Влияние выбранных пробиотических бактерий на микробиоту кишечника, стрессовые показатели и состояние питания молодых людей (PROBASTRESS)

Введение Число людей, получающих психиатрические услуги, увеличилось за последние несколько лет. В Польше число людей с психическими расстройствами в амбулаторной помощи увеличилось на 150 000 в последние годы, достигнув в общей сложности более 1,2 миллиона пациентов. Ожидается, что число людей, требующих психологической и психиатрической помощи, будет расти в ближайшие десятилетия. Используемая психофармакотерапия не всегда дает ожидаемые результаты лечения. В результате все больше и больше внимания уделяется нефармакологическим взаимодействиям. В последние годы наблюдается растущее исследование о взаимосвязи между питанием и его влиянием на психическое состояние людей с психическими расстройствами. Наука о продуктах питания и питании, психодиететике и нутрипсихиатрии, процветающих научных областей, приобретают известность. Результаты исследований показывают, что питание и стрессовые ресурсы влияют на здоровье человека. Роль пробиотических бактерий Lactobacillus helveticus и Bifidobacterium Longum как часть микробиома человека также была изучена в этой сфере, и результаты растущего числа статей подтверждают их широкий спектр применений и положительные последствия на различные области здоровья. Предыдущие исследования показали, что добавление с помощью Bifidobacterium longum или их состав с другими бактериальными штаммами положительно влияют, среди прочего, здоровье костей в постменопаузе, облегченные дискомфорт желудочно -кишечного тракта, снижение воспринимаемого стресса и улучшение депрессии, тревоги и показателей настроения у взрослых в разных возрастах. С другой стороны, добавление с совокупностью из нескольких штаммов бактерий, в том числе Lactobacillus helveticus и Bifidobacterium longum, повлияло на снижение массы жира у людей с ожирением и избыточного веса. Пробиотические добавки, по -видимому, имеют большой потенциал для улучшения здоровья и качества жизни, включая профилактику и лечение депрессивных и тревожных расстройств, а также способность справляться со стрессом. Тем не менее, в этой области по -прежнему не хватает исследований, особенно в отношении только Lactobacillus helveticus и сочетания Lactobacillus helveticus и штаммов Bifidobacterium longum.

Имея это в виду, исследовательский проект планировал исследовать влияние как пробиотических добавок, так и диетического качества на широкий спектр психологических, микробиологических, биохимических и клинических результатов. Исследование было направлено на оценку влияния целевого добавки с новой композицией пробиотических штаммов Lactobacillus helveticus и Bifidobacterium longum на состав и качество микробиоты кишечника, стресс-связанные нейроэндокринные маркеры, психическое здоровье, интенсивность стресса, психосоматическая реакция и стратегии преодоления выживания, а также на телу, а также в телу, а также на качествах в диете, которые различаются в качествах, которые различаются в качествах в диете. We hypothesised that supplementation with probiotic bacteria at a daily dose of 3 x 109 CFU, irrespective of diet quality, would result in changes in the gut microbiota towards higher proportions of beneficial bacteria, reduce stress-related neuroendocrine markers and the intensity of perceived stress and its psychosomatic symptoms, and improve stress-coping strategies, mental health potential and have a beneficial effect on body composition components and Плотность костей у здоровых молодых женщин, по сравнению с плацебо.

Дизайн исследования и популяция Это рандомизированное плацебо-контролируемое, 2-ручное, параллельное, двойное слепое исследование вмешательства было проведено в нескольких волнах с сентября 2023 года по март 2024 г. 2023 года в Департаменте питания и диетической области человека (Poznań Univrsity of Life Sciences). Каждая волна начиналась в осенние месяцы и была завершена в зимние месяцы. Размер выборки был рассчитан с использованием программного обеспечения GPOWER (версия 3.1.9.7, Universität Düsseldorf, Германия). Вкратце, чтобы обнаружить значительное изменение воспринимаемого уровня стресса с двусторонним t-критерием, уровнем значимости 5%и статистической мощностью 80%, был определен размер выборки 110, учитывая 30%отсева. Первоначально 120 женщин были зачислены в это исследование. Это были только женщины в раннем взрослом возрасте. Критерии приемлемости для исследования включали женский пол, возраст 20-30 лет, ИМТ <30 кг/м2. Критериями исключения были: диагноз хронических и/или серьезных расстройств здоровья (например, Диабет, астма, гипертония, заболевания почек), беременность, пробиотики в течение 8 недель до регистрации в протокол исследования, недавнее и текущее лечение антибиотиками, использование фармацевтической антидепрессанты. Все участники были здоровыми добровольцами, которые были полностью проинформированы о целях исследования и дали информированное согласие на участие перед входом в исследование. Протокол исследования был рассмотрен и утвержден комитетом по биоэтике Университета медицинских наук Карола Маркинковски в Познане, Польша (разрешение №. 244/23, выпущен 9 марта 2023 года). Исследование соответствует заявлению Консорта о рандомизированных исследованиях. Все процедуры следовали руководящим принципам декларации Хельсинки и хорошей клинической практики 2013 года.

