Az empagliflozin lehetséges hatékonysága és védő hatása metotrexáttal kezelt rheumatoid arthritises betegeknél

A rheumatoid arthritis (RA) egy autoimmun betegség, amelyben az immunrendszer tévedésből megtámadja a gazdaszervezet rendszereit. Klinikai tüneteit gyakran krónikus ízületi, nem fertőző gyulladásként, porc- és csontpusztulásként jellemzik. Jelenleg nincs hatékony gyógyszer az RA gyógyítására a klinikán. Az RA kezelésére az ajánlott gyógyszerek közé tartoznak a betegségmódosító reumaellenes szerek (DMARD-ok) és a biológiai szerek, amelyek célja a tünetek enyhülése, de ezek a gyógyszerek súlyos mellékhatásokkal is járnak, ha terápiás hatást fejtenek ki. A gyógyszerrezisztencia és a mellékhatások miatt az RA-s betegek nagy része nem reagál hatékonyan a kezelésre, és sürgősen új gyógyszerekre vagy terápiás stratégiákra van szüksége.

Egyre több bizonyíték utal arra, hogy a nukleotid-kötő domén, a leucinban gazdag család, a pirin domént tartalmazó-3 (NLRP3) gyulladás részt vesz az RA patogenezisében. Az anti-citrullinált protein antitestek (ACPA) a citrullinált fehérjék/peptidek elleni autoantitestek csoportja, és az RA biomarkerei. Az ACPA elősegíti az IL-1 termelődését rheumatoid arthritisben az NLRP3 gyulladás aktiválásával. Számos tanulmány kimutatta az NLRP3 mRNS és az NLRP3-asszociált fehérjék fokozódását RA betegek monocitáiban, makrofágjaiban és dendritikus sejtjeiben. Az NLRP3 gén polimorfizmusai közvetetten tükrözik az RA érzékenységét, a betegség súlyosságát és kezelési hatását.

A metotrexát (MTX) egy folsav-antagonista – ismert módon antiproliferatív gyógyszer. Jelenleg az MTX-et gyermekkori akut limfoblasztos leukémia, choriocarcinoma és különféle rosszindulatú daganatok kezelésére használják. Ezenkívül az MTX arany standard reumaellenes szer a rheumatoid arthritis, a pikkelysömör, a szisztémás scleroderma és más autoimmun betegségek kezelésében. A gyulladásos betegségek kezelése során különféle mellékhatások léphetnek fel, az enyhétől a súlyosig terjedő mellékhatások, és akár a kezelés abbahagyásához is vezethetnek.

A krónikus MTX toxicitás szövődményei közé tartozik a vesekárosodás, a hepatotoxicitás, a mucositis, a neurotoxicitás, a hiperglikémia, a hematológiai szövődmények és a mieloszuppresszió. A krónikusan MTX-mérgezett beteg az a beteg, aki régóta fennálló RA-ban vagy pikkelysömörben/pszoriázisos ízületi gyulladásban szenved, ami hirtelen fellépő eróziókkal vagy fekélyekkel jelentkezik a pszoriázisos plakkokban és/vagy hirtelen fellépő súlyos nyálkahártya-fekélyesedés a szájüregben hasmenéssel és másodlagos lázzal vagy anélkül. fertőzésre. A legtöbb krónikus esetben nyálkahártya-fekélyt észleltek.

Az MTX által kiváltott veseműködési zavar alapvető probléma az, hogy az RA-s betegek vesefunkciója már eleve károsodott. Mivel a vesetubulusok az MTX több mint 90%-át választják ki. A MTX toxicitását fokozzák a vesén keresztül történő eliminációt csökkentő gyógyszerek, köztük a szulfonamidok, aminoglikozidok, ciszplatin, penicillinek és kolhicin, valamint olyan gyógyszerek, amelyek kiszorítják a metotrexátot a plazma fehérjekötő helyeiről, beleértve a szulfonamidokat, fenitoint, retinoidokat és barbiturátokat.

