Diagnóstico aprimorado de peritonite por diálise peritoneal por calorimetria

Fundo:

A peritonite ainda é considerada a complicação mais importante da diálise peritoneal (DP), associada a alta mortalidade, falha terapêutica e gastos com saúde. Recentemente, demonstramos que a peritonite continua a ser a causa mais comum de falha técnica na DP, contribuindo igualmente para falha precoce e tardia; 12 de 279 pacientes morreram como consequência de peritonite associada à DP. O diagnóstico de peritonite é tipicamente baseado em sintomas clínicos, que refletem um estado já avançado de inflamação e doença. Desde a implementação do sistema de hemocultura para detecção de crescimento bacteriano no efluente da DP há mais de dez anos, nenhum progresso considerável foi feito para melhorar o diagnóstico de peritonite associada à DP. Em nossa própria população de DP, 36 de 219 (16%) episódios de peritonite infecciosa tiveram cultura negativa. Normalmente, o tempo de detecção de microrganismos requer pelo menos 12 horas e o tempo de identificação do patógeno mais de 48 horas. As células que se dividem rapidamente, como as bactérias, produzem calor, que pode ser medido por calorimetria. Como demonstrado recentemente por nosso grupo de pesquisa, a calorimetria permite o diagnóstico rápido e preciso do crescimento bacteriano em casos de meningite e em plaquetas contaminadas. Em experimentos piloto, pudemos mostrar o potencial e a viabilidade da calorimetria para detecção precoce e precisa de microorganismos no fluido de DP.

Hipótese e objetivos:

Nossa hipótese é que a calorimetria do efluente da DP pode melhorar significativamente o diagnóstico de peritonite associada à DP pela detecção precoce e precisa de patógenos. Em comparação com os métodos tradicionais de cultura, a calorimetria pode (i) ter um tempo menor para positividade e (ii) maior sensibilidade sem perda de especificidade. Os objetivos específicos são avaliar se a calorimetria: (i) é mais rápida na detecção de microorganismos em comparação com hemoculturas convencionais, (ii) é superior, em relação à sensibilidade e especificidade, na detecção de peritonite associada à DP em comparação com o sistema de hemocultura padrão e ( iii) é uma ferramenta valiosa para identificação de patógenos por "assinaturas" de sinais de calor específicos recebidos por calorimetria. O endpoint primário é o tempo até a positividade do crescimento bacteriano por calorimetria e hemoculturas convencionais. Os endpoints secundários são a precisão (ou seja, sensibilidade e especificidade) das taxas de detecção de microrganismos no fluido de DP e a taxa de consistência da identificação do patógeno entre as curvas de calorimetria e o método microbiológico convencional.

Plano de pesquisa:

Após obter o consentimento informado, vamos incluir prospectivamente neste estudo comparativo aberto todos os pacientes com 16 anos ou mais, que estão realizando DP no Hospital Universitário no período de janeiro de 2009 a dezembro de 2011. O fluido de DP será submetido a exame de triagem convencional (contagem de células e diferencial) e calorimetria (tubo MonovetteR estéril) durante consulta de rotina. Se houver suspeita de peritonite de DP, o fluido de DP também será inoculado em frascos de cultura aeróbica e anaeróbica à beira do leito em condições estéreis, cada frasco com 10 ml de fluido de DP. Para a calorimetria, 1 ml de fluido PD será cultivado a 37°C nos tubos do calorímetro, contendo 2 ml de caldo de soja tripticase (TSB). Frascos de cultura convencionais e tubos de calorímetro são incubados por um total de 6 dias, após os quais a cultura e/ou calorimetria são consideradas negativas. Prontuários médicos serão prospectivamente abstraídos para características demográficas, dados clínicos, radiográficos, laboratoriais e microbiológicos usando um formulário de relato de caso padronizado. O cálculo do tamanho da amostra foi realizado separadamente para endpoints primários e secundários nas seguintes configurações: 0,05, poder de 80%, teste bilateral. Para alcançar diferenças estatisticamente significativas para o endpoint primário, são necessárias 286 amostras para o estudo. Para o endpoint secundário com p0 = 80% (sensibilidade das hemoculturas convencionais), p1 = 95% (sensibilidade das culturas de calorimetria), são necessárias 255 amostras. Com uma taxa de abandono esperada de 5%, serão necessárias aproximadamente 300 amostras. Com a expectativa de 120-180 amostras/ano, a duração do estudo de aproximadamente 2,5 a 3 anos é necessária.

Resultado esperado:

Prevemos que a calorimetria melhorará significativamente o diagnóstico de peritonite associada à DP. Primeiro (endpoint primário), prevemos uma detecção precoce do patógeno por calorimetria; segundo (endpoint secundário), esperamos aumentar a sensibilidade em 15% sem perda de especificidade (>90%). Além disso, assumimos que os patógenos mais importantes observados em nossa população de DP (ou seja, S. aureus, estafilococos coagulase-negativos, estreptococos, enterobactérias) podem ser identificados em 12 horas (em comparação com > 48 horas por métodos microbiológicos convencionais) com uma precisão de 80%. A técnica de calorimetria ultrassensível pode diagnosticar peritonite associada à DP em um estágio inicial da doença com alta precisão. Esta seria a base de uma antibioticoterapia rápida e direcionada, o que pode influenciar significativamente a evolução desses pacientes.