Зарегистрированные добровольцы были равномерно, случайно и слепо назначены либо в группу вмешательства (LH+BL), получая пробиотические бактерии, либо группу плацебо (PLA) в течение 12 недель добавки. Рандомизация проводилась производителем добавок с компьютерными кодами с использованием Research Randomizer (www.randomizer.org). Весь протокол исследования включал ознакомление и два лабораторных посещения в Департаменте питания и диетологии человека на исходном уровне и в конце исследования (T1, T2; до/после добавления LH+BL [LH+BL Pre и LH+BL Post] и добавки PLA [plapre и plapost]). Основной протокол исследования включала оценку пищевых привычек при посещении исследования T1. Измерения веса, роста, состава тела, плотности костей, реакции на стресс и стратегии стресса, оценки психического здоровья, а также выборки слюны и стула проводились при каждом из посещений исследования T1 и T2. Основными показателями исхода являются состав микробиоты, воспринимаемая интенсивность стресса и связанные с стрессом нейроэндокринные маркеры (кортизол слюны, слюна DHEA и слюнный кортизол: отношение DHEA, фекальный кортизол); Вторичными показателями результата являются стратегии стресса, психосоматические симптомы, чувство когерентности, состав тела и плотность костей). Все тестирование проводилось утром для участника. Участники заявили, что они не ввели никаких изменений в свой образ жизни, питание или добавки во время протокола исследования и были подготовлены к каждому посещению одинаково. Кроме того, телефонный контакт поддерживался в случае несоблюдения протокола или желудочно-кишечных симптомов или побочных эффектов.

Из протокола исследования было 20 выпадений. Основными причинами выпадения были антибиотикотерапия во время протокола (n = 10) и прекращения исследования без причины до второго визита (n = 10). В LH+BL было 11 выпадений и 9 в группах PLA. Наконец, 100 женщин (23,5 ± 2,7 года; 61,6 ± 9,4 кг массы тела; 1,67 ± 0,06 м высота) завершили весь протокол исследования и были включены в анализ.

Дополнение В экспериментальной процедуре каждый участник был дополнен хронической дозой 1 капсулы в день LH+BL или PLA в рандомизированной параллельной последовательности. Участникам были предоставлены блистерные пакеты капсул LH+BL, содержащие 3 x 109 КОЕ-комбинированных пробиотических штаммов пробиотических бактерий Bifidobacterium longum Rosell®-175 и Lactobacillus helveticus rosell®-52 (торговое название: Sanprobi® Stress) или PLA-капсулы, содержащий продукт. Капсулы PLA содержали только картофельный крахмал и стеарат магния в качестве наполнителей. Капсульная оболочка состояла из гидроксипропилметилцеллюлозы, а вес одной капсулы составлял 420 мг. Пробиотики были в идентичных капсулах в качестве PLA и нельзя различить внешним видом и вкусом. Капсулы LH+BL и PLA были получены от Sanprobi SP. Z O.O. шрифт К., (Zczecin, Польша). Комбинация и концентрация пробиотиков, используемых в этом исследовании, были основаны на рекомендациях производителя. Приготовления были управляются каждому участнику в конвертах, отмеченных уникальным кодом. Согласно рекомендуемой процедуре ослепления, составы были заранее подготовлены лабораторией производителя, которая не была непосредственно вовлечена в исследование. Что касается двойного слепого, то ни исследователи, ни участники не знали, были ли введения LH+BL или PLA. Детали рандомизации были анонимизированы и раскрыты после прекращения протокола.

