乳がんにおけるパルボシクリブに対する耐性と免疫反応

研究者らは、ホルモン受容体陽性 (HR+) の転移性乳癌 (BC) 患者からの長期的に対になった腫瘍生検と血清で、バイオマーカーと分子プロファイリング研究を実施することを提案しています。

研究者らは、パルボと内分泌の併用療法に対して耐性を獲得した 40 人の患者から、治療前と進行後の両方で採取した腫瘍生検と血液サンプルを入手する予定です。 すべてのアッセイは、獲得された耐性の原因となる可能性のある違いを特定するために、治療前と治療後のサンプルの両方で並行して実施されます。 サイクリンE1およびE2レベルは、腫瘍生検でIHCによって評価されます。 ニューレグリン-1レベルは、血清に対するELISAアッセイによって評価されます。 腫瘍生検は、全エクソーム配列決定 (WES) および全トランスクリプトーム配列決定 (RNA-Seq) を使用してさらにプロファイリングされます。 一致した血液サンプルは、体細胞変異の検出を容易にするために WES の対象となります。 ペアの腫瘍生検は、TIL マーカーの免疫組織化学 (IHC) 分析を受けて、Palbo による変化を評価します。 最後に、40 組の血漿サンプルの分析に向けて、Palbo 獲得耐性を研究するためのカスタム設計されたパネルを採用する社内の循環腫瘍 DNA (ctDNA) アッセイを適用します。 カスタム ctDNA パネルは、獲得耐性を付与するこの研究から特定された追加の突然変異を含むように拡張されます。

腫瘍内 TIL に対する Palbo 治療の効果をさらに評価するために、研究者らは、20 人の患者から、Palbo 治療の経過中のベースラインと 2 つの時点 (6 週間、12 週間) で、ペアの腫瘍生検と対応する血液サンプルを取得することを計画しています。 そして彼らは、進行後の生検が利用可能かどうかを知る前に、腫瘍生検のためにパルボに反応して安定した疾患（SD）を示す転移性BC患者を選択します. 腫瘍生検は、WES、RNA-Seq、および IHC 分析の対象となります。 さらに、研究者は、フローサイトメトリー (FACS) を使用して一致した血液サンプル中の免疫細胞亜集団の存在量を定量化し、組織免疫に対する Palbo 治療の効果を評価することを計画しています。

治療中のサンプルは、パルボ治療を開始してから 6 週間後と 12 週間後に採取できますが、最初に治療を受けた後期 HR+ 乳癌患者が耐性を獲得するには、平均で約 18 か月かかります。 再発症例の推定 40% のみが、同意の欠如または骨のみの転移などの操作が困難な生検のために生検が成功します。 したがって、研究者は、2018年第2四半期までに約100人の患者から治療前の生検と血液サンプルを保管し、2年間の時間枠内で40の進行後の生検を対応するペアとして収集することを計画しています. FFPE スライドは、ベースラインの 100 例を含むすべての腫瘍生検から作成され、H&E 染色の対象となります。 研究者は、H&E データの機械学習とデジタル イメージング分析を通じて、TIL を検出して定量化します。