喀痰マトリックスメタロプロテイナーゼ (MMP) mRNA およびモンテルカスト
2012年8月22日 更新者：University of East Anglia
喘息患者の喀痰中のマトリックスメタロプロテイナーゼとその阻害剤のmRNAプロファイルに対するモンテルカスト療法の効果
マトリックス メタロプロテイナーゼ (MMPs) は、人間の 24 の亜鉛含有酵素のグループです。
これらの酵素は、もともと細胞外マトリックス (ECM) 基質を切断し、ECM の恒常性において主な役割を果たしていると説明されていましたが、現在では、より幅広い機能を持っていることが明らかになっています。
MMP 活性とそれらの阻害剤 (メタロプロテイナーゼの組織阻害剤、TIMP) の活性との間の不均衡は、気道構造の細胞外マトリックスの合成または分解において重要な役割を果たすと考えられており、喘息および慢性閉塞性の両方で固定気流閉塞を引き起こします。肺疾患（COPD）。
定量的リアルタイム ポリメラーゼ連鎖反応 (RT-PCR) を使用して、研究者は、喘息患者 2 名の MMP-9、MMP-14、および MMP-2 の定常状態 mRNA のレベルが、当社の方法を使用して健常対照者 4 名と比較して異なることを特定しました。 .
しかし、研究者は、RNA の品質を最適化し、MMP とその阻害剤 (TIMP) のファミリー全体にわたってモンテルカストの効果を評価するために、プロセスをさらに改良する必要があります。
調査の概要
詳細な説明
スクリーニングでは、次の測定が行われます。
- インフォームドコンセント
- 臨床検査
- スパイロメトリー
- 誘発喀痰
以下は、治験薬の8週間後に実施されます。
- 臨床検査
- スパイロメトリー
- 誘発喀痰
- 日記カード
スパイロメトリー:
これは、Microlab スパイロメーター (Micro Medical Ltd、Rochester、Kent、UK) を使用して実行されます。 手順は、米国胸部学会の仕様 (13) に従って行われます。
日記カードデータ:
患者は、「咳」、「息切れ」、および「喘鳴」に従って、毎日朝に症状を 4 段階で記録します。0 は症状なし、3 は最大の症状です。 合計症状スコアは 12 点満点で計算されます。患者はまた、朝に毎日ピーク呼気流量を測定し、3 つの測定値の最高値を記録します。 彼らは治験薬を服用したことを記録します。
喀痰誘導と検査:
喀痰は、Pizzichini et al(14) によって記述された方法によって高張食塩水で得られ、濃度を上げていく食塩水 (3、4、および 5%) をそれぞれ 7 分間、マウスピースから吸入します。 吸入の各期間の後、FEV1 は安全のために測定されます。 被験者は、喀痰を無菌容器に移すよう求められます。 白血球の総細胞数は、改良されたノイバウアー血球計算盤で得られます。 細胞生存率は、トリパン ブルー排除法によって決定されます。 400 個の非扁平上皮細胞をライト染色スライドでカウントし、結果を全非扁平上皮カウントのパーセンテージおよび絶対数として表します。 MMP-9、12 TIMP-1、および TGFb の測定は、喀痰上清で行います。
MMP および TIMP の mRNA のプロファイル:
全 RNA は、Trizol 抽出とキアゲン RNeasy スピン カラムの組み合わせを使用して、前述の 12 と同様の方法で、誘発された喀痰プラグの細胞内容物から抽出されます。 以前に開発されたプライマーとプローブを使用した定量的 RT-PCR を使用して、説明されているように MMP と TIMP の mRNA の相対量を決定します。 私たちは、ヒトサンプルの MMP および TIMP 遺伝子ファミリー全体を定期的にプロファイリングする世界で唯一のセンターです。 これにより、疾患プロセスにおけるこれらの酵素と阻害剤の関与について包括的な見解が得られ、潜在的な新しいバイオマーカーにも光が当てられます。 追加の喀痰採取を必要とせずに遺伝子プロファイリングを拡大できる可能性も、研究に価値を追加します。 これには、ECM の分解または炎症に関与する他のプロテイナーゼ ファミリーが含まれる場合があります。
研究の種類
介入
入学 (実際)
15
段階
- フェーズ2
連絡先と場所
このセクションには、調査を実施する担当者の連絡先の詳細と、この調査が実施されている場所に関する情報が記載されています。
研究場所
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Norfolk
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Norwich、Norfolk、イギリス、NR47TJ
- University of East Anglia
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参加基準
研究者は、適格基準と呼ばれる特定の説明に適合する人を探します。これらの基準のいくつかの例は、人の一般的な健康状態または以前の治療です。
適格基準
就学可能な年齢
18年～60年 (大人)
健康ボランティアの受け入れ
いいえ
受講資格のある性別
全て
説明
包含基準:
- 18 歳から 60 歳までの男性または女性。
- 発作性の胸部圧迫感、喘鳴および呼吸困難、咳と定義される喘息と診断されています。
- 少なくとも 10 年間の非喫煙者または元喫煙者で、喫煙歴が 5 パック年未満。
- 10年以上の喘息症状の病歴。
- 必要に応じて短時間作用型気管支拡張薬を服用します。
- 気管支拡張薬投与後の FEV1 50 ～ 100 % 予測
- 過去 12 か月以内の気道口径の可逆性の証拠: サルブタモール 400mcg 吸入後のサルブタモールへの可逆性は 12%、ヒスタミン PC20 < 8mg/ml、最大呼気流量の日内変動は 20%。
