Stutum Matrix Metalloproteinaase (MMP) mRNA ja montelukast
Montelukastiterapian vaikutus matriisin metalloproteinaasien ja niiden estäjien mRNA-profiiliin astmapotilaiden ysköksessä
Tutkimuksen yleiskatsaus
Yksityiskohtainen kuvaus
Seulonnassa tehdään seuraavat mittaukset:
- Tietoinen suostumus
- Kliininen tutkimus
- Spirometria
- Indusoitunut yskös
Seuraavat suoritetaan 8 viikon tutkimuslääkityksen jälkeen:
- Kliininen tutkimus
- Spirometria
- Indusoitunut yskös
- Päiväkirjakortti
Spirometria:
Tämä suoritetaan Microlab-spirometrillä (Micro Medical Ltd, Rochester, Kent, UK). Menettely suoritetaan American Thoracic Societyn eritelmien mukaisesti(13).
Päiväkirjakortin tiedot:
Potilaat kirjaavat oireensa päivittäin aamulla "yskän", "hengityshäiriön" ja "hengityksen vinkumisen" mukaan 4 pisteen asteikolla, jossa 0 = ei oireita ja 3 = oireiden enimmäismäärä. Oireiden kokonaispistemäärä lasketaan 12 pisteestä. Potilaat mittaavat myös uloshengityshuippunsa päivittäin aamulla ja kirjaavat korkeimman kolmesta mittauksesta. He kirjaavat, että he ovat ottaneet tutkimuslääkkeensä.
Ysköksen induktio ja tutkimus:
Ysköstä saadaan hypertonisella suolaliuoksella Pizzichinin et al(14) kuvaamalla menetelmällä hengittäen suukappaleen kautta kasvavia suolaliuospitoisuuksia (3, 4 ja 5 %) kutakin 7 minuutin ajan. Jokaisen sisäänhengitysjakson jälkeen FEV1 mitataan turvallisuussyistä. Koehenkilöitä pyydetään yskimään yskös steriiliin astiaan. Leukosyyttien kokonaissolumäärä saadaan modifioidulla Neubauer-hemosytometrillä. Solujen elinkelpoisuus määritetään trypaanisinisen poissulkemismenetelmällä. Neljäsataa ei-squamous-solua lasketaan Wright-värjätyillä objektilaseilla ja tulokset ilmaistaan prosentteina ja absoluuttisina lukuina ei-squamous-solujen kokonaismäärästä. MMP-9:n, 12 TIMP-1:n ja TGFb:n mittaus suoritetaan ysköksen supernatantista.
MMP:n ja TIMP:n mRNA:n profiili:
Kokonais-RNA uutetaan indusoidun ysköstulpan solusisällöstä käyttämällä Trizol-uuton ja Qiagen RNeasy -spinkolonnien yhdistelmää samalla tavalla kuin aiemmin on kuvattu12. Kvantitatiivista RT-PCR:ää, jossa käytetään aiemmin kehitettyjä alukkeita ja koettimia, käytetään määrittämään MMP:iden ja TIMP:iden suhteelliset määrät mRNA:ta kuvatulla tavalla12. Olemme edelleen ainoa keskus maailmassa, joka profiloi rutiininomaisesti koko MMP- ja TIMP-geeniperheen ihmisnäytteistä. Tämä antaa kaiken kattavan kuvan näiden entsyymien ja inhibiittoreiden osallisuudesta sairausprosessiin ja valaisee myös mahdollisia uusia biomarkkereita. Myös mahdollisuus laajentaa geeniprofilointia ilman ylimääräistä ysköksen keräämistä tuo lisäarvoa tutkimukselle. Tämä saattaa sisältää muita proteinaasiperheitä, joilla on rooli ECM:n hajoamisessa tai tulehduksessa.
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Todellinen)
Vaihe
- Vaihe 2
Yhteystiedot ja paikat
Opiskelupaikat
-
-
Norfolk
-
Norwich, Norfolk, Yhdistynyt kuningaskunta, NR47TJ
- University of East Anglia
-
-
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Sukupuolet, jotka voivat opiskella
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
- Mies tai nainen, 18-60 vuotta.
- Diagnosoitu astma, joka määritellään jaksoittaiseksi puristavaksi rinnassa, hengityksen vinkuksi ja hengenahdistukseksi, yskäksi.
- Tupakoimaton tai entinen tupakoitsija vähintään 10 vuotta ja tupakointi alle 5 pakkausvuotta.
