GcMAF:lla suoritetun oraalisen immunoterapian tehokkuus ja turvallisuus sairaalahoidossa olevilla potilailla, joilla on COVID-19-keuhkokuume (COral-MAF1)

Viimeisen viiden kuukauden aikana on tullut yhä enemmän raportteja, joilla on vaikeuksia ymmärtää koronavirustauti 2019 (COVID-19) -pandemian patogeneesiä. Tähän mennessä yleisimmin tutkittu hypoteesi usean elimen vajaatoiminnan taustalla olevista mekanismeista voidaan tiivistää kolmeen pääkohteeseen: mikroverenkierron toimintahäiriö, ylivoimainen tulehdus ja epänormaali koagulaatio. Kliiniset, radiologiset ja laboratoriolöydökset sekä alustavat ruumiinavaustutkimukset näyttävät tukevan tätä hypoteesia. Kuten laajalti ehdotetaan, systeemisellä sytokiinimyrskyllä ​​voi olla avainrooli viruksen aiheuttamassa kudosvauriossa. Koska asiasta tiedetään hyvin vähän, muista ihmispatogeenisistä viruksista saadut opetukset, erityisesti ihmisen immuunikatovirus (HIV), voivat olla haitallisia. Valitettavasti ihmisen koronavirusten hoitoon ei ole vielä hyväksytty lääkettä tai rokotetta, ja uudet interventiot, jotka perustuvat suoraan virukseen vaikuttaviin lääkkeisiin, vaativat todennäköisesti kuukausia tai vuosia kehittyäkseen. COVID-19:n farmakologisten lähestymistapojen päätavoitteet, erityisesti monimutkaisissa tapauksissa, on suunnattu immuunijärjestelmän moduloimiseen ja ylivoimaisen tulehduksen torjumiseen. Erityisesti mekanismit, joita tutkijat ovat olettaneet SARS-CoV-2:n aiheuttaman solu- ja kudosvaurion mahdollisesta patogeneesistä, näyttävät olevan yhteinen nimittäjä useimpien kliinisissä tutkimuksissa tällä hetkellä käytössä olevien lääkkeiden vaikutuksille: näihin kuuluvat viruslääkkeet, immunomoduloivat ja/tai anti-inflammatoriset lääkkeet. Erityisesti niiden antiviraalisen vaikutuksen perusteella klorokiinia ja hydroksiklorokiinia, jotka alun perin suunniteltiin malarialääkkeiksi, ehdotettiin sairaalahoitoon COVID-19-potilaiden hoitoon atsitromysiinin kanssa tai ilman, mikä osoitti lupaavaa tehoa "keuhkokuumeen pahenemisen estämisessä ja keuhkojen kuvantamislöydösten parantamisessa , edistää viruksen negatiivista konversiota ja lyhentää taudin kulkua." Toisaalta hydroksiklorokiini on lupuksen lääketieteellisen hoidon kulmakivi, jossa se toimii immunomodulaattorina ilman immunosuppressiivisia vaikutuksia. Koska näiden lääkkeiden tehokkuudesta ja turvallisuudesta ei kuitenkaan ollut näyttöä, Italian lääkevirasto ilmoitti 17. heinäkuuta peruuttaneensa malarialääkkeen hydroksiklorokiinin tai viruslääkkeiden käyttöä Covid-19-hoitona kliinisistä tutkimuksista. . Pienen molekyylipainon hepariinin käyttö COVID-19:ssä on rajoitettu vain hyvin valittuihin sairaalapotilaisiin. Tosilitsumabilla, IL-6:n antagonistilla, joka on hyväksytty nivelreuman ja juveniilin idiopaattisen niveltulehduksen hoitoon, oli myös alustava terapeuttinen käyttö kriittisillä COVID-19-potilailla, mikä antoi rohkaisevia tuloksia. Vaiheen III kliinisessä tutkimuksessa (COVACTA) tosilitsumabin arvioimiseksi sairaalahoidossa olevilla potilailla, joilla oli vaikea COVID-19-keuhkokuume, ei kuitenkaan havaittu eroa tosilitsumabin ja lumelääkkeen välillä tehohoidon tarpeissa tai kuolleisuudessa. Peruste