Aspetti clinici e microbiologici dei probiotici nella terapia parodontale non chirurgica: uno studio randomizzato e controllato.

La diagnosi di parodontite passa attraverso la registrazione dei valori al sondaggio parodontale su 6 siti per ciascun elemento parodontale, la registrazione di indici clinici come la percentuale di siti sanguinanti e quelli con placca, infine attraverso l'esecuzione di una radiografia completa composta da pellicole intraorali che garantiscono la stadiazione attraverso il calcolo della perdita di attacco clinico, corrispondente alla perdita di osso alveolare causata dalla malattia. La terapia della parodontite si compone di diverse fasi e inizia con il controllo del biofilm. Questo controllo viene effettuato con sedute di igiene sopragengivale professionale seguite da strumentazione sottogengivale delle tasche parodontali al fine di rimuovere i depositi duri e molli al di sotto del margine gengivale, che altrimenti non verrebbero eliminati con la sola strategia sopragengivale. La risposta alla terapia meccanica e il rischio di recidive vanno di pari passo con la risposta del paziente, con la sua capacità di mantenere un buon livello di igiene orale a casa e di rispettare gli appuntamenti di ritorno. In questo senso la ricerca odontoiatrica si è impegnata molto per sviluppare ulteriori ausili alla terapia meccanica per cercare di migliorarne le prestazioni. Nell’ultimo decennio in particolare, l’utilizzo dei probiotici ha trovato un campo sempre più ampio in parodontologia, poiché si basano sull’idea di incrementare i rapporti di eubiosi della flora non patogena in modo da rendere l’ambiente sfavorevole alla proliferazione di un flora patogena.

Il presente studio si propone di valutare se la somministrazione orale trimestrale di probiotici a base di Lactobacillus plantarum LP14 e Lactobacillus rhamnosus LR04 possa migliorare la risposta alla terapia parodontale non chirurgica della strumentazione sottogengivale in pazienti affetti da parodontite di stadio II-III e complessità di grado A-B.

Obiettivo primario Valutare l'effetto adiuvante dei probiotici a base di Lactobacillus plantarum LP14 e Lactobacillus rhamnosus LR04 nella terapia parodontale non chirurgica.

Obiettivo secondario Caratterizzare il quadro microbiologico dei pazienti affetti da parodontite con e senza l'ausilio di probiotici.

MATERIALI E METODI Tre gruppi di volontari di entrambi i sessi saranno arruolati per lo studio senza limiti di età.

Criteri di inclusione Pazienti in assenza di altre patologie sistemiche riportate in anamnesi, fumatori e non fumatori, non bevitori, in assenza di precedente o attuale somministrazione di altre fonti di probiotici, in grado di fornire il consenso informato.

Criteri di esclusione Soggetti con storia di malattie sistemiche (diabete, malattie autoimmuni, malattie infiammatorie intestinali, malattie neurodegenerative), bevitori, che assumono o hanno assunto probiotici negli ultimi 3 mesi, non in grado di fornire il consenso informato.

Dimensione minima del campione Calcolo della dimensione del campione (Alfa = 0,05; Potenza = 95%) per 3 gruppi di studio indipendenti e un endpoint primario continuo. Dimensione del campione = Z2 (1-alfa/2) p (1-p) / d2 Dove Z(1-alfa/2) è la variabile standard corrispondente a 1,96 con un errore di tipo 1 del 5%, p è la proporzione attesa nella popolazione espresso in decimali sulla base di studi precedenti e d è il livello di confidenza deciso dal ricercatore espresso in decimali. Per quanto riguarda l'esito primario del sanguinamento al sondaggio (BOP), si è ipotizzato che la differenza attesa tra le medie fosse del 20%, pertanto sono necessari 20 pazienti per gruppo, per un totale di 60 pazienti. A questi pazienti bisogna aggiungere la percentuale di abbandono del 10%, per cui il totale è di 70 pazienti.

T0 - BASELINE La prima visita odontoiatrica e il piano di trattamento saranno effettuati dal Prof. Marco Dolci. La visita parodontale con la registrazione degli indici e la full-rx sarà effettuata dal Prof. Marco Dolci.

Indici clinici

• Sanguinamento al sondaggio - BOP, valore percentuale su 6 siti per ciascun dente
• Profondità di sondaggio delle tasche - PPD su 6 siti per ciascun dente
• Perdita di attacco clinico - CAL su radiografie intraorali di siti patologici
• Indice di placca - PI, valutato da 0 a 4 per ciascun sito
• Percentuale di sedi patologiche sul totale delle sedi. La registrazione di BOP, PPD, PI verrà effettuata mediante sondaggio parodontale utilizzando la sonda parodontale PCP-15 UNC (HuFriedi) in maniera del tutto atraumatica e non invasiva.

La sessione operativa sarà organizzata come segue:

• Strumentazione sopragengivale con manipolo ablatore piezoelettrico ad ultrasuoni;
• Test microbiologico BPA (Bacterial Periodontal Assessment - Biomolecular Diagnostic, Via Nicola Porpora, 550144 - Firenze) mediante prelievo del liquido crevicolare gengivale con un sottile cono di carta sterile del diametro di 0,3 mm posizionato nella tasca per 60 secondi, in ambiente atraumatico e non traumatico in modo invasivo. Dopo il prelievo, i coni verranno inseriti in un'unica provetta;
• Strumentazione sottogengivale delle tasche parodontali mediante curette di Gracey. Il trattamento è da considerarsi come Trattamento della Bocca Completa (FMT). I campioni verranno trasportati presso il laboratorio situato al terzo piano dell'Edificio A, presi in custodia dal Prof. Marco Dolci e conservati a +4°C fino all'arrivo del corriere dedicato.

La stessa azienda di Diagnostica Biomolecolare si occuperà del ritiro dei campioni tramite corriere biologico dedicato ed effettuerà le analisi PCR presso i propri laboratori.

Al termine delle analisi verrà inviata agli sperimentatori copia di un codice identificativo univoco affinché possano accedere al report.

Posizionamento del paziente nei gruppi di test, controllo positivo e negativo

TEST: igiene orale domiciliare 2/giorno con spazzolino a setole morbide + dentifricio standard al fluoro + probiotico in bustina buccale da consumare una volta al giorno fino al controllo trimestrale.

CONTROLLO POSITIVO: igiene orale domiciliare 2/die con spazzolino a setole morbide + dentifricio standard al fluoro + placebo industriale in bustina buccale da consumare una volta al giorno fino al controllo trimestrale.

CONTROLLO NEGATIVO: igiene orale domiciliare 2/giorno con spazzolino a setole morbide + dentifricio standard al fluoro.

I prodotti (test e placebo) verranno consegnati al paziente al termine della seduta in modo da coprire 3 mesi di somministrazione.

T1 - DOPO 3 MESI DA T0

• Registrazione degli indici parodontali.
• Campioni microbiologici.

Randomizzazione Il trattamento spettante al singolo paziente è conservato in buste numerate sequenzialmente, opache e sigillate (SNOSE Sequentially Numbered, Opaque, Sealed Envelopes). I prodotti utilizzati sia per il test che per i controlli verranno forniti in provette anonime in modo che né il paziente né lo sperimentatore ne siano a conoscenza.

Analisi statistica Un'adeguata analisi statistica sarà eseguita dal gruppo statistico di fiducia.