GnRH 길항제를 사용한 통제된 난소 자극 프로토콜에서 자궁내막 황체기 특성 및 황체기 지원: MicroRNA를 중심으로

MiRNA는 특정 mRNA에 작용하여 유전자 발현을 조절하는 단일 가닥의 작은 비암호화 RNA입니다. 연구에 따르면 miRNA는 세포 분화 및 배아 이식을 포함하여 자궁의 세포 활동에 영향을 미칩니다.

보조 생식 주기에서 제어된 난소 자극(COS)은 초생리학적 스테로이드 수치를 초래하고 황체기, 착상 주위 및 착상 기간 동안 매우 낮은 황체 형성 호르몬 농도와 관련됩니다. 착상 과정을 지원하기 위한 약물 투여인 황체기 지원은 체외 수정(IVF) 클리닉에서 일상적인 관행이었습니다. 난소 자극 및 IVF를 위해 인간 폐경기 성선자극호르몬을 GnRH 작용제와 함께 사용했을 때 스테로이드 호르몬을 사용한 황체기 지원이 임신율을 향상시키는 것으로 밝혀졌습니다. GnRH 길항제 프로토콜에서 스테로이드 보충 효과에 대한 보고는 제한적입니다.

제안된 프로젝트는 성선자극호르몬 방출 호르몬 길항제를 사용한 제어된 난소과자극 프로토콜에서 자궁내막 황체기 특성 및 황체기 지원에 대한 이전 연구의 확장입니다. 이 연구의 의의는 이식 과정에서 COS 후 황체기 자궁 내막의 중요성에 근거합니다. 보조 생식 기술 프로그램에서 난모세포 기증자의 가용성은 황체기의 품질에 대한 다양한 자극 프로토콜의 영향을 연구할 수 있는 독특한 기회를 제공합니다. 또한, 난모세포 기증자 모델을 사용하면 조직학적 및 생화학적 마커에 의해 자궁내막 준비에 대한 다양한 황체 지원 프로토콜의 영향을 직접 평가할 수 있습니다.

연구 설계: 연구 대상자는 성선자극호르몬/GnRH 길항제 프로토콜에 따라 난소 자극을 받았습니다. 모든 기증자는 월경 주기 둘째 날에 혈청 난포 자극 호르몬(FSH)과 에스트라디올 수치의 기준선 측정을 받았습니다. 혈청 FSH 수치가 10mIU/ml 미만이고 E2 수치가 60pg/ml 미만인 경우, 재조합 FSH로 난소 자극을 시작했습니다. 일일 투여량은 일련의 경질 초음파 및 혈청 E2 반응에 의한 난포 발달에 따라 조정되었습니다. 가니렐릭스 아세테이트의 매일 저녁 용량은 자극 6일째에 시작되었고 인간 융모막 성선 자극 호르몬 투여일까지 계속되었습니다. 최소 3개의 난포가 평균 직경 18mm에 도달하면 인간 융모막 성선 자극 호르몬(hCG)의 단일 용량으로 배란이 시작되었습니다. hCG 투여 34-36시간 후 초음파 유도 질식 난자 채취를 시행하였다.

COS 주기에 있는 난자 기증자의 30개 자궁내막 생검이 연구에 사용될 것입니다. 연구 주제는 4개의 그룹으로 무작위 배정되었습니다. Grp 1: 회수일, 기준선 역할을 하는 어떠한 황체기 지원도 받지 않음; grp2: 대조군 역할을 하는 황체기 지원 없이 회수 후 3, 5 및 10일; grp3: 검색 후 3, 5 및 10일, 검색 다음 날부터 질 좌약 형태의 프로게스테론으로 황체기 지원; grp4: 미세화된 프로게스테론에 추가하여 2 mg 17β-estradiol의 일일 경구 투여량. 자궁내막 생검 직후 모든 검체를 -196°C의 액체 질소 탱크에 보관했습니다.

총 RNA를 분리하고 Illumina miRNA 발현 패널을 사용하여 마이크로어레이를 수행합니다. 배열 결과는 다음과 같은 측면에 초점을 맞추어 수집 및 분석됩니다: 주요 miRNA의 표적 유전자, 표적 유전자 경로와 관련된 miRNA 프로파일; 자궁내막 연대 및 상태와 관련된 miRNA 발현 프로필; 난소 자극 후 miRNA 발현에 대한 황체기 지원의 효과. 통계 분석을 위해 각 샘플에 대해 최소 3개의 miRNA 어레이가 실행됩니다. 모든 그룹의 모든 샘플에 대해 총 30개의 어레이가 필요합니다.

이 연구에서 연구자들은 세 가지 질문을 제기합니다. 1) 난소 자극 동안 자궁내막에 miRNA의 수와 유형은 무엇입니까? 이것은 자궁내막 수용성과 관련된 miRNA 및 관련 표적 유전자를 식별하기 위한 것입니다. 2) miRNA 발현 수준이 황체기 또는 착상 기간 동안 변화합니까? 이것은 자궁내막의 리모델링 과정과 관련된 miRNA의 역학을 조사하기 위한 것입니다. 및 3) 황체기 지원이 황체기에서 miRNA 발현을 변경합니까? 이것은 miRNA 조절에 대한 스테로이드 효과를 조사하기 위한 것입니다. 연구자들은 이식과 관련된 많은 중요한 유전자가 miRNA에 의해 조절된다는 가설을 세웠습니다. 이 연구 노력은 COS 후 자궁내막 특성에 대한 지식과 성 스테로이드 보충의 영향을 잠재적으로 발전시킬 것입니다. 전반적으로 연구는 이식의 유전적 조절을 더 잘 이해하는 데 도움이 될 것입니다. 이 연구의 완료는 또한 측정 가능한 과학적 증거와 IVF 주기 관리에 대한 유용한 정보를 제공할 수 있습니다.