monoklonaalisten vasta-aineiden käytölle SARS-CoV-2-potilailla näyttää olevan niin sanotussa systeemisessä sytokiinimyrskyssä. Ottaen huomioon VEGF:n keskeisen roolin angiogeneesin tehostamisessa akuutin keuhkovaurion ja ARDS:n yhteydessä aloitettiin myös kaksi tutkimusta, joissa arvioitiin bevasitsumabin tehoa VEGF-antagonistina COVID-19:n hoidossa (BEST-PC ja BEST-RCT). Kun otetaan huomioon patologiset löydökset keuhkotulehduksesta, johon liittyy turvotusta ja hyaliinikalvon muodostumista, lääkkeiden oikea-aikainen ja asianmukainen käyttö, joiden turvallisuusprofiili on ymmärretty ja joiden tarkoituksena on vähentää tulehdusta, mikroverenkiertohäiriöitä, oksidatiivista stressiä, neoangiogeneesiä ja mikrotromboottista tukkeutumista kohdistetusti yhdessä hengityslaitteen tuen kanssa , tulee harkita vaikeiden potilaiden kohdalla ARDS:n kehittymisen ehkäisemiseksi ja hoitamiseksi. Nyt tiedetään hyvin, että GcMAF:llä on ratkaiseva rooli immuunijärjestelmän säätelyssä ensisijaisena suojana infektioita vastaan. Edellä mainittujen löydösten ja SARS-CoV-2:n ja HIV:n välisten dokumentoitujen analogioiden perusteella tutkijat olettivat, että Gc-proteiinin vähentyneellä konversioaktiivisuudella makrofageja aktivoivaksi tekijäksi (MAF) saattoi olla keskeinen rooli epäsäännöllisen immuunivasteen aiheuttamassa SARS-CoV-2, aivan kuten HIV-tartunnan saaneilla potilailla. Jos tämä hypoteesi pitää paikkansa, se saattaa auttaa määrittämään pätevän immunoterapian strategian, joka perustuu myös GcMAF:n poikkeavaan käyttöön kriittisesti sairailla COVID-19-potilailla. Seerumin Gc-proteiini, joka tunnetaan myös nimellä D-vitamiinia sitova proteiini (DBP), on monitoiminen proteiini, jota on plasmassa/seerumissa pitoisuuksina 300-600 mg/l. Gc-proteiinin vaiheittainen hydrolyysi stimuloitujen B-lymfosyyttien indusoituvan kalvon β-galaktosidaasin ja T-lymfosyyttien Neu-1-sialidaasin vaikutuksesta muuttaa sen aktiiviseksi GcMAF:ksi. Päinvastoin, Gc-proteiinin deglykosiloituminen alfa-entsyymin vaikutuksesta -N-asetyyligalaktosaminidaasi, nimeltään nagalaas, erittyy HIV-infektoituneista soluista, mikä johtaa makrofagien aktivoitumisen puutteeseen ja sen seurauksena immunosuppressioon. On huomionarvoista, että nagalaasin osoitettiin olevan luontainen komponentti ei vain HIV:n vaippaglykoproteiinien gp120 ja gp160 vaan myös influenssaviruksen hemagglutiniinin (HE) ja jopa neoplastisten solujen tuottamana. Itse asiassa flunssan kaltaisia ​​oireita, joissa seerumin nagalaasiaktiivisuus oli samankaltainen kuin influenssan akuutti tila, raportoitiin HIV-infektion varhaisessa vaiheessa, joten seerumin entsyymiaktiivisuus voi olla havaittavissa kaikissa HIV-infektion vaiheissa. Samoin useimmat COVID-19-potilaat valittivat flunssan kaltaisista oireista taudin alkuvaiheessa. Aktiivisen D3-vitamiinin varastoinnin ja kuljetuksen lisäksi GcMAF:n vaikutuksia ovat makrofagien modulaatio, osteoklastien aktivaatio, C5-peräisen peptidin välittämän neutrofiilien kemotaksiksen helpottaminen, superoksidiaktiivisuus, verenkierrossa olevan G-aktiinin poistaminen, antiangiogeneettiset ja kasvainten vastaiset ominaisuudet. Näin ollen tämä monitoiminen proteiini, joka