部分的な T 細胞枯渇を伴う CML における同種幹細胞移植

患者は、経口ブスルファン 12mg/kg (-6 日目から -4 日目)、シクロホスファミド 120mg/kg (-3、-2 日目)、ウサギ抗胸腺細胞グロブリン (Fresenius、バート ハンブルク、ドイツ) 25mg/kg (-5 日目) で調整されました。から -1) およびフルダラビン 200 mg/kg (日 -7 から -3)。 ブスルファンの最終投与量は、血清ブスルファン レベルの測定値に基づいて個別に決定され、目標投与量は 850 ～ 1400 microM x 分でした。

移植は、高効率微粒子空気ろ過システム (HEPA) を備えた逆分離室で行われました。 移植後の GvHD 予防は行われませんでした。 移植後の感染予防は、アシクロビル、イトラコナゾール、トリメトプリム-スルファメトキサゾール、およびペニシリン VK で構成されていました。 サイトメガロ ウイルス (CMV) の状態は、血中白血球の CMV-DNA および pp65 抗原血症の PCR を使用して毎週決定され、陽性の場合は先制ガンシクロビル投与が行われました。

ドナー ドナーは、ヒト白血球抗原 (HLA) A、B、C が血清学的に一致し、DR および DQ が分子的に一致した兄弟でした。 ドナー幹細胞は、10 μg/kg/日の G-CSF を 5 日間連続して皮下投与して動員した後に収集されました。 CD34 細胞は、CliniMACS デバイス (Miltenyi Biotech、Bergisch Gladbach、ドイツ) を使用して、鉄-デキストラン マイクロビーズに結合した抗 CD34 抗体を使用してポジティブに選択し、> 5.0 x 106 CD34 細胞/kg を収集しました。

疾患のモニタリング 移植後、すべての患者は、細胞遺伝学的解析と BCR/ABL 転写産物の検出のための PCR を使用して、微小残存病変 (MRD) の存在について綿密な監視下に置かれました。 骨髄および末梢血のサンプルは、移植後 1 年目は 3 か月ごと、その後は 3 ～ 6 か月ごとに検査されました。

PCR 法: RQ-PCR は、Europe Against Cancer (EAC) プロトコルに従って実行されました。 BCR-ABL および ABL コピー数は、IPSOGEN FusionQuant Standards を使用して生成された標準曲線と比較することによって計算されました。 BCR-ABL 転写産物の定量化の結果は、全 ABL 転写産物に対するパーセンテージ比として表されました。

ABL の 1x104 コピーの最小数は、陰性の RT-PCR が信頼できないと見なされる下限です。 Rambam Health Care Campus の分子生物学研究室では、定量的 Q-PCR の感度は (10-5) です。

ドナー白血球注入 (DLI)。 DLI は、3 x 106 細胞/kg から開始し、必要に応じて 1 x 107 細胞/kg、5 x 107 細胞/kg、および 1 x 108 細胞/kg の用量漸増レジメンで投与されました。

DLI は、移植後 6 か月以降の BCR-ABL 転写産物の持続性/再発の場合に使用されました。 1 回を超える DLI が投与された場合、MRD のフォローアップで指示されたように、3 か月以上の間隔で連続して増量された用量が投与されました。