A GcMAF-fel végzett orális immunterápia hatékonysága és biztonságossága COVID-19 tüdőgyulladásban szenvedő kórházi betegeknél (COral-MAF1)

Az elmúlt öt hónapban egyre több olyan jelentés érkezett, amelyek nem próbálják megérteni a 2019-es koronavírus-betegség (COVID-19) világjárvány patogenezisét. A mai napig a leggyakrabban vizsgált hipotézis a többszervi elégtelenség mögöttes mechanizmusairól három fő célpontban foglalható össze: mikrokeringési diszfunkció, elsöprő gyulladás és abnormális koaguláció. A klinikai, radiológiai és laboratóriumi leletek, valamint az előzetes boncolási vizsgálatok alátámasztani látszanak ezt a hipotézist. Amint azt széles körben javasolják, a szisztémás citokinvihar kulcsszerepet játszhat a vírus által kiváltott szövetkárosodásban. Mivel ezt a kérdést nagyon kevéssé ismerjük, az egyéb humán patogén vírusokból levont tanulságok, különös tekintettel a humán immundeficiencia vírusra (HIV), ronthatnak. Sajnos még egyetlen gyógyszert vagy vakcinát sem hagytak jóvá az emberi koronavírusok kezelésére, és a magára a vírusra közvetlenül ható gyógyszereken alapuló új beavatkozások kifejlesztése valószínűleg hónapokig vagy évekig tart. A COVID-19 farmakológiai megközelítésének fő céljai, különösen a bonyolult esetek esetében, az immunrendszer modulálása és az elsöprő gyulladás ellensúlyozása. Nevezetesen, a vizsgálók által a SARS-CoV-2 által kiváltott sejt- és szövetkárosodás lehetséges patogenezisével kapcsolatban feltételezett mechanizmusok közös nevezőt jelentenek a klinikai vizsgálatokban jelenleg használt legtöbb gyógyszer hatásának magyarázatában: ezek közé tartoznak a vírusellenes szerek, immunmoduláló és/vagy gyulladáscsökkentő gyógyszerek. Vírusellenes hatásuk alapján a klorokint és a hidroxiklorokint, amelyeket eredetileg maláriaellenes terápiának szántak, a COVID-19-ben szenvedő kórházi betegek kezelésére javasolták, azitromicinnel vagy anélkül, amelyek ígéretes hatékonyságot mutatnak a „tüdőgyulladás súlyosbodásának gátlásában, és javítják a tüdő képalkotó eredményeit , elősegítve a vírus negatív átalakulását és lerövidítve a betegség lefolyását." Másrészt a hidroxiklorokin a lupusz orvosi terápia sarokköve, ahol immunmodulátorként működik, immunszuppresszív hatás nélkül. Mivel azonban nem állnak rendelkezésre bizonyítékok ezeknek a gyógyszereknek a hatékonyságára és biztonságosságára vonatkozóan, az Olasz Gyógyszerügynökség július 17-én közölte, hogy visszavonta a malária gyógyszerének, a hidroxiklorokinnak vagy a vírusellenes szereknek a Covid-19 kezelésére való alkalmazására vonatkozó sürgősségi engedélyt a klinikai vizsgálatokon kívül. . Mindeközben a kis molekulatömegű heparin COVID-19-hez való alkalmazása csak a jól kiválasztott kórházi betegekre korlátozódik. A tocilizumab, az IL-6 antagonista, amelyet a rheumatoid arthritis és a juvenilis idiopátiás ízületi gyulladás kezelésére hagytak jóvá, kezdetben terápiás alkalmazást is alkalmaztak kritikus COVID-19 betegeknél, ami biztató eredményeket nyújtott. Azonban a III. fázisú klinikai vizsgálat (COVACTA) a tocilizumab súlyos COVID-19 tüdőgyulladásban szenvedő kórházi betegeknél történő értékelésére nem talált különbséget a tocilizumab és a placebo között az intenzív terápiás szükségletek és a mortalitás tekintetében. Úgy tűnik, hogy a monoklonális antitestek SARS-CoV-2 által érintett betegeknél történő alkalmazásának oka az úgynevezett szisztémás citokinviharban rejlik. Figyelembe véve a VEGF kulcsfontosságú szerepét az angiogenezis fokozásában akut tüdősérülés és ARDS esetén, két olyan vizsgálat is indult, amelyek a bevacizumab, mint VEGF antagonista hatásosságát értékelték a COVID-19 kezelésében (BEST-PC és BEST-RCT). Az ödémával és hialinhártya képződéssel járó tüdőgyulladás kóros leleteinek fényében a gyulladás, a mikrokeringési zavarok, az oxidatív stressz, a neoangiogenezis és a mikrotrombotikus elzáródás csökkentését célzó, ismert biztonsági profilú gyógyszerek időben történő és megfelelő alkalmazása, célzottan, lélegeztetőgép támogatásával Súlyos betegeknél figyelembe kell venni az ARDS kialakulásának megelőzését és kezelését. Ma már jól ismert, hogy a GcMAF döntő szerepet játszik az immunrendszer