新たに診断された乳児におけるX連鎖重度複合免疫不全症の遺伝子導入 (LVXSCID-ND)

骨髄CD34 +細胞は手術室で得られ、γc遺伝子の正常なコピーを含むレンチウイルスベクターで形質導入され、骨髄還元条件付けなしで再注入されます。 参加者は、ブスルファンからの造血回復と、遺伝子治療後42日間の重度の有害事象について監視されます。 このアプローチの有効性を評価する主要評価項目は、移植後 52 週間 (± 4) 週間の T 細胞免疫再構築です。 免疫再構築、プロトコル関連毒性、およびレトロウイルス統合部位のすべての側面の継続的かつ詳細な評価も行われます。 この研究は、SCID-X1の治療のためのSINレンチウイルスベクターの最初の使用を評価し、新たに診断された患者の大部分に適用できる新しい形の治療につながる可能性があります.

目的

γc 遺伝子を発現する自己不活性化レンチウイルスベクター (CL20-i4-EF1α-hγc-OPT) で形質導入された自家 CD34+ 細胞を移植された、新たに診断された SCID-X1 患者におけるレンチウイルス遺伝子導入の安全性、実現可能性、および有効性を評価します。

主な目的 1: SCID-X1 乳児に体重 1 キログラムあたり少なくとも 100 万個の形質導入 CD34+ 細胞を注入することの安全性と実現可能性を評価します。

主要な目的 2: 移植後 52 週間 (± 4 週間) の有意な T 細胞再構成を誘導するためのレンチウイルス遺伝子導入の有効性を評価します。 T 細胞の有意な再構成は、以下の 3 つの基準のうち少なくとも 2 つが存在する場合に定義されます。

• フィトヘマグルチニン (PHA) に対する T 細胞増殖反応の発生は、正常なコントロールで見られる値の 50% 以上です。
• 末梢血中の自己 CD3+ T 細胞が 1000 個/μl 以上
• 末梢血中の自己 CD4+ T 細胞が 500 個/μl 以上
• 末梢血中の自己 CD4+ CD45RA T 細胞が 200 個/μl 以上

その他の事前に指定された目的:

• ブスルファンとその代謝物の薬物動態を、毒性、有効性、ベクター形質導入細胞の生着、無イベント生存および全生存と関連付けます。
• 22 mg*hr/L の曲線下の累積ブスルファン面積を達成するために、24 時間ごとに合計 2 回投与するブスルファン投与によるブスルファン用量ターゲティングの有効性を評価します。
• プロトコル患者の長期追跡中に B 細胞機能を評価します。 評価には、循環 B 細胞における γc 発現、血清 IgG、IgA、および IgM 濃度の測定、ワクチン接種に対する抗体反応の測定、IVIG を中止する臨床的適応がある患者における静脈内ガンマグロブリン療法の中止後の IgG 産生の評価が含まれます。
• プロトコル患者の長期フォローアップで NK 細胞数を評価します。 評価には、NK細胞数のフローサイトメトリー評価が含まれます。
• ベクター コピー数と並べ替えられた血球のベクター統合サイトの場所を決定します。 選別されたT細胞、B細胞、NK細胞、顆粒球および単球は、ベクターのコピー数について評価されます。 ソートされた T 細胞のベクター コピー数は潜在的な安全対策として評価され、ベクター コピー数が任意の患者の T 細胞あたり 5 コピーを超える場合はいつでも FDA に報告されます。 選別された細胞に関する研究には、挿入部位を特徴付けるための自動シーケンサーによるディープ シーケンスや、挿入部位から 100 kb 以内の遺伝子発現の変化をアッセイするための T 細胞クローンの発現アレイ解析も含まれます。
• レンチウイルス遺伝子導入の全体的な長期的な安全性を評価します。 これには、遺伝子導入手順に起因する有害事象の完全な臨床評価が含まれます。 発癌性イベントが見られる場合、この評価には、挿入部位分析、遺伝子発現分析、LMO2、Cdkn2a、Notch1、Cyclin D2 遺伝子変化の評価を含む、腫瘍クローンの完全な分子特性評価が含まれます。