Genoverførsel for X-forbundet svær kombineret immundefekt hos nydiagnosticerede spædbørn (LVXSCID-ND)

Knoglemarvs-CD34+-celler vil blive opnået på operationsstuen, transduceret med den lentivirale vektor, der indeholder en normal kopi af γc-genet, og reinfunderet uden nogen myeloreduktiv konditionering. Deltagerne vil blive overvåget for hæmatopoietisk restitution fra busulfan og for alvorlige bivirkninger i 42 dage efter genterapi. Det primære endepunkt, der vurderer effektiviteten af ​​denne fremgangsmåde, vil være T-celle-immunrekonstitution 52 uger (± 4) uger efter transplantation. Fortsat og detaljeret evaluering af alle aspekter af immunrekonstitution, protokol-relateret toksicitet og retrovirale integrationssteder vil også blive udført. Denne undersøgelse vil evaluere den første brug af en SIN lentiviral vektor til behandling af SCID-X1 og kan føre til en ny form for terapi, der kan anvendes på størstedelen af ​​nydiagnosticerede patienter.

MÅL

Vurder sikkerheden, gennemførligheden og effektiviteten af ​​lentiviral genoverførsel i nyligt diagnosticerede SCID-X1-patienter transplanteret med autologe CD34+-celler, der er blevet transduceret med en selvinaktiverende lentiviral vektor (CL20-i4-EF1α-hγc-OPT), der udtrykker et γc-gen.

Primært mål 1: Evaluere sikkerheden og gennemførligheden af ​​infusion af mindst 1 million transducerede CD34+-celler pr. kilogram kropsvægt hos SCID-X1-spædbørn.

Primært mål 2: Evaluer effektiviteten af ​​lentiviral genoverførsel til at inducere signifikant T-celle-rekonstitution 52 uger (± 4 uger) efter transplantation. Signifikant rekonstitution af T-celler er defineret som, at mindst 2 af følgende 3 kriterier er til stede:

• Udviklingen af ​​T-celleproliferative responser på phytohæmagglutinin (PHA), der er ≥ 50 % af værdien set i normale kontroller
• ≥ 1000 autologe CD3+ T-celler/μl i det perifere blod
• ≥ 500 autologe CD4+ T-celler/μl i det perifere blod
• ≥ 200 autologe CD4+ CD45RA T-celler/μl i det perifere blod

ANDRE FORUDSPECIFICEREDE MÅL:

• Korreler busulfan og dets metabolitfarmakokinetik med toksicitet, effektivitet, indpodning af vektortransducerede celler og hændelsesfri overlevelse og samlet overlevelse.
• Evaluer effektiviteten af ​​busulfan dosis-targeting med busulfan administration hver 24. time i i alt 2 doser for at opnå et kumulativt busulfan areal under kurven på 22 mg*time/L.
• Evaluer B-cellefunktion under langvarig opfølgning af protokolpatienter. Evaluering vil omfatte γc-ekspression i cirkulerende B-celler, måling af serum-IgG-, IgA- og IgM-koncentration, måling af antistofrespons på vaccination, evaluering af IgG-produktion efter ophør af intravenøs gammaglobulinbehandling hos patienter med kliniske indikationer for at seponere IVIG.
• Evaluer NK-celleantal i langtidsopfølgning af protokolpatienter. Evaluering vil omfatte flowcytometrievaluering af NK-celleantal.
• Bestem vektorkopiantallet og placeringen af ​​vektorintegrationssteder i sorterede blodceller. Sorterede T-celler, B-celler, NK-celler, granulocytter og monocytter vil blive evalueret for vektorkopiantal. Vektorkopinummer i sorterede T-celler vil blive evalueret som en potentiel sikkerhedsforanstaltning og vil blive rapporteret til FDA, hvis vektorkopiantallet er større end 5 kopier pr. T-celle i enhver patient til enhver tid. Undersøgelser af sorterede celler vil også omfatte dyb sekventering med en automatiseret sekventeringsmaskine til karakterisering af insertionssteder og ekspressionsmatrixanalyse af T-cellekloner for at analysere for genekspressionsændringer inden for 100 kb fra insertionsstederne.
• Evaluer den overordnede, langsigtede sikkerhed ved lentiviral genoverførsel. Dette vil omfatte fuldstændig klinisk evaluering af eventuelle AE'er som følge af genoverførselsproceduren. Hvis der ses en onkogen hændelse, vil denne evaluering omfatte fuldstændig molekylær karakterisering af tumorklonen, herunder analyse af insertionssted, genekspressionsanalyse og evaluering for LMO2, Cdkn2a, Notch1, Cyclin D2 genændringer.