使用 GnRH 拮抗剂控制卵巢刺激方案中的子宫内膜黄体期特征和黄体期支持：聚焦 MicroRNA

MiRNA 是单链小分子非编码 RNA，作用于特定的 mRNA 以调节基因表达。 研究表明，miRNA 会影响子宫内的细胞活动，包括细胞分化和胚胎植入。

在辅助生殖周期中，受控卵巢刺激 (COS) 导致超生理类固醇水平，并且与黄体期、着床期和着床期的黄体生成素浓度非常低有关。 黄体期支持，旨在支持植入过程的药物管理，一直是体外受精 (IVF) 诊所的常规做法。 当人类更年期促性腺激素与 GnRH 激动剂联合用于卵巢刺激和 IVF 时，已发现类固醇激素的黄体期支持可提高妊娠率。 关于在 GnRH 拮抗剂方案中补充类固醇的影响的报告是有限的。

拟议的项目是我们之前关于使用促性腺激素释放激素拮抗剂控制卵巢过度刺激方案中子宫内膜黄体期特征和黄体期支持研究的延伸。 本研究的意义在于基于COS后黄体期子宫内膜对着床过程的重要性。 辅助生殖技术项目中卵母细胞供体的可用性为研究不同刺激方案对黄体期质量的影响提供了独特的机会。 此外，卵母细胞供体模型可以让我们通过组织学和生化标记物直接评估不同黄体支持方案对子宫内膜制备的影响。

研究设计：研究对象根据促性腺激素/GnRH 拮抗剂方案接受卵巢刺激。 所有捐赠者在月经周期的第二天进行了血清促卵泡激素 (FSH) 和雌二醇水平的基线测量。 如果血清 FSH 水平低于 10mIU/ml 且 E2 水平低于 60pg/ml，则使用重组 FSH 启动卵巢刺激。 根据经阴道连续超声和血清 E2 反应的卵泡发育情况调整每日剂量。 在刺激的第 6 天开始每天晚上服用醋酸加尼瑞克，并持续到人绒毛膜促性腺激素给药当天。 当至少三个卵泡的平均直径达到 18 毫米时，单剂量的人绒毛膜促性腺激素 (hCG) 就会触发排卵。 在 hCG 给药后 34-36 小时进行超声引导的经阴道取卵。

来自卵母细胞供体的 COS 周期的 30 个子宫内膜活检将用于该研究。 研究对象被随机分为 4 组。 Grp 1：检索日，未接受任何黄体期支持，作为基线； grp2：取回后第 3、5 和 10 天，无黄体支持，作为对照； grp3：取出后第3、5和10天，从取出后的第二天开始，黄体酮以阴道栓剂的形式支持黄体期； grp4：除微粉化黄体酮外，每天口服 2 mg 17β-雌二醇。 子宫内膜活检后立即将所有标本储存在-196°C 的液氮罐中。

将分离总 RNA，并使用 Illumina miRNA 表达面板进行微阵列。 阵列结果将集中在以下方面进行编译和分析：显着 miRNA 的靶基因、与靶基因通路相关的 miRNA 图谱；与子宫内膜约会和状态相关的 miRNA 表达谱；黄体期支持对卵巢刺激后 miRNA 表达的影响。 出于统计分析的目的，每个样本至少运行 3 个 miRNA 阵列。 所有组的所有样本总共需要 30 个阵列。

在这项研究中，研究人员提出了三个问题：1) 在卵巢刺激过程中，子宫内膜中有多少 miRNA 以及哪些类型？ 这是为了识别与子宫内膜容受性相关的 miRNA 和相关靶基因； 2) 黄体期或植入窗口期间 miRNA 表达水平是否发生变化？ 这是为了检查与子宫内膜重塑过程相关的miRNAs的动力学；和 3) 黄体期是否支持改变黄体期 miRNA 的表达？ 这是为了研究类固醇对 miRNA 调节的影响。 研究人员假设许多与植入相关的关键基因受 miRNA 调控。 这项研究工作可能会提高我们对 COS 后子宫内膜特征和补充性类固醇影响的认识。 总的来说，这项研究应该有助于更好地了解植入的遗传控制。 完成这项研究还可以为 IVF 周期的管理提供可衡量的科学证据和有用的信息。