Az MTX gasztrointesztinális mellékhatásai az MTX használatának fő dóziskorlátozó kérdése a gyomor-bélrendszeri toxicitás. A betegek számára az MTX által kiváltott bélnyálkahártya-gyulladás komoly megterhelést jelent. Az egész emésztőrendszerre hatással lehet, és gyakran hányinger, gyomorfájdalom és görcsök kísérik. Egy 1989-es kutatás azt találta, hogy az RA-ban szenvedő betegek 20-70%-a számolt be gyomor-bélrendszeri mellékhatásokról a gyógyszeres kezelés első két évében. Ezek a gasztrointesztinális mellékhatások az MTX-terápia leggyakoribb mellékhatásai.

Kiderült, hogy az MTX negatív hatással van a mitokondriális légzési láncra, és ezáltal a reaktív oxigénfajták (ROS) túlzott termelését idézi elő, ami oxidatív stresszhez vezet. A ROS sejtes makromolekulák károsodását idézheti elő és lipidperoxidációt indukálhat, ami sejthalálhoz vezet. Az MTX szignifikáns növekedést mutatott a máj lipid-peroxidációs indikátorában (Malondialdehid) patkányokban. Ezért a ROS képződésének csillapítását és az oxidatív stressz gátlását megfelelő lehetőségként vezették be a szerv MTX által kiváltott toxicitás elleni védelmére.

Az Empagliflozin (Empa) az antihiperglikémiás gyógyszerek egy új osztályába tartozik, amelyet az FDA 2014. augusztus 1-jén hagyott jóvá. A hagyományos hipoglikémiás szerekkel ellentétben az Empa csökkenti a vércukorszintet azáltal, hogy gátolja a nátrium-glükóz kotranszporter-2 (SGLT-2) aktivitását a proximális vesetubulusokban. Az SGLT2 transzporter leginkább a vese proximális tubulusaiban expresszálódik, de megtalálható más szervekben is, mint például a máj, a pajzsmirigy, az izom és a szív. A receptor feladata, hogy a glükózt nátriumionnal párosulva visszaszívja a kiválasztott vizeletből a vérbe.

A glükózszint csökkentése mellett az Empa egyéb pleiotróp és antioxidáns hatással is rendelkezik. Ezek az előnyök a szív- és érrendszer védelméhez vezetnek a súlycsökkenés, a vérnyomás, az artériák rugalmasságának növelése és merevségének csökkentése, a lipidtermelés csökkentése, a szisztémás gyulladás és a gyulladásos biomarkerek felszabadulása, az inzulintermelés fokozása, az inzulinrezisztencia és az artériák csökkentése révén. húgysav szintje. Ezenkívül különböző tanulmányok rávilágítottak arra, hogy az Empa jótékony szerepet tölt be az agyban, a perifériás idegsejtekben, a vesékben, a májban és a gyomor-bélrendszerben.

Az Empa csökkentette a proinflammatorikus citokinek, például az interleukin-1β (IL-1β), IL-6 és IL-8 mennyiségét a doxorubicinnel kezelt egérmodellben azáltal, hogy befolyásolta az NLRP3 és MyD88 rokon útvonalak expresszióját, amelyek szintén szerepet játszanak a rheumatoid arthritis patofiziológiájában.

Számos tanulmány kimutatta az Empa védő hatását az etanol és a magas zsírtartalmú étrend által kiváltott különböző májbetegségekre patkányokban. Ami az Empa lehetséges molekuláris mechanizmusait illeti, az oxidatív stressz csillapítását mutatták be a mögöttes mechanizmusnak. Beszámoltak arról, hogy az Empa védő hatásai összefüggenek azzal a képességével, hogy csökkenti a ROS képződését és a sejtes antioxidáns védekezés indukcióját. Patkányokban az Empa növeli a szuperoxid-diszmutáz (SOD), a kataláz (CAT) és a glutation-peroxidáz (GPX) aktivitását, amelyek az első vonalbeli antioxidáns védelmi rendszer.

