Diagnosi migliorata della peritonite da dialisi peritoneale mediante calorimetria

Sfondo:

La peritonite è ancora considerata la complicanza più importante della dialisi peritoneale (PD) associata a elevata mortalità, fallimento della terapia e spese sanitarie. Abbiamo recentemente dimostrato che la peritonite continua ad essere la ragione più comune di fallimento tecnico nel PD, contribuendo ugualmente al fallimento precoce e tardivo; 12 pazienti su 279 sono deceduti in conseguenza della peritonite associata al morbo di Parkinson. La diagnosi di peritonite si basa tipicamente sui sintomi clinici, che riflettono uno stato già avanzato di infiammazione e malattia. Dall'implementazione del sistema di emocoltura per il rilevamento della crescita batterica negli effluenti di PD più di dieci anni fa, non sono stati compiuti progressi considerevoli per migliorare la diagnosi della peritonite associata a PD. Nella nostra popolazione PD 36 episodi di peritonite infettiva su 219 (16%) erano negativi alla coltura. Di solito, il tempo di rilevamento dei microrganismi richiede almeno 12 ore e il tempo per l'identificazione del patogeno più di 48 ore. Le cellule in rapida divisione come i batteri producono calore, che può essere misurato mediante calorimetria. Come recentemente dimostrato dal nostro gruppo di ricerca, la calorimetria consente una diagnosi rapida e accurata della crescita batterica nei casi di meningite e nelle piastrine contaminate. In esperimenti pilota, abbiamo potuto mostrare il potenziale e la fattibilità della calorimetria per il rilevamento precoce e accurato di microrganismi nel fluido PD.

Ipotesi e obiettivi:

Ipotizziamo che la calorimetria dell'effluente del PD possa migliorare significativamente la diagnosi di peritonite associata al PD mediante la rilevazione precoce e accurata dei patogeni. Rispetto ai metodi di coltura tradizionali, la calorimetria può (i) avere un tempo di positività più breve e (ii) una maggiore sensibilità senza perdita di specificità. Obiettivi specifici sono valutare se la calorimetria: (i) è più rapida nel rilevamento di microrganismi rispetto alle emocolture convenzionali, (ii) è superiore, per quanto riguarda la sensibilità e la specificità, nel rilevamento della peritonite associata a PD rispetto al sistema di emocoltura standard e ( iii) è uno strumento prezioso per l'identificazione dei patogeni mediante "firme" di segnali termici specifici ricevuti dalla calorimetria. L'endpoint primario è il tempo alla positività della crescita batterica mediante calorimetria e emocolture convenzionali. Gli endpoint secondari sono l'accuratezza (ad es. sensibilità e specificità) dei tassi di rilevamento del microrganismo nel fluido PD e il tasso di coerenza dell'identificazione del patogeno tra le curve calorimetriche e il metodo microbiologico convenzionale.

Piano di ricerca:

Dopo aver ottenuto il consenso informato, includeremo in modo prospettico in questo studio comparativo in aperto tutti i pazienti di età pari o superiore a 16 anni, che stanno eseguendo PD presso l'ospedale universitario nel periodo compreso tra gennaio 2009 e dicembre 2011. Il fluido PD sarà sottoposto all'esame di screening convenzionale (conta cellulare e differenziale) e alla calorimetria (provetta Monovette® sterile) durante la visita di routine. Se si sospetta una peritonite PD, il fluido PD verrà anche inoculato in flaconi di coltura aerobica e anaerobica al letto del paziente in condizioni sterili, ogni flacone con 10 ml di fluido PD. Per la calorimetria, 1 ml di fluido PD sarà coltivato a 37°C nelle provette calorimetriche, contenenti 2 ml di brodo di soia tripticasi (TSB). Le bottiglie di coltura convenzionali e le provette calorimetriche vengono incubate per un totale di 6 giorni, dopodiché la coltura e/o la calorimetria sono considerate negative. Le cartelle cliniche saranno estratte in modo prospettico per le caratteristiche demografiche, i dati clinici, radiografici, di laboratorio e microbiologici utilizzando un modulo di case report standardizzato. Il calcolo della dimensione del campione è stato eseguito separatamente per gli endpoint primari e secondari sulle seguenti impostazioni: 0,05, potenza 80%, test su due lati. Per raggiungere differenze statisticamente significative per l'endpoint primario, sono necessari 286 campioni per lo studio. Per l'endpoint secondario con p0 = 80% (sensibilità delle emocolture convenzionali), p1 = 95% (sensibilità delle colture calorimetriche), sono richiesti 255 campioni. Con un tasso di abbandono previsto del 5%, saranno necessari circa 300 campioni. Con 120-180 campioni/anno previsti, è necessaria una durata dello studio di circa 2,5-3 anni.

Risultato previsto:

Prevediamo che la calorimetria migliorerà significativamente la diagnosi di peritonite associata a PD. Primo (endpoint primario), prevediamo un precedente rilevamento del patogeno mediante calorimetria; secondo (endpoint secondario), ci aspettiamo di aumentare la sensibilità del 15% senza perdita di specificità (>90%). Inoltre, assumiamo che i patogeni più importanti, osservati nella nostra popolazione PD (cioè S. aureus, stafilococchi coagulasi-negativi, streptococchi, enterobacteriaceae) possano essere identificati entro 12 ore (rispetto a > 48 ore con metodi microbiologici convenzionali) con un'accuratezza dell'80%. La tecnica della calorimetria ultrasensibile può diagnosticare la peritonite associata a PD in uno stadio precoce della malattia con elevata precisione. Questa sarebbe la base di una terapia antibiotica rapida e mirata, che potrebbe influenzare in modo significativo l'esito di questi pazienti.