytuacje w ich życiu w ciągu ostatniego miesiąca były nieprzewidywalne, niekontrolowane i przytłaczające. Wyniki dla czterech pozytywnie zidentyfikowanych elementów (pozycje 4, 5, 7, 8) są odwrócone. Maksymalny wynik wynosi 40, przy czym wyższe wyniki wskazują na wyższy poziom postrzeganego naprężenia. Zgodnie z instrukcjami wyniki w zakresie 0-13 wskazują na niski poziom naprężenia, wyniki w zakresie 14-26 wskazują na umiarkowany poziom naprężenia, a wyniki w zakresie 27-40 wskazują na wysoki poziom postrzeganego naprężenia. W tym badaniu skala miała alfa Cronbacha (α) 0,85. Wyniki w skali porównano między ocenami początkowymi i końcowymi.

Krótkie porażkę to skrócona 28-elementowa wersja kwestionariusza zapasów COPE autorstwa Carvera i in. i został wykorzystany do oceny sytuacyjnych strategii radzenia sobie (sposoby, w jakie ludzie radzą sobie z konkretnym stresującym wydarzeniem) i strategie radzenia sobie z dyspozycyjnymi (zwykłe sposoby radzenia sobie ze stresem w życiu codziennym). W swojej oryginalnej wersji ten zapas ujawnił odpowiednie poziomy wewnętrznej spójności, oprócz wykazania dowodu ważności jej struktury czynnikowej. Zastosowaliśmy mini-cope, skróconą polską wersję kwestionariusza zapasów COPE. Skala mierzy 14 teoretycznie lub empirycznie ugruntowanych strategii radzenia sobie (radzenie sobie podskal, każda z dwoma elementami): samozadowolenie, aktywne radzenie sobie, zaprzeczanie, używanie substancji, emocjonalne wsparcie, instrumentalne poparcie, zachowanie, odprowadzanie, pozytywne przetrwanie, planowanie, akceptacja, religia, samozadowolenie. Dla każdego elementu respondenci wskazują, czy używają odpowiedzi radzenia sobie w czteropunktowej skali Likerta (0 = zwykle nie robię tego prawie w ogóle; 1 = zwykle robię to rzadko; 2 = zwykle robię to często; 3 = zwykle robię to prawie zawsze).

Te podskale były futher podzielone na model czynnika drugiego rzędu, który składał się z „adaptacyjnych strategii radzenia sobie” (użycie wsparcia emocjonalnego, pozytywnego zamykania, akceptacji, religii, humoru, aktywnego radzenia sobie, planowania i użycia wsparcia instrumentalnego). Alfa Cronbacha dla oryginalnych podskal wahała się od 0,66 do 0,70. Ogólny wynik każdej strategii radzenia sobie jest sumą wyników dwóch pozycji.

Poczucie skali spójnej SOC-13 jest 13-elementową skalą zaadaptowaną z dłuższej 29-elementowej skali opracowanej przez Antonovsky'ego. Ta skala jest kwestionariuszem samoopisu i składa się z trzech podskal: znaczenia (czterech pozycji), zrozumienia (pięć pozycji) i zarządzania (cztery pozycje). Każdy element zawiera odpowiedzi, które zmieniają się między pytaniami i są oceniane od 1 do 7 w skali Likerta. Pięć zmiennych (pozycje 1, 2, 3, 7 i 10) jest negatywnie sformułowane i dlatego są kodowane odwrotnie, gdy elementy zostaną zsumowane w celu uzyskania całkowitej pozycji. SOC obliczono jako średnią dla każdej osoby, która odpowiedziała co najmniej 10 z 13 pozycji (zakres, 1,0-7,0) Wyższy wynik stanowi większe poczucie spójności. Badania właściwości psychometrycznych skali SOC-13 wykazały wysoki poziom ważności i niezawodności, a wewnętrzna spójność jest bardzo dobra, przy czym alfy Cronbacha wahają się od 0,70 do 0,92 w 127 badaniach z wykorzystaniem SOC-13. W bieżącym badaniu szacunki niezawodności dla tej skali obejmują α = 0,77-0,79.

Ogólny kwestionariusz zdrowia GHQ-28 został opracowany przez Goldberga w 1978 r. Jest to miara stresu emocjonalnego w ciągu ostatnich kilku tygodni, która zawiera 28 pozycji i może być używana jako narzędzie do badań nad społecznością oraz do wykrywania niespecyficznych zaburzeń psychicznych wśród osób w podstawowej opiece zdrowotnej. Uczestnicy zostali zapytani o objawy i/lub dyskomfort, których ostatnio doświadczyli. Każda pozycja jest oceniana w 4-punktowej skali Likerta, aby wskazać ciężkość objawów od 0 do 3 (0 = wcale nie, 1 = nie więcej niż zwykle, 2 = nieco więcej niż zwykle, 3 = znacznie więcej niż zwykle). Wyniki dla siedmiu pozytywnie zidentyfikowanych pozycji (pozycje 4, 5, 7, 8) są odwrócone (1 = więcej niż zwykle, 2 = jak zwykle, 3 = mniej niż zwykle, 4 = znacznie mniej niż zwykle). Pozycje są sumowane na czterech podskalach: objawy somatyczne (pozycje 1-7), lęk/bezsenność (pozycje 8-14), dysfunkcja społeczna (pozycje 15-21) i poważną depresję (pozycje 22-28). Wysoki wynik GHQ-28 wskazuje na prawdopodobny przypadek psychiatryczny. Dane normatywne dla ocenianej populacji ogólnej wskazują na punkt odcięcia ≥ 5. Niezawodność obliczono przy użyciu współczynnika alfa Cronbacha i wynosiła 0,89-0,90.

Status społeczno -ekonomiczny i stresujące zdarzenia Sformułowano dodatkowy kwestionariusz przez autorów, w tym status społeczno -ekonomiczny (SES) (wiek, miejsce zamieszkania, status rodziny, poziom wykształcenia) oraz pytania dotyczące wszelkich stresujących wydarzeń (SES) doświadczonych w poprzednim miesiącu.

Analiza statystyczna zmienne ciągłe są przedstawiane jako średnie i odchylenie standardowe oraz zmienne od skalowania jako median i zakresów międzykwartylowych (25% do 75%). Zmienne kategoryczne są prezentowane jako częstotliwości. Różnice między zmiennymi kategorycznymi są analizowane za pomocą dokładnego testu Fishera. Wszystkie zmienne ciągłe są testowane pod kątem rozkładu normalnego przy użyciu testu Shapiro-Wilka, a także kurtozy, skośności i graficznej oceny rozkładu każdego zmiennego danych. Procedury transformacji danych (np. Transformacja pudełka) są brane pod uwagę, jeśli powodują normalny rozkład wszystkich zmiennych transformowanych. Porównania między punktami czasowymi i po suplementacji (wizyty T1 i T2) w grupach LH+BL lub PLA są określane przy użyciu testu t dla zmiennych zależnych i wielkości efektu wyrażonego jako D Cohena. Porównania między grupami w zmianach przed post-post w zmiennych są określane przy użyciu testu t dla zmiennych niezależnych. Jeśli normalność zostanie naruszona, dane są analizowane przy użyciu testu podpisanego w rankingu Wilcoxona z wielkością efektu wyrażonym jako współczynnik korelacji rang (RC). Test U Manna-Whitneya służy do porównania zmiennych w celu przetestowania różnic między grupami placebo i prebiotykami. Alfa <0,05 jest uważany za statystycznie istotny. Dane są analizowane przy użyciu oprogramowania StatisticA 13.3 (Statsoft Inc., USA).