Genöverföring för X-länkad allvarlig kombinerad immunbrist hos nydiagnostiserade spädbarn (LVXSCID-ND)

Benmärgs-CD34+-celler kommer att erhållas i operationssalen, transduceras med den lentivirala vektorn som innehåller en normal kopia av γc-genen och återinfunderas utan någon myeloreduktiv konditionering. Deltagarna kommer att övervakas för hematopoetisk återhämtning från busulfan och för allvarliga biverkningar under 42 dagar efter genterapi. Det primära effektmåttet som bedömer effekten av denna metod kommer att vara T-cells immunrekonstitution 52 veckor (± 4) veckor efter transplantation. Fortsatt och detaljerad utvärdering av alla aspekter av immunrekonstitution, protokollrelaterad toxicitet och retrovirala integrationsställen kommer också att utföras. Denna studie kommer att utvärdera den första användningen av en SIN lentiviral vektor för behandling av SCID-X1 och kan leda till en ny form av terapi som skulle kunna tillämpas på majoriteten av nydiagnostiserade patienter.

MÅL

Bedöm säkerheten, genomförbarheten och effekten av lentiviral genöverföring hos nyligen diagnostiserade SCID-X1-patienter transplanterade med autologa CD34+-celler som har transducerats med en självinaktiverande lentiviral vektor (CL20-i4-EF1α-hγc-OPT) som uttrycker en γc-gen.

Primärt mål 1: Utvärdera säkerheten och genomförbarheten av att infundera minst 1 miljon transducerade CD34+-celler per kilogram kroppsvikt hos SCID-X1-spädbarn.

Primärt mål 2: Utvärdera effektiviteten av lentiviral genöverföring för att inducera betydande T-cellsrekonstitution 52 veckor (± 4 veckor) efter transplantation. Signifikant rekonstitution av T-celler definieras som att minst 2 av följande 3 kriterier är närvarande:

• Utvecklingen av T-cellsproliferativa svar på fytohemagglutinin (PHA) som är ≥ 50 % av värdet som ses i normala kontroller
• ≥ 1000 autologa CD3+ T-celler/μl i det perifera blodet
• ≥ 500 autologa CD4+ T-celler/μl i det perifera blodet
• ≥ 200 autologa CD4+ CD45RA T-celler/μl i det perifera blodet

ANDRA FÖRSPECIFICERADE MÅL:

• Korrelera busulfan och dess metabolit farmakokinetik med toxicitet, effekt, ympning av vektortransducerade celler och händelsefri överlevnad och total överlevnad.
• Utvärdera effekten av dosinriktning på busulfan med busulfanadministrering var 24:e timme för totalt 2 doser för att uppnå en kumulativ busulfanarea under kurvan på 22 mg*timme/L.
• Utvärdera B-cellsfunktion under långtidsuppföljning av protokollpatienter. Utvärdering kommer att omfatta γc-uttryck i cirkulerande B-celler, mätning av serumkoncentrationer av IgG, IgA och IgM, mätning av antikroppssvar på vaccination, utvärdering av IgG-produktion efter upphörande av intravenös gammaglobulinbehandling hos patienter med kliniska indikationer för att avbryta IVIG.
• Utvärdera NK-cellantal vid långtidsuppföljning av protokollpatienter. Utvärdering kommer att innefatta flödescytometri utvärdering av NK-cellantal.
• Bestäm vektorkopietalet och platsen för vektorintegrationsställen i sorterade blodkroppar. Sorterade T-celler, B-celler, NK-celler, granulocyter och monocyter kommer att utvärderas för vektorkopietal. Antal vektorkopior i sorterade T-celler kommer att utvärderas som en potentiell säkerhetsåtgärd och kommer att rapporteras till FDA om antalet vektorkopior är större än 5 kopior per T-cell i någon patient när som helst. Studier på sorterade celler kommer också att inkludera djupsekvensering med en automatiserad sekvenserare för att karakterisera insättningsställen, och expressionsarrayanalys av T-cellskloner för att analysera för genuttrycksförändringar inom 100 kb från insättningsställena.
• Utvärdera den övergripande, långsiktiga säkerheten för lentiviral genöverföring. Detta kommer att inkludera fullständig klinisk utvärdering av eventuella biverkningar som härrör från genöverföringsproceduren. Om någon onkogen händelse ses kommer denna utvärdering att inkludera fullständig molekylär karakterisering av tumörklonen inklusive analys av insättningsställen, analys av genuttryck och utvärdering för LMO2, Cdkn2a, Notch1, Cyclin D2 genförändringar.