Trapianto di isole utilizzando PKX-001

Sfondo

Il trapianto di isole cliniche è oggi una modalità accettata per il trattamento di pazienti diabetici selezionati con frequenti eventi ipoglicemici e grave responsabilità glicemica. Sebbene i risultati del trapianto di isole siano migliorati in modo significativo nei centri altamente specializzati con un tasso di indipendenza dall'insulina a 5 anni superiore al 50%, una percentuale di pazienti richiede successivamente la reintroduzione dell'insulina. Tac può essere in parte responsabile della durata limitata delle isole e della necessità di più donatori per ciascun ricevente nonostante la sua capacità di prevenire il rigetto e la recidiva autoimmune. Studi in vitro su isole esposte a immunosoppressori hanno dimostrato che livelli di Tac superiori a 10-100 mg/L causano vacuolizzazione e distruzione delle isole in coltura.

Le proteine ​​antigelo (AFP) hanno suscitato notevole interesse per la loro capacità di proteggere le cellule in una varietà di condizioni. Tuttavia, le loro grandi dimensioni ne limitano l'uso in medicina poiché non sono in grado di passare attraverso i capillari nel tessuto interstiziale e non sono in grado di raggiungere le cellule bersaglio.

Tenendo presenti questi svantaggi delle AFP, la dott.ssa Geraldine-Castelot-Deliencourt (Rouen, Francia) ha inventato il glicopeptide antietà, successivamente prodotto da ProtoKinetix Inc. (St. Marys, West Virginia, Stati Uniti). Il glicopeptide anti-invecchiamento di ProtoKinetix, PKX-001, è una piccola replica sintetica stabile dell'AFP più grande e meno stabile.

PKX-001 ha superato una serie di test in vari laboratori esterni in Europa e Nord America. Questi test hanno dimostrato la sua capacità di proteggere una moltitudine di linee cellulari (cellule Hela, fibroblasti adulti, fibroblasti neonatali, cellule staminali neuronali umane, cellule staminali neuronali di topo, cellule di isole di topo, piastrine del sangue, cluster di cellule di differenziazione 34+ (CD34+), e cheratinociti) contro ultravioletti A (UVA), ultravioletti C (UVC), perossido di idrogeno, infiammatori (ILβ), tempo, temperatura (-196°C, -80°C, -3°C, 3°C, 4°C , 15°C e 22°C) e bassa morte cellulare indotta da siero a pH compresi tra 5,3 e 10,5. Oltre a proteggere la sopravvivenza cellulare, PKX-001 preserva anche la funzionalità cellulare. Ciò è stato testato tramite marcatori di cellule staminali, test di funzionalità CD34+ e studi in vivo in cui è stato riscontrato che cellule di isole trapiantate trattate con PKX-001 riducono le concentrazioni di glucosio nel sangue nei topi diabetici del 40% entro il giorno 40 rispetto alle cellule di isole che sono state trapiantate in topi senza essere stati prima esposti a PKX-001.

Alla luce dei ruoli benefici di PKX-001 sulla sopravvivenza cellulare e sulla conservazione della funzionalità, il nostro team ha valutato la capacità citoprotettiva di PKX-001 nel trapianto di isole, in particolare la sua capacità di protezione contro l'effetto diabetogeno di Tac.

La valutazione in vitro delle isole umane in coltura con l'integrazione con PKX-001 ha anche mostrato una migliore qualità e resa delle isole umane post-conservazione e protezione contro l'esposizione acuta a Tac a dosi clinicamente rilevanti rispetto a quelle senza integrazione con PKX-001. Ulteriori analisi hanno indicato che le isole trattate con PKX-001 avevano ridotto lo stress ossidativo, migliorato il rilascio di insulina aumentando l'esocitosi delle isole, diminuita la perdita di isole durante la conservazione a causa dell'apoptosi, anche in presenza di Tac.

Gli studi in vivo hanno integrato tutti i risultati in vitro di cui sopra, che hanno dimostrato che l'integrazione con PKX-001 ha soppresso l'infiammazione precoce e migliorato l'attecchimento delle isole con efficacia a lungo termine.

Lo studio proposto è uno studio prospettico di fase I, non randomizzato, in aperto, a braccio singolo, che utilizza controlli retrospettivi.

Verranno arruolati in questa indagine dieci candidati adulti al trapianto di isole (dai 18 anni in su), ritenuti idonei per il trapianto di isole standard presso l'ospedale dell'Università dell'Alberta.

Saranno inoltre raccolti dati retrospettivi di 10 pazienti sottoposti a trapianto di isole pancreatiche che hanno acconsentito alla revisione della cartella clinica (Protocollo n.: 000001120 intitolato: "Revisione in corso dei pazienti con trapianto di isole presso l'Università di Alberta" e Protocollo n.: 000001122 intitolato: "Collaborative Islet Transplant Registry") raccolto.

Lo standard dei controlli di cura sarà identificato dal database del programma Islet Transplant (periodo: 2014 - 2016) e reso anonimo da un semplice sistema di numerazione.

Ipotesi:

Il trapianto di isole trattate con PKX-001 è sicuro e migliora i risultati dell'innesto.

Obiettivo primario:

Dimostrare la sicurezza del trapianto di isole trattate con PKX-001.

Obiettivi secondari:

Per valutare l'efficacia del trapianto di isole trattate con PKX-001 Per valutare l'efficacia dell'aggiunta di PKX-001 durante la conservazione delle isole

Procedure:

Prima del trapianto, il paziente viene sottoposto a screening, qualificato, elencato per il trapianto e firma il modulo di consenso informato.

Nel momento in cui sarà disponibile un'adeguata preparazione delle isole, il paziente riceverà cellule di isole allogeniche trapiantate nei pazienti per via intraportale mediante accesso transepatico percutaneo.

Il trapianto di isole verrà eseguito secondo l'attuale regime di immunosoppressione che include: induzione (Alemtuzumab/Basiliximab) e immunosoppressione a lungo termine (Prograf/Cellcept). Il regime di attecchimento comprende farmaci antinfiammatori (Etanercept/Anakinra) e insulina ed eparina per via endovenosa. L'unico intervento aggiuntivo utilizzato in questo studio pilota è l'aggiunta dell'agente sperimentale PKX-001 all'elaborazione delle isole.

Seguito:

I partecipanti saranno sottoposti a un periodo di follow-up di 3 mesi dopo il loro trapianto di isole iniziale o successivo.

Non sono richieste visite di follow-up specifiche per questo studio. I soggetti dello studio saranno seguiti secondo lo standard di cura. Al fine di valutare gli endpoint primari e secondari, le seguenti misurazioni raccolte sui soggetti dello studio nei punti temporali indicati come da standard di cura, saranno riviste e registrate fino al giorno 30 post-trapianto:

Valutazione clinica da parte di un borsista o del personale del trapianto; Analisi del sangue post-trapianto (come da standard di cura); Test metabolici: Garantire (o Arginina); Record di glucosio per l'auto-monitoraggio. Incidenza della non funzione primaria (vedere il glossario per la definizione); L'incidenza di eventi avversi o di eventi avversi gravi può essere segnalata in qualsiasi giorno dopo il trapianto; Ecografia addominale con rapporto Doppler (rilievi clinicamente significativi). Lo studio rimarrà aperto per raccogliere i dati di follow-up di tutti i 10 riceventi fino a 3 mesi dopo il trapianto. La segnalazione degli esiti primari e secondari avverrà 90 giorni dopo il trapianto dell'ultimo paziente alla sperimentazione.