- Astman oireita yli 10 vuotta.
- Tarvittaessa saa lyhytvaikutteisia keuhkoputkia laajentavia lääkkeitä.
- Keuhkoputkia laajentavan lääkkeen jälkeinen FEV1 ennustettu 50-100 %
- Todisteet hengitysteiden kaliiperin palautuvuudesta edellisten 12 kuukauden aikana: palautuvuus salbutamoliksi 12 % 400 mikrogramman inhaloidun salbutamolin jälkeen, histamiini PC20 < 8 mg/ml, vuorokausivaihtelu huippuuloshengitysvirtauksessa 20 %.
- Pystyy tuottamaan ysköstä suolaliuoksella induktion jälkeen.
Poissulkemiskriteerit:
- Muu sydän- tai keuhkosairaus kuin astma.
- Hengitystieinfektio, joka määritellään kuumeeksi, nenän/onteloiden tukkoiseksi, väsymykseksi, yskiksi, antibiootin käytöksi tai keltaiseksi/vihreäksi yskökseksi 4 viikon aikana ennen tutkimusta.
- Inhaloitavaa tai oraalista kortikosteroidihoitoa, pitkävaikutteista beeta2-agonistihoitoa tai leukotrieeniä modifioivaa hoitoa edellisen 1 kuukauden ajan.
- Vaikea tai hallitsematon samanaikainen sairaus.
- Raskaus tai imetys.
- Ei voi antaa kirjallista tietoon perustuvaa suostumusta
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
- Ensisijainen käyttötarkoitus: Hoito
- Jako: Ei käytössä
- Inventiomalli: Yksittäinen ryhmätehtävä
- Naamiointi: Ei mitään (avoin tarra)
Aseet ja interventiot
Osallistujaryhmä / Arm |
Interventio / Hoito |
|---|---|
|
Kokeellinen: montelukasti ryhmä
Tunnistettiin astmapotilaille, jotka saivat 10 mg Montelukastia (Merck Sharp & Dohme Ltd, Herts, UK) klo 08.00 kerran päivässä 8 viikon ajan.
|
montelukasti 10 mg kerran vuorokaudessa 8 viikon ajan
|
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Aikaikkuna |
|---|---|
|
Ensisijainen päätepiste on MMP- ja TIMP-mRNA-profiili suhteessa taloudenhoitogeeniin
Aikaikkuna: 8 viikkoa
|
8 viikkoa
|
Toissijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Aikaikkuna |
|---|---|
|
Ero montelukastihoidon 8 viikon ja lumelääkehoidon välillä MMP:n ja TIMP:n mRNA:lle
Aikaikkuna: 8 viikkoa
|
8 viikkoa
|
|
Ero 8 viikon montelukastihoidon ja lumelääkkeen välillä spirometriassa - FEV1, FVC, FEV1/FVC-suhde
Aikaikkuna: 8 viikkoa
|
8 viikkoa
|
|
Ero 8 viikon montelukastihoidon ja lumelääkehoidon välillä indusoidun ysköksen solujen erotuksen suhteen
Aikaikkuna: 8 viikkoa
|
8 viikkoa
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Sponsori
Tutkijat
- Päätutkija: Andrew M Wilson, MRCP (UK), University of East Anglia
Julkaisuja ja hyödyllisiä linkkejä
Yleiset julkaisut
- Pizzichini E, Pizzichini MM, Efthimiadis A, Evans S, Morris MM, Squillace D, Gleich GJ, Dolovich J, Hargreave FE. Indices of airway inflammation in induced sputum: reproducibility and validity of cell and fluid-phase measurements. Am J Respir Crit Care Med. 1996 Aug;154(2 Pt 1):308-17. doi: 10.1164/ajrccm.154.2.8756799.
- Cauwe B, Van den Steen PE, Opdenakker G. The biochemical, biological, and pathological kaleidoscope of cell surface substrates processed by matrix metalloproteinases. Crit Rev Biochem Mol Biol. 2007 May-Jun;42(3):113-85. doi: 10.1080/10409230701340019.
- Suzuki R, Miyazaki Y, Takagi K, Torii K, Taniguchi H. Matrix metalloproteinases in the pathogenesis of asthma and COPD: implications for therapy. Treat Respir Med. 2004;3(1):17-27. doi: 10.2165/00151829-200403010-00003.