vapautuu verenkiertoon, toimii systeemisenä immuunimodulaattorina ilman tulehdusta edistäviä vaikutuksia. Tämä tarkoittaa, että mikä tahansa Gc-globuliinin toiminnan heikkeneminen voi johtaa sekä immunosuppressioon että hallitsemattomaan tulehdukseen, aivan kuten vakavassa COVID-19:ssä. Mielenkiintoista on, että HIV-viremia yhdistettiin korkeampiin tulehduksen biomarkkereihin (mitattu IL-6:lla), monosyyttien aktivaatioon (liukoinen CD14) ja koagulaatioon (D-dimeeri), mikä johti lisääntyneeseen kuolleisuuteen verrattuna tartunnan saamattomiin ihmisiin. Samaan aikaan COVID-19-potilailla perifeeristen lymfosyyttien, pääasiassa CD4+ T- ja CD8+ T-solujen, vähentyneiden määrän lisäksi havaittiin merkittäviä korkeita proinflammatorisia sytokiinejä ja kemokiineja. Todellakin, GcMAF ei ole vain yksinkertainen tehokas makrofagien aktivaattori, vaan se pystyy erityisesti aktivoimaan makrofagien toiminnan infektio-/tulehduskohdissa ja sitten indusoimaan niiden apoptoosia säätelemällä kaspaasiaktiivisuutta p38- ja JNK1/2-reittien kautta, kun sitä ei ole. pidempään tarvitaan. COVID-19:aan kuolleiden potilaiden kuolemanjälkeiset keuhkohavainnot osoittivat ruumiinavauksessa ilmatiloihin tunkeutuneita mononukleaarisia soluja ja makrofageja. Mitä tulee antioksidanttisiin ominaisuuksiin, arvioitiin, että GcMAF edistää aktivoitujen makrofagien superoksidintuotantokykyä ja typpioksidin (NO) tuotantoa. On osoitettu, että ekstrasellulaarisen superoksididismutaasin (EC-SOD) mRNA:n ja proteiinin ilmentyminen on solu- ja kudosspesifistä ja näkyvää keuhkoissa, sydämessä, verisuonissa, istukassa ja munuaisissa. Erityisesti korkeita EC-SOD-tasoja on keuhkojen makrofageissa, alveolaarisissa tyypin II soluissa, fibroblasteissa, verisuonten sileissä lihassoluissa ja endoteelisoluissa. EC-SOD rajoittaa oksidatiivista stressiä ja säilyttää NO bioaktiivisuuden, mikä suojaa useilta keuhko- ja sydän- ja verisuonisairauksilta. Vaikka vain harvoissa tapauksissa COVID-19 voi edetä hengenvaarallisiin komplikaatioihin, mukaan lukien hengitysvajaus, akuutti sydänvaurio, akuutti munuaisvaurio, septinen sokki, disseminoitunut intravaskulaarinen koagulaatio (DIC) ja usean elimen toimintahäiriö. Hypoksemian havaittiin liittyvän interstitiaaliseen keuhkokuumeeseen, ja 10–20 prosentissa tapauksista se kehittyi akuutiksi hengitysvaikeusoireyhtymäksi (ARDS). Tässä yhteydessä dokumentoitiin, että ARDS:lle sekä elinten toimintahäiriöille ja septiselle sokille on ominaista aktiinin vapautuminen, joka on osallisena mikrovaskulaariseen heikentymiseen. DBP:llä on lisätoiminto monomeerisen globulaarisen (G)-aktiinin sitomisessa suurella affiniteetilla. Siten se poistaa nopeasti polymeeriset aktiinifibrillet verenkierrosta ja estää aktiinipolymeerejä tukkimasta mikrosuonia, toisin kuin fibrinogeeni/fibriini, ja näin ollen verihiutaleiden aggregaatiota ja mikrotrombien muodostumista. Se, mitä tutkijat olettivat, voisi myös selittää hyperkoagulaation kohonneilla D-dimeeripitoisuuksilla, fibriinin hajoamistuotteiden lisääntymisellä, PT:n ja aPTT:n pitenemisellä COVID-19-potilailla. On raportoitu, että 71,4 % COVID-19:stä selviytymättömistä vastasi ISTH:n (International