A peritoneális dialízises peritonitis jobb diagnosztikája kalorimetriával

Háttér:

A hashártyagyulladást továbbra is a peritoneális dialízis (PD) legfontosabb szövődményeként tartják számon, amely magas mortalitással, terápiás sikertelenséggel és egészségügyi kiadásokkal jár. A közelmúltban kimutattuk, hogy a peritonitis a PD technikai meghibásodásának leggyakoribb oka, amely egyformán hozzájárul a korai és késői meghibásodásokhoz; 279 beteg közül 12 halt meg PD-vel összefüggő peritonitis következtében. A hashártyagyulladás diagnózisa jellemzően klinikai tüneteken alapul, ami a gyulladás és a betegség már előrehaladott állapotát tükrözi. A PD effluensben a baktériumok szaporodásának kimutatására szolgáló vérkultúra rendszer több mint tíz évvel ezelőtti bevezetése óta nem történt jelentős előrelépés a PD-vel összefüggő hashártyagyulladás diagnosztizálásának javításában. Saját PD populációnkban 219 fertőző peritonitis epizódból 36 (16%) volt tenyészet-negatív. Általában a mikroorganizmusok kimutatási ideje legalább 12 óra, a kórokozó azonosítása pedig több mint 48 óra. A gyorsan osztódó sejtek, például a baktériumok hőt termelnek, ami kalorimetriával mérhető. Amint azt kutatócsoportunk nemrég kimutatta, a kalorimetria lehetővé teszi a baktériumok szaporodásának gyors és pontos diagnosztizálását agyhártyagyulladás és szennyezett vérlemezkék esetén. Kísérleti kísérletekben meg tudtuk mutatni a kalorimetria lehetőségét és megvalósíthatóságát a mikroorganizmusok korai és pontos kimutatására PD folyadékban.

Hipotézis és célok:

Feltételezzük, hogy a PD effluens kalorimetriája jelentősen javíthatja a PD-vel összefüggő peritonitis diagnózisát a kórokozók korai és pontos kimutatásával. A hagyományos tenyésztési módszerekkel összehasonlítva a kalorimetria (i) rövidebb ideig tart a pozitivitásig és (ii) nagyobb érzékenység a specificitás elvesztése nélkül. A konkrét cél annak értékelése, hogy a kalorimetria: (i) gyorsabb-e a mikroorganizmusok kimutatásában a hagyományos vértenyészetekhez képest, (ii) jobb-e az érzékenység és a specificitás tekintetében a PD-vel összefüggő hashártyagyulladás kimutatása a standard vértenyésztő rendszerhez képest, és iii) értékes eszköz a kórokozók azonosítására a kalorimetriával kapott specifikus hőjelek "aláírásaival". Az elsődleges végpont a bakteriális növekedés pozitivitásáig eltelt idő kalorimetriával és hagyományos vértenyészetekkel. A másodlagos végpontok a pontosság (pl. szenzitivitása és specificitása) a mikroorganizmusok kimutatási aránya a PD folyadékban, valamint a kórokozó azonosításának konzisztenciája a kalorimetriás görbék és a hagyományos mikrobiológiai módszer között.

Kutatási terv:

A tájékozott beleegyezés megszerzése után ebbe a nyílt elrendezésű összehasonlító vizsgálatba távlatosan bevonjuk az összes olyan 16 éves vagy annál idősebb beteget, aki 2009 januárja és 2011 decembere között PD-t végez az Egyetemi Kórházban. A PD folyadékot hagyományos szűrővizsgálatra (sejtszám és differenciálvizsgálat) és kalorimetriára (steril MonovetteR cső) vetik alá a rutin látogatás során. Ha PD hashártyagyulladás gyanúja merül fel, a PD folyadékot aerob és anaerob tenyésztő palackokba is beoltják az ágy mellett, steril körülmények között, minden palackban 10 ml PD folyadékot. Kalorimetriához 1 ml PD folyadékot tenyésztünk 37 °C-on a kaloriméteres csövekben, amelyek 2 ml triptikáz szójalevest (TSB) tartalmaznak. A hagyományos tenyésztési palackokat és kaloriméteres csöveket összesen 6 napig inkubáljuk, majd a tenyésztést és/vagy a kalorimetriát negatívnak tekintjük. Az orvosi feljegyzéseket a demográfiai jellemzők, a klinikai, a radiográfiai, a laboratóriumi és a mikrobiológiai adatok tekintetében előretekintően kivonják egy szabványos esetjelentési űrlap segítségével. A mintaméret-számítást az elsődleges és a másodlagos végpontokra külön-külön végeztük el a következő beállításokkal: 0,05, teljesítmény 80%, kétoldalas teszt. Az elsődleges végpont statisztikailag szignifikáns különbségeinek eléréséhez 286 mintára van szükség a vizsgálathoz. A másodlagos végponthoz, ahol p0 = 80% (hagyományos vértenyészetek érzékenysége), p1 = 95% (kalorimetriás tenyészetek érzékenysége), 255 minta szükséges. A várhatóan 5%-os lemorzsolódás mellett körülbelül 300 mintára lesz szükség. A várhatóan 120-180 minta/év vizsgálati időtartamra körülbelül 2,5-3 évre van szükség.

Várható eredmény:

Arra számítunk, hogy a kalorimetria jelentősen javítja a PD-vel összefüggő hashártyagyulladás diagnózisát. Először is (elsődleges végpont) egy korábbi kórokozó kimutatást jósolunk kalorimetriával; második (másodlagos végpont), várhatóan 15%-kal növeljük az érzékenységet a specificitás elvesztése nélkül (>90%). Továbbá feltételezzük, hogy a PD populációnkban észlelt legfontosabb kórokozók (azaz S. aureus, koaguláz-negatív staphylococcusok, streptococcusok, enterobacteriaceae) 12 órán belül (a hagyományos mikrobiológiai módszerekkel > 48 órán belül) pontosan azonosíthatók. 80%-ról. Az ultra-szenzitív kalorimetriás technika nagy pontossággal diagnosztizálhatja a PD-vel összefüggő hashártyagyulladást a betegség korai stádiumában. Ez egy gyors és célzott antibiotikum terápia alapja lenne, amely jelentősen befolyásolhatja ezen betegek kimenetelét.