Диета и образ жизни

Диетические данные были собраны с использованием проверенной анкеты для частоты пищи Kompan®, размещенного на платформе обмена файлами Google Drive. Анкета включала в себя продукты, которые обычно потребляют польское население, сгруппированные в 25 категорий продуктов питания. Участники попросили выбрать, как часто они потребляли каждый тип пищи за последние 12 месяцев. Доступные частотные ответы были преобразованы на ежедневных частотах и ​​состояли из никогда (0 раз в день), 1-3 раза в месяц (0,06 раз в день), раз в неделю (0,14 раза в день), несколько раз в неделю (0,5 раза в день), один раз в день (1,0 раза в день) или несколько раз в день (2,0 раза в день). Качество диеты было описано двумя показателями качества диеты: индексом диеты про-здоровья (PhDI) и нездоровым индексом диеты (NHDI). Оба оценки качества диеты были рассчитаны как сумма ежедневных частот (в течение времени в день) потребления продуктов питания. Доктор философии включали в себя 10 предметов, представляющих потенциально продовольственные продукты (цельнозерновой хлеб, цельнозерновые зерновые, молоко, ферментированные молочные напитки, творог, белое мясо, рыба, бобовые, фрукты и овощи) с общим счетом от 0 до 20 раз в день. NHDI включали в себя 14 продуктов питания, представляющих потенциально нездоровую пищу (белый хлеб, рафинированные хлопья, фаст-фуд, жареные продукты, масло, сало, сыр, холодные порезы, красное мясо, сладости, консервированное мясо, подслащенные напитки, энергетические напитки, алкоголь) с общим счетом 0-28 раз/день. Оба показателя качества диеты были пересчитаны, чтобы стандартизировать общий диапазон баллов до 0-100 баллов для каждого. Были использованы следующие формулы:

Доктор философии (в точках) = (100/20) × сумма частоты потребления 10 продуктов питания (время/день) NHDI (в точках) = (100/28) × сумме частоты потребления 14 пищевых продуктов (время/день), оцениваемые поведения в образе жизни, включали частоту ежедневного приема пищи, перекусы, соли и использования сахара, физической активности, курение и т. Д.

Оценка массы тела и состава тела Антропометрические измерения были проведены в начале каждого посещения исследования, чтобы обеспечить равные условия для процедур испытаний. Перед анализом состава тела веса и высота измерялись до ближайшего 0,1 см и 0,1 кг для высоты и веса, соответственно, с использованием калиброванной шкалы со стадиометром (WB3007311, Tanita Corporation, Япония) и был рассчитан индекс массы тела (ИМТ). Анализ композиции тела (FM и FFM) проводили как с двойной энергией рентгеновской абсорбциометрии (GE Lunar Prodigy Device-Общие электронгические медицинские системы, Европа, Бельгия), так и Plethysmography смещения с использованием BOD POD (Life Seamurement Inc., Concord, CA, USA). Все измерения проводились утром (7: 30-10: 00 утра) и во время поста (потребление воды было рекомендовано), причем температура окружающей среды сохранялась при 20-22 ° C. Все участники избегали напряженных упражнений в течение не менее 24 часов до каждого посещения.

Измерения минеральной плотности кости Все участники исследования прошли двойную рентгеновскую абсорбциометрию (DXA) тем же техником, использующим денситометр GE Lunar Prodigy (общие медицинские системы здравоохранения, Европа, Бельгия). Эффективная доза (μSV) для этого денситометра составляет 0,05. Параметры, полученные из измерения, включали содержание минералов кости (BMC, G) и плотность минералов кости (BMD, G/CM2). BMD Z-оценки были получены с использованием программного обеспечения для базы данных DXA по полу, расе и возрастным, специфичным для стационарного возраста. Стандарты Международного общества клинической денситометрии (ISCD) рекомендуют использовать Z-показатели для оценки BMD у женщин в пременопаузе. Минеральная плотность кости (BMD) сравнивалась со здоровыми молодыми женщинами при каждом измерении (поясничный позвоночник, общее бедро, шейка бедренной кости, радиус) и T-показатель был рассчитан. Согласно определению Всемирной организации здравоохранения, остеопороз обозначен T -показателем меньше -2,5 SD, а остеопения -T -показателем между -1 до -2,5 SD. Параметры костей были измерены в соответствии с принятой методологией денситометрии и рекомендациями Международного общества по клинической денситометрии. Была использована стандартная программа управления качеством, которая включала проверку оборудования DXA для проверки стабильности системы и визуальный обзор всех изображений опытным экзаменатором. Сканер был откалиброван ежедневно, как рекомендовал производитель Lunar Prodigy DXA GE. Был использован стандартный калибровочный блок. Исследование было выполнено командой с необходимыми сертификатами для выполнения периферической и осевой денситометрии и опыта в денситометрии.

