Caractéristiques de la phase lutéale de l'endomètre et prise en charge de la phase lutéale dans les protocoles de stimulation ovarienne contrôlée avec des antagonistes de la GnRH : se concentrer sur le microARN

Les miARN sont de petits ARN non codants simple brin qui agissent sur des ARNm spécifiques pour réguler l'expression des gènes. Des études ont suggéré que les miARN influencent les activités cellulaires dans l'utérus, y compris la différenciation cellulaire et l'implantation d'embryons.

Dans les cycles de procréation assistée, la stimulation ovarienne contrôlée (COS) entraîne des niveaux de stéroïdes supraphysiologiques et est associée à une très faible concentration d'hormone lutéinisante pendant la phase lutéale, la période de péri-implantation et d'implantation. Le soutien de la phase lutéale, l'administration de médicaments visant à soutenir le processus d'implantation, est une pratique courante dans les cliniques de fécondation in vitro (FIV). Le soutien de la phase lutéale avec l'hormone stéroïde s'est avéré améliorer les taux de grossesse lorsque les gonadotrophines ménopausiques humaines étaient utilisées en conjonction avec des agonistes de la GnRH pour la stimulation ovarienne et la FIV. Les rapports sur l'effet de la supplémentation en stéroïdes dans les protocoles d'antagonistes de la GnRH sont limités.

Le projet proposé est une extension de notre étude précédente sur les caractéristiques de la phase lutéale de l'endomètre et le soutien de la phase lutéale dans les protocoles d'hyperstimulation ovarienne contrôlée avec des antagonistes de l'hormone de libération des gonadotrophines. L'importance de cette étude repose sur l'importance de la phase lutéale endométriale après COS pour le processus d'implantation. La disponibilité de donneuses d'ovocytes dans les programmes de technologie de procréation assistée offre une opportunité unique d'étudier l'impact de différents protocoles de stimulation sur la qualité de la phase lutéale. De plus, le modèle de donneuse d'ovocytes peut nous permettre d'évaluer l'impact de différents protocoles de support lutéal directement sur la préparation de l'endomètre par des marqueurs histologiques et biochimiques.

Conception de l'étude : Les sujets de l'étude ont subi une stimulation ovarienne selon un protocole gonadotrophine/antagoniste de la GnRH. Tous les donneurs ont eu une mesure de base des taux sériques d'hormone folliculo-stimulante (FSH) et d'œstradiol le deuxième jour de leurs cycles menstruels. À condition que les taux sériques de FSH soient inférieurs à 10 mUI/ml et que les taux d'E2 soient inférieurs à 60 pg/ml, la stimulation ovarienne a été initiée avec la FSH recombinante. La dose quotidienne a été ajustée en fonction du développement folliculaire par des échographies transvaginales en série et de la réponse E2 sérique. Une dose quotidienne du soir d'acétate de ganirelix a été initiée le 6ème jour de stimulation et poursuivie tout au long de la journée d'administration de gonadotrophine chorionique humaine. Lorsqu'au moins trois follicules ont atteint un diamètre moyen de 18 mm, l'ovulation a été déclenchée avec une dose unique de gonadotrophine chorionique humaine (hCG). Le prélèvement d'ovocytes transvaginal guidé par échographie a été effectué 34 à 36 heures après l'administration d'hCG.

Trente biopsies endométriales de donneurs d'ovocytes sur leurs cycles COS seront utilisées pour l'étude. Les sujets de l'étude ont été randomisés en 4 groupes. Grp 1 : jour de récupération, n'a pas reçu de support de phase lutéale, qui sert de ligne de base ; grp2 : 3, 5 et 10 jours après la récupération sans accompagnement de la phase lutéale, qui sert de contrôle ; grp3 : 3, 5 et 10 jours après le retrait, accompagnement de la phase lutéale avec de la progestérone sous forme de suppositoires vaginaux à partir du lendemain du retrait ; grp4 : dose orale quotidienne de 2 mg de 17β-estradiol en plus de la progestérone micronisée. Immédiatement après la biopsie de l'endomètre, tous les échantillons ont été stockés dans des réservoirs d'azote liquide à -196°C.

L'ARN total sera isolé et le microarray sera réalisé à l'aide d'un panel d'expression Illumina miRNA. Les résultats de la matrice seront compilés et analysés en se concentrant sur les aspects suivants : les gènes cibles des principaux miARN, le profil des miARN par rapport aux voies des gènes cibles ; profil d'expression des miARN en relation avec la datation et le statut de l'endomètre ; effet du soutien de la phase lutéale sur l'expression des miARN après stimulation ovarienne. Un minimum de 3 matrices de miARN seront exécutées pour chaque échantillon à des fins d'analyse statistique. Un total de 30 matrices sera nécessaire pour tous les échantillons de tous les groupes.

Dans cette étude, les chercheurs posent trois questions : 1) Combien et quels types de miARN se trouvent dans l'endomètre lors de la stimulation ovarienne ? Il s'agit d'identifier les miARN et les gènes cibles associés qui sont pertinents pour la réceptivité de l'endomètre ; 2) Les niveaux d'expression des miARN changent-ils pendant la phase lutéale ou pendant la fenêtre d'implantation ? Il s'agit d'examiner la dynamique des miARN associés au processus de remodelage de l'endomètre ; et 3) Le support de la phase lutéale modifie-t-il l'expression des miARN dans la phase lutéale ? Il s'agit d'étudier l'effet des stéroïdes sur la régulation des miARN. Les chercheurs émettent l'hypothèse que de nombreux gènes critiques liés à l'implantation sont régulés par les miARN. Cet effort de recherche fera potentiellement progresser nos connaissances sur les caractéristiques de l'endomètre après COS et l'impact de la supplémentation en stéroïdes sexuels. Globalement, l'étude devrait permettre de mieux comprendre le contrôle génétique de l'implantation. La réalisation de cette étude peut également fournir des preuves scientifiques mesurables et des informations utiles pour la gestion des cycles de FIV.