Přenos genů pro X-vázanou těžkou kombinovanou imunodeficienci u nově diagnostikovaných kojenců (LVXSCID-ND)

CD34+ buňky kostní dřeně budou získány na operačním sále, transdukovány lentivirovým vektorem, který obsahuje normální kopii genu γc, a reinfundovány bez jakékoli myeloreduktivní úpravy. Účastníci budou sledováni na hematopoetické zotavení z busulfanu a na závažné nežádoucí účinky po dobu 42 dnů po genové terapii. Primárním cílovým parametrem hodnotícím účinnost tohoto přístupu bude imunitní rekonstituce T-buněk 52 týdnů (± 4) týdnů po transplantaci. Bude také prováděno průběžné a podrobné hodnocení všech aspektů imunitní rekonstituce, toxicity související s protokolem a míst retrovirové integrace. Tato studie vyhodnotí první použití lentivirového vektoru SIN pro léčbu SCID-X1 a může vést k nové formě terapie, která by mohla být aplikována na většinu nově diagnostikovaných pacientů.

CÍLE

Posoudit bezpečnost, proveditelnost a účinnost lentivirového genového přenosu u nově diagnostikovaných pacientů SCID-X1 s transplantovanými autologními CD34+ buňkami, které byly transdukovány samoinaktivujícím lentivirovým vektorem (CL20-i4-EF1α-hγc-OPT) exprimujícím gen γc.

Primární cíl 1: Vyhodnotit bezpečnost a proveditelnost infuze alespoň 1 milionu transdukovaných CD34+ buněk na kilogram tělesné hmotnosti u kojenců SCID-X1.

Primární cíl 2: Vyhodnotit účinnost přenosu lentivirového genu pro indukci významné rekonstituce T-buněk 52 týdnů (± 4 týdny) po transplantaci. Významná rekonstituce T buněk je definována tak, že jsou přítomna alespoň 2 z následujících 3 kritérií:

• Vývoj proliferativních odpovědí T-buněk na fytohemaglutinin (PHA), které jsou ≥ 50 % hodnoty pozorované u normálních kontrol
• ≥ 1000 autologních CD3+ T-buněk/μl v periferní krvi
• ≥ 500 autologních CD4+ T-buněk/μl v periferní krvi
• ≥ 200 autologních CD4+ CD45RA T-buněk/μl v periferní krvi

DALŠÍ PŘEDEM URČENÉ CÍLE:

• Porovnejte farmakokinetiku busulfanu a jeho metabolitu s toxicitou, účinností, přihojením buněk transdukovaných vektorem a přežitím bez příhody a celkovým přežitím.
• Vyhodnoťte účinnost cíleného dávkování busulfanu při podávání busulfanu každých 24 hodin pro celkem 2 dávky, abyste dosáhli kumulativní plochy busulfanu pod křivkou 22 mg*h/l.
• Vyhodnoťte funkci B-buněk během dlouhodobého sledování protokolovaných pacientů. Hodnocení bude zahrnovat expresi γc v cirkulujících B-buňkách, měření sérových koncentrací IgG, IgA a IgM, měření protilátkových odpovědí na vakcinaci, hodnocení produkce IgG po ukončení intravenózní terapie gamaglobulinem u pacientů s klinickou indikací k přerušení IVIG.
• Vyhodnoťte počty NK buněk při dlouhodobém sledování protokolovaných pacientů. Hodnocení bude zahrnovat vyhodnocení počtu NK buněk průtokovou cytometrií.
• Určete počet vektorových kopií a umístění vektorových integračních míst v tříděných krvinkách. Tříděné T-buňky, B-buňky, NK buňky, granulocyty a monocyty budou hodnoceny na počet kopií vektoru. Počet kopií vektoru v roztříděných T-buňkách bude vyhodnocen jako potenciální bezpečnostní opatření a bude oznámen FDA, pokud je počet kopií vektoru větší než 5 kopií na T buňku u kteréhokoli pacienta v kteroukoli dobu. Studie na tříděných buňkách budou také zahrnovat hluboké sekvenování s automatickým sekvenátorem pro charakterizaci míst inzerce a analýzu expresního pole klonů T-buněk pro testování změn genové exprese v rámci 100 kb od míst inzerce.
• Vyhodnoťte celkovou dlouhodobou bezpečnost lentivirového genového přenosu. To bude zahrnovat kompletní klinické hodnocení jakýchkoli nežádoucích účinků vyplývajících z postupu genového přenosu. Pokud je pozorována jakákoli onkogenní událost, toto hodnocení bude zahrnovat kompletní molekulární charakterizaci nádorového klonu včetně analýzy místa inzerce, analýzy genové exprese a hodnocení změn genů LMO2, Cdkn2a, Notch1, Cyclin D2.