Сбор слюны и анализ образцов, связанные с стрессом, будут измерены, а также кортизол слюны и DHEA, а также соотношение кортизола: DHEA. Перед сбором слюны в лаборатории участникам было дано указание воздерживаться от употребления кофеина и/или никотина в течение не менее 4 часов и алкоголя не менее 24 часов. Несталированные образцы слюны были собраны у участников голодания в одноразовых пластиковых трубках Eppendorf с использованием метода плев в течение 10 минут, пока субъекты отдыхали. Участников сначала попросили промыть рот водой в течение примерно 30 секунд и за 10 минут до предоставления образца слюны. Слюна была собрана с 9:00 до 11:00, чтобы минимизировать циркадные различия. Образцы материала (2 труб на человека), сразу после сбора, были помещены в морозильник при -80 ° C и хранились до отправки в лабораторию (Центр исследований и развития Санпроби в chzzecin). Перед анализом образцы будут нагреты и центрифугированы при 1000 x g в течение 20 минут для удаления частиц. Кортизол и DHEA в слюне человека будут измерены с помощью коммерчески доступных наборов с использованием иммуноферментатического метода в соответствии с инструкциями производителя. Все образцы будут обрабатываться в дублировании во время одного анализа. Статистический анализ будет выполняться с использованием среднего значения двух повторяющихся измерений. Необработанные значения будут трансформированы, а наблюдения, превышающие три SD от среднего значения для каждого времени отбора проб.

Сбор фекальных образцов и микробиота и анализ кортизола фекальной выборки проводили следующим образом: фекалии собирались дома в день прибытия в лабораторию или накануне, охлаждались сразу после дефекации в холодильнике испытуемого субъекта и переданы в лабораторию. Образцы хранили при -80 ° С до анализа. Анализ кишечной микробиоты будет проводиться в лаборатории Санпроби исследований и Центра разработок в chzzecin с использованием технологии секвенирования следующего поколения Illumina. Экстракция ДНК из образца фекалий будет выполняться с использованием коммерчески доступных наборов для выделения, за которым следует оценка качества (целостности) изолята. Следующим шагом является амплификация ДНК с помощью ПЦР с использованием специфических праймеров, дополненных консервативным последовательностям генов по обе стороны от области цели. Фрагменты гипервариата V2 и V3 в области, состоящие из примерно 400-500 пар оснований гена прокариотического 16S RRN, дублируются. Ампликоны из каждого образца находятся в штрих -кодировании с короткой последовательности «штрих -кода», уникальной для каждого образца. Наконец, высокопроизводительное «мультиплексированное» секвенирование всех образцов выполняется в одном последовательности.

Фекальные образцы для анализа кортизола будут нагреты и разбавлены водой, а последующая процедура такая же, как и для образцов слюны, приготовленных для анализа кортизола, как описано выше.

Личностные измерения. Шкала «Инвентаризация личности» (TIPI)-это проверка с 10-элементами, самостоятельно введенную анкету, предназначенную для оценки психосоциальных факторов. TIPI был разработан Gosling et al. В качестве краткого инструмента для измерения измерений личности Большой пятерки с двумя элементами для каждой черты (стандартный элемент и обратный балл в каждой черте). Эти личностные измерения включают экстраверсию (социальную, энтузиазму), приятность (достоверность, будучи сочувствием), добросовестность (самодисциплина, надежность, самоэффективность), эмоциональная стабильность (противоположное измерение к невротизму; уравновешенное, спокойное, способность оставаться стабильными) и открытость (куристость и креативность, быть открытыми). Ответы в шкале личности были измерены по семибалльной шкале Лайкерта и оценивались как 1 = категорически не согласны, 2 = не согласен, 3 = немного не согласен, 4 = не согласен, ни не согласен, 5 = немного согласен, 6 = согласен с умеренно, 7 = полностью согласен. Ответы на элементы с обратной оценкой были перекодированы, чтобы соответствовать стандартным элементам. Затем было рассчитано среднее значение стандартного элемента и перекодированного обратного показателя, чтобы составить оценку по шкале каждого измерения, что варьировалось от 1 до 7. Более высокие оценки отражают более высокий уровень каждой черты.