Számos tanulmány kimutatta, hogy az alanin-transzamináz (ALT) és az aszpartát-transzamináz (AST) szérumkoncentrációja jelentősen megnő az MTX-kezelésben részesülő betegeknél. Az Empa-kezelés azonban szignifikánsan csökkentette az AST és az ALT szérumkoncentrációjának MTX által kiváltott emelkedését patkányokban. A vizsgálat célja A vizsgálat célja az Empagliflozin lehetséges hatékonyságának és védőhatásának vizsgálata volt metotrexáttal kezelt rheumatoid arthritises betegeknél.

Betegek és módszer

A vizsgálat tervezése és a vizsgálati populáció:

A betegeket a Mansoura Egyetemi Kórház belgyógyászati, reumatológiai és immunológiai osztályának ambuláns klinikájáról veszik fel, Mansoura, Egyiptom. A tanulmányi idő 3 hónap lesz. A vakságot fenntartja a placebo és az Empa tabletta közötti hasonlóság. A betegeket zárt borítékos módszerrel, hozzárendelt kóddal véletlenszerűen két csoportba osztják

Etikai jóváhagyás:

A tanulmány az 1964-es Helsinki nyilatkozat és annak későbbi módosításai etikai normáit követve készül. A tanulmányt a Tanta Egyetem és a Mansoura Egyetem Kutatásetikai Bizottsága hagyja jóvá. A tanulmány klinikai vizsgálatként kerül bejegyzésre a ClinicalTrials.gov oldalon. Minden résztvevő tájékoztatást kap a vizsgálat előnyeiről és kockázatairól. A kutatás során felmerülő váratlan kockázatokat a résztvevővel és az érintett etikai bizottsággal időben tisztázzuk. Minden résztvevő magánéletét tiszteletben tartjuk, és minden adatot bizalmasan kezelünk. Minden betegtől (vagy gondozóiktól, ha a beteg nem tud írni vagy kognitívan károsodott) írásos beleegyezését kell kérni. A vizsgálat 2024-2026 között zajlik majd.

Bevételi kritériumok:

Aktív rheumatoid arthritisben szenvedő (nem remisszióban lévő) betegek a 28 ízületi betegség aktivitási pontszáma szerint (DAS-28) >2,6 (Aletaha et al., 2010).

Korhatár 18 és 60 év között. Mindkét nem. A testtömegindex (BMI), az életkor, a betegség aktivitása és a betegség időtartama megegyezett a betegekkel.

A betegek metotrexátot és más hagyományos DMARD-okat kapnak.

Kizárási feltételek:

Vese- vagy májbetegségben (krónikus májbetegség, májcirrhosis, alkoholos hepatitis vagy krónikus alkoholizmus) szenvedő betegek.

Biológiai DMARD-t kapó betegek az Empa első adagja előtt 4 hétig.

A vizsgált gyógyszerekre túlérzékeny betegek. Az Empa kivételével antioxidánsokat használó betegek. Terhes és szoptató nőstények. Meglévő vérbetegségek, mint például a csontvelő hypoplasia, leukopenia, thrombocytopenia vagy jelentős vérszegénység.

HIV/AIDS-ben, vérképzavarban vagy sugárterápiában szenvedő beteg.

Mód:

A tanulmányban részt vevő valamennyi résztvevő a következőknek lesz alávetve:

Anamnézis, demográfiai és antropometriai adatok gyűjtése Minden résztvevőt alávetnek fizikai és klinikai vizsgálatnak, demográfiai adatgyűjtésnek (életkor, nem és előzmények), valamint súly- és magasságmérést, majd a testtömeg-index kiszámítását a következő képlet szerint: BMI =[súly (kg)÷〖magasság〗^2 (m^2 )].

Vérminta vétel és biológiai kiértékelés A beavatkozás előtt és 3 hónappal azután 10 ml vénás vért veszünk antecubitalis vénapunkcióval minden résztvevőtől egy éjszakai koplalás után (10-12 órás koplalás) reggel 8:30 és 10:30 között. 5 ml vért használunk a következő paraméterek értékeléséhez.