szabályozásában, mint elsődleges védekezés a fertőzések ellen. A fent említett eredmények, valamint a SARS-CoV-2 és a HIV közötti dokumentált analógiák alapján a kutatók azt feltételezték, hogy a Gc fehérje csökkent konverziós aktivitása makrofágokat aktiváló faktorrá (MAF) kulcsszerepet játszhat a kórokozó által kiváltott szabályozatlan immunválaszban. SARS-CoV-2, csakúgy, mint a HIV-fertőzött betegek esetében. Ha ez a hipotézis igaz, segíthet egy érvényes immunterápiás stratégia felállításában, amely szintén a GcMAF jelzésen kívüli alkalmazásán alapul kritikus állapotú COVID-19 betegeknél. A szérum Gc fehérje, más néven D-vitamin-kötő fehérje (DBP), egy többfunkciós fehérje, amely 300-600 mg/l koncentrációban van jelen a plazmában/szérumban. A stimulált B-limfociták indukálható membrános β-galaktozidáza és a T-limfociták Neu-1-szialidáza által a Gc-fehérje lépcsőzetes hidrolízise aktív GcMAF-vé alakítja. Ezzel szemben a Gc-fehérje deglikozilációja az alfa enzim hatására A HIV-fertőzött sejtekből szekretált -N-acetil-galaktózaminidáz, a nagaláz a makrofágok aktivációjának hiányához és ennek következtében immunszuppresszióhoz vezet. Figyelemre méltó, hogy a nagalázról bebizonyosodott, hogy nemcsak a HIV gp120 és gp160 burokglikoproteinjeinek, hanem az influenzavírus hemagglutininjének (HE) is belső komponense, sőt neoplasztikus sejtek is termelik. Valójában az influenza akut állapotához hasonló szérum nagaláz aktivitású influenzaszerű tüneteket jelentettek a HIV-fertőzés korai szakaszában, így a szérum enzimaktivitás a HIV-fertőzés minden fázisában kimutatható. Hasonlóképpen, a legtöbb COVID-19 beteg panaszkodott influenzaszerű tünetekről a betegség korai szakaszában. Az aktív D3-vitamin tárolásán és szállításán kívül a GcMAF hatásai közé tartozik a makrofág moduláció, az oszteoklaszt aktiválás, a C5-eredetű peptid által közvetített neutrofil kemotaxis elősegítése, a szuperoxid aktivitás, a keringő G-aktin megkötése, az angiogenetikus és daganatellenes tulajdonságok. Így ez a többfunkciós fehérje, amely a véráramba kerül, szisztémás immunmodulátorként működik, gyulladást előidéző ​​aktivitás nélkül. Ez azt jelenti, hogy a Gc-globulin működésének bármilyen károsodása immunszuppressziót és kontrollálatlan gyulladást is eredményezhet, akárcsak a súlyos COVID-19 esetében. Érdekes módon a HIV-virémia magasabb szintű gyulladásos biomarkerekkel (IL-6-tal mérve), monocitaaktivációval (oldható CD14) és koagulációval (D-dimer) társult, ami a nem fertőzött emberekhez képest megnövekedett mortalitáshoz vezetett. Eközben a COVID-19 betegekben a csökkent perifériás limfocitaszámon, elsősorban CD4+ T- és CD8+ T-sejteken túl jelentős gyulladást elősegítő citokinek és kemokinek mennyisége is kimutatható volt. Valójában a GcMAF nem csupán egy egyszerű, hatékony aktivátor a makrofágok számára, hanem pontosabban képes aktiválni a makrofágok aktivitását a fertőzés/gyulladás helyén, majd a kaszpázaktivitás fokozásával a p38 és JNK1/2 útvonalakon keresztül apoptózisukat indukálni, ha nem. hosszabb ideig szükséges. A COVID-19-ben elhunyt betegek posztmortem tüdőmegfigyelései mononukleáris sejtek és makrofágok jelenlétét mutatták ki, amelyek a boncolással beszivárogtak a légterekbe. Az antioxidáns tulajdonságok tekintetében megállapították, hogy a GcMAF elősegíti az aktivált makrofágok szuperoxid-termelő képességét és a nitrogén-monoxid (NO) termelődését. Kimutatták, hogy az extracelluláris szuperoxid-diszmutáz (EC-SOD) mRNS és fehérje expressziója sejt- és szövetspecifikus, és kiemelkedő a tüdőben, szívben, erekben, méhlepényben és vesében. Különösen magas az EC-SOD szintje a tüdő makrofágokban, II-es típusú alveoláris sejtekben, fibroblasztokban, vaszkuláris simaizomsejtekben és endoteliális sejtekben. Az EC-SOD korlátozza az oxidatív stresszt és megőrzi az NO bioaktivitását, így védelmet nyújt számos tüdő- és szív- és érrendszeri betegséggel szemben. Annak ellenére, hogy csak az esetek kisebb részében, a COVID-19 életveszélyes szövődményekké fejlődhet, beleértve a légzési elégtelenséget, akut szívsérülést, akut vesekárosodást, szeptikus sokkot, disszeminált intravaszkuláris koagulációt (DIC) és többszervi