Каждый балл шкалы TIPI был классифицирован по концептуальному подходу, который делят шкалу в соответствии с тем, были ли оценки равны «согласны» или выше (в среднем) для создания двух категорий: более низкие типи (<5 как несогласие) и более высокие категории TIPI (5-7 как согласны). Любая оценка шкалы измерений, которая произвела согласен, и более высокие оценки указывали на более высокий уровень этой черты и рассматривались как более высокая категория TIPI. Внутренняя надежность этого вопросника с альфа -значением Кронбаха составила 0,59. Анкета TIPI вводилась только один раз во время первоначального визита T1.

Оценка воспринимаемого стресса и психического здоровья Мы собрали 5 шкал самоотчета (Sub), связанных с широкими областями воспринимаемого стресса и физического/психического здоровья: воспринимаемой шкалы стресса (PSS-10), краткие ориентации преодоления проблем, испытывавших инвентаризацию (краткий копей), чувство когерентной шкалы 13-элементов (SOC-13), общий вопросник по вопросам здоровья GHQ-28 и десять инвентариальность (SOC-13). Все тесты (в стандартизированной польской версии) были основаны на вопросниках самооценки, размещенных на платформе обмена файлами Google Drive.

Форма PSS-10 использовалась для оценки интенсивности стресса, связанного с собственным жизненным опытом в прошлом месяце, и была модифицированной версией воспринимаемой шкалы стресса, разработанной Коэном. Респонденты сообщили по 5-балльной шкале Лайкерта (0 = никогда, 1 = почти никогда, 2 = иногда 3 = довольно часто 4 = очень часто), в какой степени ситуации в их жизни в течение прошлого месяца были непредсказуемыми, неконтролируемыми и подавляющими. Оценки для четырех положительно идентифицированных предметов (пункты 4, 5, 7, 8) обращаются на противоположных. Максимальная оценка составляет 40, причем более высокие оценки указывают на более высокие уровни воспринимаемого напряжения. Согласно инструкциям, оценки в диапазоне 0-13 указывают на низкий уровень напряжения, оценки в диапазоне 14-26 указывают на умеренный уровень напряжения, а оценки в диапазоне 27-40 указывают на высокий уровень воспринимаемого напряжения. В этом исследовании шкала имела альфа -альфа (α) Кронбаха 0,85. Оценки по шкале сравнивались между начальными и окончательными оценками.

Краткое COPE-это сокращенная версия 28-элементного вопросника COPE Inventory By Carver et al. и использовался для оценки стратегий ситуационного преодоления (способы, которыми люди справляются с конкретным стрессовым событием) и стратегии диспозиционного преодоления (обычно, как люди справляются со стрессом в повседневной жизни). В своей первоначальной версии этот инвентарь выявил адекватные уровни внутренней согласованности, в дополнение к тому, чтобы показать доказательства его факторной структуры. Мы использовали Mini-Cope, укороченную польсную версию вопросника Cope Inventory. Шкала измеряет 14 теоретически или эмпирически обоснованные стратегии преодоления (каждая из них с двумя элементами): саморафукция, активное преодоление, отрицание, использование веществ, эмоциональная поддержка, инструментальная поддержка, разъединение поведения, вентиляция, положительная оттенка, планирование, умирают, принимают, и самостоятельно, и самостоятельно, и самарея, и самарея, и самарея, и самостоятельно, и самостоятельно, и самостоятельно, и самостоятельно, и самостоятельно, и самостоятельно, и самажнится. Для каждого элемента респонденты указывают, используют ли они ответ преодоления в четырехбалльной шкале Лайкерта (0 = я обычно не делаю этого почти вообще; 1 = я обычно делаю это редко; 2 = я обычно делаю это часто; 3 = я обычно делаю это почти всегда).

Эти подшкалы были более классифицированы на модель факторной модели второго порядка, которая состояла из «адаптивных стратегий выживания» (использование эмоциональной поддержки, позитивного рефрминга, принятия, религии, юмора, активного преодоления, планирования и использования инструментальной поддержки) и «стратегии дезадаптивного преодоления» (вентиляция, отрицание, использование сущности, поведенческое расстройство, самодиаптирование и самообладание). Альфа Кронбаха для оригинальных подшкал варьировалась от 0,66 до 0,70. Общий балл каждой стратегии преодоления - это сумма результатов двух пунктов.