Rutin laboratóriumi vizsgálatok Vörösvérsejt ülepedési sebesség (ESR) C-reaktív fehérje (CRP) Reumatikus faktor (RF) Májfunkciós teszt Vesefunkciós teszt

Ezután a maradék 5 ml vért egy sima kémcsőbe helyezzük, és 3000 fordulat/perc sebességgel centrifugáljuk 10 percig, majd a szérummintákat -80 C-on lefagyasztjuk a biológiai markerek elemzéséig:

NOD-szerű receptor protein 3 (NLRP3) Interleukin-1β (IL-1β) Szuperoxid-diszmutáz (SOD) Klinikai értékelés A beavatkozás előtt és után 3 hónappal a 28 ízületszámú Disease Activity Score (DAS28) számítása C-reaktív fehérje felhasználásával ( CRP (ahol magas betegségaktivitás ≥ 5,1, alacsony betegségaktivitás ≤ 3,2 és remisszió <2,6.

A résztvevők adherenciájának, mellékhatásainak és tolerálhatóságának értékelése Empa és placebo tablettát havi időközönként adunk, a résztvevők adherenciáját pedig a visszaküldött tabletták számlálása és a gyógyszer utántöltési arány alapján értékeljük. A résztvevőket hetente telefonhívások követik, és a tervezett látogatások alkalmával havi közvetlen találkozók követik, hogy értékeljék a betartásukat, és jelentsenek minden gyógyszerrel kapcsolatos mellékhatást. A káros hatásokat a káros hatások ellenőrző listája segítségével gyűjtjük össze. A résztvevőt nem adherensnek tekintették, és kizárták a vizsgálatból, ha a vizsgálati gyógyszerek 90%-ánál kevesebbet fogyasztott, vagy a beavatkozás bármely hónapjában elvesztette a követési találkozókat.

Mintaméret számítás:

Az SPSS program 25-ös verzióját használva (SPSS Inc, Chicago, IL, USA, 2017) 0,05-ös szignifikanciaszint (95%-os konfidenciaintervallum) és 80%-os statisztikai erővel, ami viszont nagy, 0,80-as hatásméretet biztosít a két csoport között mért eredmény különbségének kimutatására független (nem párosított) t-teszttel a teljes mintanagyság mindkét karban 36 beteg lesz (csoportonként 18). Feltételezve, hogy a lemorzsolódási arány 20%, a teljes mintanagyság 44 beteg lesz (csoportonként 22 beteg).

Statisztikai elemzés Az összegyűjtött adatok a Microsoft Office Excel, 2019 (Microsoft Corporation) segítségével kerülnek táblázatba.

A statisztikai elemzés az IBM SPSS Statistics 28-as verziójú szoftverrel (IBM Corp, Armonk, NY, USA) történik.

Minden grafikon a graph Pad Prism 6.01 szoftverrel (Graph pad Software, La Jolla CA, USA) lesz létrehozva.

Az adatok normalitása Shapiro-Wilk teszt vagy Kolmogorov-Smirnov teszt segítségével történik.

A paraméteres adatokat a párosított és párosítatlan t-próbával elemezzük az ugyanazon csoporton belüli átlagok összehasonlítására, illetve a két csoport átlagának összehasonlítására.

A nem-paraméteres adatokat Mann Whitney U-teszttel elemezzük, hogy összehasonlítsuk az átlagokat ugyanazon a csoporton belül, és összehasonlítsuk a csoportok közötti átlagokat.

A kategorikus adatokat Chi-Square teszttel elemezzük. Fisher egzakt tesztjét fogják használni a jelentett káros hatások elemzésére. A változók közötti korrelációt a megfelelő Pearson vagy Spearman korrelációs együttható segítségével értékeljük.

Az adatokat az átlag ± SD, mediánok, tartomány, szám és százalékban kell megadni.

A szignifikanciaszint p≤ 0,05 lesz.