Society on Thrombosis and Heemostasis) DIC:n diagnostisten kriteerien mukaan ilmeistä DIC:tä. Hiirimalleissa, joista puuttui DBP, ilmeni aktiinin polymerisaation aiheuttamia keuhkovaurioita, jotka kehittyivät vakavaksi akuutiksi keuhkotulehdukseksi, johon liittyi verisuonten vuotoa, verenvuotoa ja verisuonen seinämän paksuuntumista aktiinin injektion jälkeen. Mielenkiintoista on, että keuhkot oli ainoa elin, joka osoitti tulehduksellista vauriota suonensisäisen aktiiniinjektion jälkeen. Havaittu keuhkotulehdus oli yhdenmukainen keuhkojen mikrovaskulaaristen endoteelisolujen muutosten kanssa. Todellakin, kun keuhkojen endoteelisolut altistettiin DBP-aktiinikomplekseille in vitro, solukuolema oli lisääntynyt. Alentuneita DBP-tasoja havaittiin jopa traumapotilaiden sepsiksessä ja elinten toimintahäiriöissä sekä vapaan DBP:n täydellinen ehtyminen potilailla, joilla oli septinen shokki. Nämä tiedot voisivat tarjota tukea patogeenisille selityksille SARS-CoV-2:n aiheuttamista solu- ja kudosvaurioista ja samanaikaisesti DBP:n terapeuttisesta käytöstä solunulkoisen aktiinin sitomiseen ja mikroverenkierron muutosten estämiseen.Vaikka DBP sitoo myös vapaita rasvahappoja, osoitettiin, että öljyhapon (OA) kanssa kompleksoidun GcMAF:n antaminen sumutuksella tai ihonalaisella injektiolla johti verenpaineen nopeaan laskuun ja pernan verenkierron lisääntymiseen todenmukaisen synergistisen NO:n seurauksena. vapautuminen OA-GcMAF-aktivoitujen alveolaaristen ja pernan makrofagien kautta. Vaikeille tai kriittisesti sairaille COVID-19-potilaille kehittyi kliinisiä tyypillisiä sokin ilmenemismuotoja, vaikka hypotensiota ei olisi ilmennyt. Lisäksi havaittiin, että GcMAF voi inhiboida tulehdusta edistävän prostaglandiini E1:n indusoimaa angiogeneesiä, joka toimii VEGF:n ilmentymisen edistämisessä. VEGF:n avainrooli akuutissa keuhkovauriossa ja ARDS:ssä vahvistettiin. Koska kliiniset oireet ja oireiden vakavuus vaihtelevat suuresti kunkin COVID-19-potilaan välillä ja sisällä, ja vanhemmat miehet sairastuvat todennäköisemmin ja vakavammin, tutkijat yrittivät yhdistää sen johonkin DBP:n erityispiirteeseen. Useat tutkimukset osoittivat, että DBP:n polymorfismit liittyivät herkkyyteen tai vastustuskykyyn sairaustiloihin, mukaan lukien krooninen obstruktiivinen keuhkosairaus. Lisäksi, vaikka androgeenien ei havaittu vaikuttavan verenkierrossa oleviin DBP-tasoihin, altistuminen korkeille estrogeenitasoille lisäsi niitä jopa 50 %, mikä viittaa estrogeenien mahdolliseen suojaavaan rooliin COVID-19:ää vastaan. Toisaalta D-vitamiinistatuksen suhteen ikääntyminen tunnustettiin yhdeksi tärkeimmistä D-vitamiinin puutteen riskitekijöistä. Eläintutkimukset osoittivat myös, että puutteet sekä ravinnon proteiinin että energian saannissa vähensivät DBP:n pitoisuutta verenkierrossa. Nämä tiedot näyttävät olevan linjassa kasvavan todisteen kanssa siitä, että D-vitamiinilisä voisi vähentää COVID-19-infektioiden ja kuolemien riskiä. Tämän tutkimuksen tavoitteena on arvioida immunoterapian tehoa ja turvallisuutta suun kautta otettavalla MAF:lla sekä tavanomaisella hoitohoidolla sairaalahoidossa olevilla aikuispotilailla, joilla on COVID-19:n aiheuttama keuhkokuume.