痰基质金属蛋白酶 (MMP) mRNA 和孟鲁司特

筛选时将进行以下测量：

• 知情同意
• 临床检查
• 肺量计
• 诱导痰

研究药物治疗 8 周后将进行以下操作：

• 临床检查
• 肺量计
• 诱导痰
• 日记卡

肺量计：

这将使用 Microlab 肺量计（Micro Medical Ltd, Rochester, Kent, UK）进行。 该程序将根据美国胸科学会规范 (13)。

日记卡数据：

患者将在每天早上根据“咳嗽”、“呼吸急促”和“气喘”在 4 分制中记录他们的症状，其中 0 = 无症状，3 = 最严重的症状。 将计算出总分 12 分的总症状评分。患者还将每天早上测量他们的峰值呼气流量，并记录三个测量值中的最高值。 他们将记录他们已经服用了研究药物。

痰液诱导和检查：

将通过 Pizzichini 等人 (14) 描述的方法用高渗盐水获得痰液，通过吸嘴吸入浓度逐渐增加的盐水（3%、4% 和 5%）各 7 分钟。 在每次吸入后，将测量 FEV1 以确保安全。 受试者将被要求将痰咳入无菌容器中。 白细胞的总细胞计数将在改进的 Neubauer 血细胞计数器中获得。 细胞活力将通过台盼蓝排除法来确定。 四百个非鳞状细胞将在赖特染色载玻片中计数，结果将表示为总非鳞状细胞计数的百分比和绝对数。 MMP-9、12 TIMP-1 和 TGFb 的测量将在痰上清液中进行。

MMP 和 TIMP 的 mRNA 概况：

总 RNA 将使用 Trizol 提取和 Qiagen RNeasy 离心柱的组合以与先前描述的类似方式从诱导痰栓的细胞内容物中提取 12。 使用先前开发的引物和探针的定量 RT-PCR 将用于确定 MMP 和 TIMP 的 mRNA 的相对数量，如所述 12。 我们仍然是世界上唯一一个定期分析人类样本中整个 MMP 和 TIMP 基因家族的中心。 这给出了这些酶和抑制剂在疾病过程中的参与的全面观点，也揭示了潜在的新生物标志物。 无需额外采集痰液即可扩展基因谱的可能性也增加了研究的价值。 这可能包括在 ECM 分解或炎症中起作用的其他蛋白酶家族。