- 生理食塩水による誘導後に喀痰を生成することができます。
除外基準:
- 喘息以外の心臓または肺の病気。
- -発熱、鼻/副鼻腔のうっ血、疲労、咳、抗生物質の使用、または試験前4週間以内の黄色/緑色の痰として定義される呼吸器感染症。
- -過去1か月間、吸入または経口コルチコステロイド療法、長時間作用型ベータ2アゴニスト療法またはロイコトリエン修飾療法を受けている。
- -重度または制御されていない併存疾患。
- 妊娠中または授乳中。
- 書面によるインフォームドコンセントを与えることができない
研究計画
このセクションでは、研究がどのように設計され、研究が何を測定しているかなど、研究計画の詳細を提供します。
研究はどのように設計されていますか？
デザインの詳細
- 主な目的：処理
- 割り当て：なし
- 介入モデル：単一グループの割り当て
- マスキング：なし（オープンラベル）
武器と介入
参加者グループ / アーム |
介入・治療 |
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実験的：モンテルカストグループ
モンテルカスト 10 mg (Merck Sharp & Dohme Ltd, Herts, UK) を午前 8 時に 1 日 1 回 8 週間投与する喘息患者を特定しました。
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モンテルカスト 10 mg を 1 日 1 回 8 週間
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この研究は何を測定していますか？
主要な結果の測定
結果測定 |
時間枠 |
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主要評価項目は、ハウスキーピング遺伝子と比較した MMP および TIMP mRNA プロファイルです
時間枠：8週間
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8週間
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二次結果の測定
結果測定 |
時間枠 |
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MMPおよびTIMPのmRNAに対する8週間のモンテルカストによる治療とプラセボによる治療の違い
時間枠：8週間
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8週間
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モンテルカストによる 8 週間の治療とスパイロメトリーのプラセボの違い - FEV1、FVC、FEV1/FVC 比
時間枠：8週間
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8週間
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8週間のモンテルカストによる治療とプラセボによる誘発喀痰の細胞数差の違い
時間枠：8週間
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8週間
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協力者と研究者
ここでは、この調査に関係する人々や組織を見つけることができます。
捜査官
- 主任研究者：Andrew M Wilson, MRCP (UK)、University of East Anglia
出版物と役立つリンク
研究に関する情報を入力する責任者は、自発的にこれらの出版物を提供します。これらは、研究に関連するあらゆるものに関するものである可能性があります。
一般刊行物
- Pizzichini E, Pizzichini MM, Efthimiadis A, Evans S, Morris MM, Squillace D, Gleich GJ, Dolovich J, Hargreave FE. Indices of airway inflammation in induced sputum: reproducibility and validity of cell and fluid-phase measurements. Am J Respir Crit Care Med. 1996 Aug;154(2 Pt 1):308-17. doi: 10.1164/ajrccm.154.2.8756799.
- Cauwe B, Van den Steen PE, Opdenakker G. The biochemical, biological, and pathological kaleidoscope of cell surface substrates processed by matrix metalloproteinases. Crit Rev Biochem Mol Biol. 2007 May-Jun;42(3):113-85. doi: 10.1080/10409230701340019.
- Suzuki R, Miyazaki Y, Takagi K, Torii K, Taniguchi H. Matrix metalloproteinases in the pathogenesis of asthma and COPD: implications for therapy. Treat Respir Med. 2004;3(1):17-27. doi: 10.2165/00151829-200403010-00003.