diszfunkciót. Megállapították, hogy a hipoxémia intersticiális tüdőgyulladással jár, és az esetek 10-20%-ában akut légúti distressz szindrómává (ARDS) fejlődött. Ezzel kapcsolatban dokumentálták, hogy az ARDS-t, valamint a szervi diszfunkciót és a szeptikus sokkot az aktin felszabadulása jellemzi, amely szerepet játszik a mikrovaszkuláris károsodásban. A DBP-nek további funkciója van a monomer globuláris (G)-aktin nagy affinitással történő megkötésében. Ezáltal gyorsan eltávolítja a polimer aktin fibrillákat a véráramból, megakadályozza, hogy az aktin polimerek eltömítsék a mikroereket, ellentétben a fibrinogén/fibrinnel, és ennek következtében a vérlemezke-aggregáció és a mikrotrombusok képződése. A kutatók feltételezései szerint a hiperkoagulabilitás a D-dimer emelkedett koncentrációjával, a fibrin bomlástermékek növekedésével, a PT és aPTT megnyúlásával is magyarázható, amit COVID-19 betegeknél figyeltek meg. Beszámoltak arról, hogy a COVID-19-et nem túlélők 71,4%-a megfelelt a Thrombosis and Haemostasis Nemzetközi Társasága (ISTH) DIC diagnosztikai kritériumainak. A DBP-hiányos egérmodellek az aktin polimerizációja által okozott tüdőkárosodást mutatták, súlyos akut tüdőgyulladást, amely vaszkuláris szivárgással, vérzéssel és az érfal megvastagodásával járt az aktin injekció után. Érdekes módon a tüdő volt az egyetlen szerv, amely gyulladásos sérülést mutatott intravénás aktin injekció után. A megfigyelt tüdőgyulladás összhangban volt a tüdő mikrovaszkuláris endothelsejtek változásaival. Valójában, amikor a tüdő endothel sejtjeit DBP-aktin komplexekkel in vitro tették ki, fokozott sejthalál alakult ki. A DBP csökkent szintjét még a traumás betegek szepszisében és szervi diszfunkciójában is megfigyelték, valamint a szabad DBP teljes kimerülését a szeptikus sokkban szenvedőkben. Ezek az adatok alátámaszthatják a SARS-CoV-2 sejt- és szövetkárosodás patogén magyarázatát, és ezzel egyidejűleg a DBP terápiás alkalmazását az extracelluláris aktin megkötésére és a mikrokeringési változások ellensúlyozására.Míg a DBP a szabad zsírsavakat is megköti, kimutatták, hogy az olajsavval (OA) komplexet képező GcMAF porlasztással vagy szubkután injekcióval történő beadása a vérnyomás gyors csökkenéséhez és a lép véráramlásának növekedéséhez vezetett, a szinergetikus NO eredményeként. Az OA-GcMAF által aktivált alveoláris és lép makrofágok felszabadulnak. Súlyos vagy kritikus állapotú COVID-19 betegeknél a sokk klinikai jellegzetes megnyilvánulásai alakultak ki, még nyilvánvaló hipotenzió hiányában is. Továbbá azt találták, hogy a GcMAF képes gátolni a pro-inflammatorikus prosztaglandin E1 által indukált angiogenezist, amely szerepet játszik a VEGF expressziójának elősegítésében. Megerősítették a VEGF kulcsszerepét az akut tüdőkárosodásban és az ARDS-ben. Figyelembe véve azt a tényt, hogy a klinikai jellemzők és a tünetek súlyossága nagymértékben eltér az egyes COVID-19-betegek között és azokon belül, az idősebb férfiak nagyobb valószínűséggel és súlyosabb módon, a vizsgálók megpróbálták ezt összefüggésbe hozni a DBP néhány speciális jellemzőjével. Számos tanulmány kimutatta, hogy a DBP polimorfizmusai a betegségekre való hajlamhoz vagy rezisztenciához kapcsolódnak, beleértve a krónikus obstruktív tüdőbetegséget. Ezen túlmenően, míg az androgénekről nem találtak semmilyen hatást a keringő DBP szintjére, a magas ösztrogénszintnek való kitettség akár 50%-kal is megnövelte azt, ami arra utal, hogy az ösztrogének potenciális védő szerepe lehet a COVID-19 ellen. Másrészt a D-vitamin státusz tekintetében az idős kort a D-vitamin-hiány egyik fő kockázati tényezőjének ismerték el. Állatokon végzett vizsgálatok azt is kimutatták, hogy az étrendi fehérje- és energiabevitel hiánya csökkentette a DBP koncentrációját a keringésben. Úgy tűnik, hogy ezek az adatok összhangban vannak azzal az egyre növekvő bizonyítékkal, hogy a D-vitamin-pótlás csökkentheti a COVID-19 fertőzések és halálozások kockázatát. A jelen vizsgálat célja az orális MAF-fel végzett immunterápia és a standard gondozási terápia hatékonyságának és biztonságosságának felmérése COVID-19 által kiváltott tüdőgyulladásban szenvedő, kórházban kezelt felnőtt betegeknél.