Ощущение шкалы когерентности SOC-13 представляет собой шкалу из 13 пунктов, адаптированная из более длинной шкалы 29 пунктов, разработанной Антоновским. Эта шкала представляет собой анкету для самоотчета и состоит из трех подшкал: значимость (четыре пункта), понимание (пять пунктов) и управляемость (четыре пункта). Каждый элемент содержит ответы, которые изменяются между вопросами и оценены с 1 до 7 по шкале Лайкерта. Пять переменных (пункты 1, 2, 3, 7 и 10) негативно сформулированы и, следовательно, имеют обратную кодировку, когда элементы суммируются для получения общего элемента. SOC был рассчитан как среднее для каждого человека, который ответил не менее 10 из 13 пунктов (диапазон 1,0-7,0) Более высокий балл представляет собой более высокое чувство согласованности. Исследования психометрических свойств шкалы SOC-13 показали высокие уровни достоверности и надежности, а внутренняя согласованность очень хорошая, с альфа Кронбаха в диапазоне от 0,70 до 0,92 в 127 исследованиях с использованием SOC-13. В текущем исследовании оценки надежности для этой шкалы варьируются от α = 0,77-0,79.

Анкета общего здравоохранения GHQ-28 была разработана Голдбергом в 1978 году. За последние несколько недель это мера эмоционального стресса, которая содержит 28 пунктов и может использоваться в качестве инструмента скрининга сообщества и для обнаружения неспецифических психических расстройств среди людей в условиях первичной медицинской помощи. Участники спрашивали о симптомах и/или дискомфорте, который они недавно испытали. Каждый элемент оценивается по 4-балльной шкале Лайкерта, чтобы указать тяжесть симптомов от 0 до 3 (0 = совсем не, 1 = не более обычного, 2 = чуть больше, чем обычно, 3 = больше, чем обычно). Оценки для семи положительно идентифицированных пунктов (пункты 4, 5, 7, 8) обращаются вспять (1 = больше, чем обычно, 2 = как обычно, 3 = меньше обычного, 4 = гораздо меньше, чем обычно). Элементы суммируются в четырех подшкалах: соматические симптомы (пункты 1-7), тревога/бессонница (пункты 8-14), социальная дисфункция (пункты 15-21) и основная депрессия (пункты 22-28). Высокая оценка GHQ-28 указывает на вероятный психиатрический случай. Нормативные данные для общей оценки популяции указывают на точку отсечения ≥ 5. Надежность была рассчитана с использованием коэффициента Альфа Кронбаха и составила 0,89-0,90.

Социально -экономический статус и стрессовые события. Авторы сформулировали дополнительную анкету, включая социально -экономический статус (SES) (возраст, место проживания, семейное состояние, уровень образования) и вопросы о любых стрессовых событиях (SES), испытываемых в течение предыдущего месяца.

Статистический анализ Непрерывные переменные представлены в виде среднего и стандартного отклонения и переменных от масштабирования в качестве медиан и межквартильных диапазонов (от 25% до 75%). Категориальные переменные представлены в виде частот. Различия между категориальными переменными анализируются с помощью точного теста Фишера. Все непрерывные переменные тестируются на нормальное распределение с использованием теста Шапиро-Уилка, а также куртоз, асимметрию и графическую оценку распределения каждой переменной. Процедуры преобразования данных (например, преобразование Box-Cox) рассматриваются, если они приводят к нормальному распределению всех преобразованных переменных. Сравнения между базовыми и постфлеменционными точками времени (посещения T1 и T2) в группах LH+BL или PLA определяются с использованием t-критерия для зависимых переменных и величины эффекта, выраженного как d Cohen D. Сравнения между группами в изменениях предварительной опоры в переменных определяются с использованием t-теста для независимых переменных. Если нормальность нарушается, данные анализируются с использованием теста Wilcoxon, подписанного на ранга с величиной эффекта, выраженного в качестве коэффициента корреляции ранга (RC). U-тест Манна-Уитни используется для сравнения переменных для проверки различий между группами плацебо и пребиотиками. Альфа <0,05 считается статистически значимой. Данные анализируются с использованием программного обеспечения Statistica 13.3 (Statsoft Inc., США).