- Atkinson JJ, Senior RM. Matrix metalloproteinase-9 in lung remodeling. Am J Respir Cell Mol Biol. 2003 Jan;28(1):12-24. doi: 10.1165/rcmb.2002-0166TR.
- Kelly EA, Busse WW, Jarjour NN. Increased matrix metalloproteinase-9 in the airway after allergen challenge. Am J Respir Crit Care Med. 2000 Sep;162(3 Pt 1):1157-61. doi: 10.1164/ajrccm.162.3.9908016.
- Boulay ME, Prince P, Deschesnes F, Chakir J, Boulet LP. Metalloproteinase-9 in induced sputum correlates with the severity of the late allergen-induced asthmatic response. Respiration. 2004 May-Jun;71(3):216-24. doi: 10.1159/000077418.
- Beeh KM, Beier J, Kornmann O, Buhl R. Sputum matrix metalloproteinase-9, tissue inhibitor of metalloprotinease-1, and their molar ratio in patients with chronic obstructive pulmonary disease, idiopathic pulmonary fibrosis and healthy subjects. Respir Med. 2003 Jun;97(6):634-9. doi: 10.1053/rmed.2003.1493.
- Vignola AM, Riccobono L, Mirabella A, Profita M, Chanez P, Bellia V, Mautino G, D'accardi P, Bousquet J, Bonsignore G. Sputum metalloproteinase-9/tissue inhibitor of metalloproteinase-1 ratio correlates with airflow obstruction in asthma and chronic bronchitis. Am J Respir Crit Care Med. 1998 Dec;158(6):1945-50. doi: 10.1164/ajrccm.158.6.9803014.
- Barnes PJ, Hansel TT. Prospects for new drugs for chronic obstructive pulmonary disease. Lancet. 2004 Sep 11-17;364(9438):985-96. doi: 10.1016/S0140-6736(04)17025-6.
- Langlois A, Ferland C, Tremblay GM, Laviolette M. Montelukast regulates eosinophil protease activity through a leukotriene-independent mechanism. J Allergy Clin Immunol. 2006 Jul;118(1):113-9. doi: 10.1016/j.jaci.2006.03.010. Epub 2006 May 19.
- Vignola AM, Riccobono L, Profita M, Foresi A, Di Giorgi R, Guerrera D, Gjomarkaj M, Di Blasi P, Paggiaro PL. Effects of low doses of inhaled fluticasone propionate on inflammation and remodelling in persistent-mild asthma. Allergy. 2005 Dec;60(12):1511-7. doi: 10.1111/j.1398-9995.2005.00827.x.
- Chuang SS, Hung CH, Hua YM, Tien CH, Yang KD, Jong YJ, Hsu SH, Lin CS. Suppression of plasma matrix metalloproteinase-9 following montelukast treatment in childhood asthma. Pediatr Int. 2007 Dec;49(6):918-22. doi: 10.1111/j.1442-200X.2007.02497.x.
- Kevorkian L, Young DA, Darrah C, Donell ST, Shepstone L, Porter S, Brockbank SM, Edwards DR, Parker AE, Clark IM. Expression profiling of metalloproteinases and their inhibitors in cartilage. Arthritis Rheum. 2004 Jan;50(1):131-41. doi: 10.1002/art.11433.
- Standardization of spirometry--1987 update. Statement of the American Thoracic Society. Am Rev Respir Dis. 1987 Nov;136(5):1285-98. doi: 10.1164/ajrccm/136.5.1285. No abstract available.
研究記録日
これらの日付は、ClinicalTrials.gov への研究記録と要約結果の提出の進捗状況を追跡します。研究記録と報告された結果は、国立医学図書館 (NLM) によって審査され、公開 Web サイトに掲載される前に、特定の品質管理基準を満たしていることが確認されます。
主要日程の研究
研究開始
2009年7月1日
一次修了 (実際)
2011年12月1日
研究の完了 (実際)
2011年12月1日
試験登録日
最初に提出
2009年7月24日
QC基準を満たした最初の提出物
2009年7月27日
最初の投稿 (見積もり)
2009年7月28日
学習記録の更新
投稿された最後の更新 (見積もり)
2012年8月23日
QC基準を満たした最後の更新が送信されました
2012年8月22日
最終確認日
2012年8月1日
詳しくは
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