- Atkinson JJ, Senior RM. Matrix metalloproteinase-9 in lung remodeling. Am J Respir Cell Mol Biol. 2003 Jan;28(1):12-24. doi: 10.1165/rcmb.2002-0166TR.
- Kelly EA, Busse WW, Jarjour NN. Increased matrix metalloproteinase-9 in the airway after allergen challenge. Am J Respir Crit Care Med. 2000 Sep;162(3 Pt 1):1157-61. doi: 10.1164/ajrccm.162.3.9908016.
- Boulay ME, Prince P, Deschesnes F, Chakir J, Boulet LP. Metalloproteinase-9 in induced sputum correlates with the severity of the late allergen-induced asthmatic response. Respiration. 2004 May-Jun;71(3):216-24. doi: 10.1159/000077418.
- Beeh KM, Beier J, Kornmann O, Buhl R. Sputum matrix metalloproteinase-9, tissue inhibitor of metalloprotinease-1, and their molar ratio in patients with chronic obstructive pulmonary disease, idiopathic pulmonary fibrosis and healthy subjects. Respir Med. 2003 Jun;97(6):634-9. doi: 10.1053/rmed.2003.1493.
- Vignola AM, Riccobono L, Mirabella A, Profita M, Chanez P, Bellia V, Mautino G, D'accardi P, Bousquet J, Bonsignore G. Sputum metalloproteinase-9/tissue inhibitor of metalloproteinase-1 ratio correlates with airflow obstruction in asthma and chronic bronchitis. Am J Respir Crit Care Med. 1998 Dec;158(6):1945-50. doi: 10.1164/ajrccm.158.6.9803014.
- Barnes PJ, Hansel TT. Prospects for new drugs for chronic obstructive pulmonary disease. Lancet. 2004 Sep 11-17;364(9438):985-96. doi: 10.1016/S0140-6736(04)17025-6.
- Langlois A, Ferland C, Tremblay GM, Laviolette M. Montelukast regulates eosinophil protease activity through a leukotriene-independent mechanism. J Allergy Clin Immunol. 2006 Jul;118(1):113-9. doi: 10.1016/j.jaci.2006.03.010. Epub 2006 May 19.
- Vignola AM, Riccobono L, Profita M, Foresi A, Di Giorgi R, Guerrera D, Gjomarkaj M, Di Blasi P, Paggiaro PL. Effects of low doses of inhaled fluticasone propionate on inflammation and remodelling in persistent-mild asthma. Allergy. 2005 Dec;60(12):1511-7. doi: 10.1111/j.1398-9995.2005.00827.x.
- Chuang SS, Hung CH, Hua YM, Tien CH, Yang KD, Jong YJ, Hsu SH, Lin CS. Suppression of plasma matrix metalloproteinase-9 following montelukast treatment in childhood asthma. Pediatr Int. 2007 Dec;49(6):918-22. doi: 10.1111/j.1442-200X.2007.02497.x.
- Kevorkian L, Young DA, Darrah C, Donell ST, Shepstone L, Porter S, Brockbank SM, Edwards DR, Parker AE, Clark IM. Expression profiling of metalloproteinases and their inhibitors in cartilage. Arthritis Rheum. 2004 Jan;50(1):131-41. doi: 10.1002/art.11433.
- Standardization of spirometry--1987 update. Statement of the American Thoracic Society. Am Rev Respir Dis. 1987 Nov;136(5):1285-98. doi: 10.1164/ajrccm/136.5.1285. No abstract available.
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus
Ensisijainen valmistuminen (Todellinen)
Opintojen valmistuminen (Todellinen)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (Arvio)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Arvio)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Avainsanat
Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja
- Hengityselinten sairaudet
- Immuunijärjestelmän sairaudet
- Keuhkosairaudet
- Yliherkkyys, välitön
- Keuhkoputken sairaudet
- Keuhkosairaudet, obstruktiiviset
- Hengitysteiden yliherkkyys
- Yliherkkyys
- Astma
- Huumeiden fysiologiset vaikutukset
- Farmakologisen vaikutuksen molekyylimekanismit
- Hormonit, hormonikorvikkeet ja hormoniantagonistit
- Astmaattiset aineet
- Hengityselinten aineet
- Leukotrieeniantagonistit
- Hormoniantagonistit
- Sytokromi P-450 CYP1A2:n indusoijat
- Sytokromi P-450 entsyymin indusoijat
- Montelukast
Muut tutkimustunnusnumerot
- 2009RESP01
- EudraCT Number: 2008-008364-27
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .