GnRHアンタゴニストによる制御された卵巣刺激プロトコルにおける子宮内膜黄体期の特徴と黄体期サポート:MicroRNAに焦点を当てて

miRNA は、特定の mRNA に作用して遺伝子発現を制御する一本鎖の小さな非コード RNA です。 研究では、miRNA が細胞分化や胚着床などの子宮内の細胞活動に影響を与えることが示唆されています。

生殖補助周期では、制御卵巣刺激 (COS) により生理学的ステロイドレベルを超え、黄体期、着床周囲および着床期間中の黄体​​形成ホルモン濃度が非常に低くなることに関連しています。 黄体期サポート、つまり着床プロセスをサポートすることを目的とした薬剤の投与は、体外受精（IVF）クリニックでは日常的に行われています。 卵巣刺激および体外受精のためにヒト更年期ゴナドトロピンを GnRH アゴニストと併用した場合、ステロイド ホルモンによる黄体期のサポートにより妊娠率が向上することがわかっています。 GnRH アンタゴニストのプロトコルにおけるステロイド補給の効果に関する報告は限られています。

提案されたプロジェクトは、ゴナドトロピン放出ホルモン拮抗薬を用いた制御された卵巣過剰刺激プロトコルにおける子宮内膜の黄体期の特徴と黄体期のサポートに関する以前の研究の延長です。 この研究の重要性は、着床プロセスにおける COS 後の黄体期の子宮内膜の重要性に基づいています。 生殖補助医療プログラムで卵子提供者を利用できることは、黄体期の質に対するさまざまな刺激プロトコルの影響を研究するまたとない機会を提供します。 さらに、卵母細胞ドナーモデルを使用すると、さまざまな黄体サポートプロトコルが子宮内膜調製物に与える影響を、組織学的および生化学的マーカーによって直接評価できる可能性があります。

研究デザイン: 研究対象者は、ゴナドトロピン/GnRH アンタゴニストのプロトコルに従って卵巣刺激を受けました。 すべてのドナーは、月経周期の 2 日目に血清卵胞刺激ホルモン (FSH) およびエストラジオール レベルのベースライン測定を受けました。 血清FSHレベルが10mIU/ml未満であり、E2レベルが60pg/ml未満であることを条件として、組換えFSHによる卵巣刺激を開始した。 1日の投与量は、連続経膣超音波検査および血清E2反応による卵胞の発育に応じて調整されました。 酢酸ガニレリックスの毎日夕方の投与は、刺激の6日目に開始され、ヒト絨毛性ゴナドトロピン投与の日まで続けられました。 少なくとも 3 つの卵胞が平均直径 18 mm に達すると、ヒト絨毛性ゴナドトロピン (hCG) の単回投与で排卵が誘発されました。 hCG 投与の 34 ～ 36 時間後に、超音波検査ガイド下経膣卵母細胞回収を行った。

研究には、COS周期中の卵子提供者から採取した30件の子宮内膜生検が使用される。 研究対象者はランダムに 4 つのグループに分けられました。 グループ 1: 回収日、ベースラインとして機能する黄体期サポートを受けていません。 grp2: 黄体期サポートなしで回収後 3、5、10 日。対照として機能します。 grp3: 回収後 3、5、10 日後、回収翌日から膣座薬の形でプロゲステロンによる黄体期サポートを開始します。 grp4: 微粉化プロゲステロンに加えて 2 mg の 17β-エストラジオールを毎日経口投与。 子宮内膜生検の直後、すべての標本は -196°C の液体窒素タンクに保管されました。

総RNAが単離され、Illumina miRNA発現パネルを使用してマイクロアレイが実行されます。 アレイの結果は、次の側面に焦点を当てて編集および分析されます: 著名な miRNA の標的遺伝子、標的遺伝子経路に関連した miRNA プロファイル。子宮内膜の日付と状態に関連した miRNA 発現プロファイル。卵巣刺激後の miRNA 発現に対する黄体期サポートの効果。 統計分析の目的で、サンプルごとに少なくとも 3 つの miRNA アレイが実行されます。 すべてのグループのすべてのサンプルには、合計 30 個のアレイが必要になります。

この研究では、研究者らは次の 3 つの疑問を投げかけています: 1) 卵巣刺激中に子宮内膜にはどのような種類の miRNA が何種類ありますか? これは、子宮内膜の受容性に関連する miRNA および関連する標的遺伝子を同定するためです。 2) miRNA 発現レベルは黄体期中、または着床期中に変化しますか? これは、子宮内膜のリモデリングプロセスに関連する miRNA の動態を調べるためです。および 3) 黄体期のサポートは黄体期の miRNA 発現を変化させますか? これは、miRNA 制御に対するステロイドの影響を調査するためです。 研究者らは、着床に関連する多くの重要な遺伝子が miRNA によって制御されているという仮説を立てています。 この研究努力は、COS後の子宮内膜の特徴と性ステロイド補給の影響についての知識を前進させる可能性があります。 全体として、この研究は着床の遺伝的制御をより深く理解するのに役立つはずです。 この研究の完了により、測定可能な科学的証拠と体外受精サイクルの管理に役立つ情報も提供される可能性があります。