Géntranszfer X-hez kötött súlyos kombinált immunhiány esetén újonnan diagnosztizált csecsemőkben (LVXSCID-ND)

A csontvelői CD34+ sejteket a műtőben nyerjük, a γc gén normál másolatát tartalmazó lentivírus vektorral transzdukáljuk, és mieloreduktív kondicionálás nélkül újrainfundáljuk. A résztvevőket a génterápia után 42 napig ellenőrizni fogják a buszulfánból származó hematopoietikus felépülésre és a súlyos nemkívánatos eseményekre. Ennek a megközelítésnek a hatékonyságát értékelő elsődleges végpont a T-sejtek immunrendszerének helyreállítása lesz 52 héttel (± 4) héttel a transzplantáció után. Az immunrekonstitúció, a protokollhoz kapcsolódó toxicitás és a retrovírus-integrációs helyek minden aspektusának folyamatos és részletes értékelése is megtörténik. Ez a tanulmány értékelni fogja a SIN lentivírus vektor első alkalmazását a SCID-X1 kezelésére, és a terápia új formájához vezethet, amely alkalmazható az újonnan diagnosztizált betegek többségénél.

CÉLKITŰZÉSEK

Értékelje a lentivírus géntranszfer biztonságosságát, megvalósíthatóságát és hatékonyságát újonnan diagnosztizált SCID-X1 betegeknél, akiket γc gént expresszáló öninaktiváló lentivírus vektorral (CL20-i4-EF1α-hγc-OPT) transzdukált autológ CD34+ sejtekkel transzplantáltak.

Elsődleges cél 1: Értékelje testtömeg-kilogrammonként legalább 1 millió transzdukált CD34+ sejt infúziójának biztonságosságát és megvalósíthatóságát SCID-X1 csecsemőkben.

2. elsődleges célkitűzés: Értékelje a lentivírus géntranszfer hatékonyságát a jelentős T-sejt-rekonstitúció indukálásában 52 héttel (± 4 hét) a transzplantáció után. A T-sejtek szignifikáns helyreállását az alábbi 3 kritérium közül legalább 2 jelenléte határozza meg:

• A fitohemagglutinin (PHA) elleni T-sejt proliferatív válaszok kialakulása, amelyek ≥ 50%-a a normál kontrolloknál tapasztalt értéknek
• ≥ 1000 autológ CD3+ T-sejt/μl a perifériás vérben
• ≥ 500 autológ CD4+ T-sejt/μl a perifériás vérben
• ≥ 200 autológ CD4+ CD45RA T-sejt/μl a perifériás vérben

EGYÉB ELŐRE MEGHATÁROZOTT CÉLKITŰZÉSEK:

• A buszulfán és metabolitjainak farmakokinetikája összefüggésbe hozható a toxicitással, a hatékonysággal, a vektorral transzdukált sejtek beültetésével, valamint az eseménymentes túléléssel és a teljes túléléssel.
• Értékelje a buszulfán dózis-célzás hatékonyságát buszulfán 24 óránkénti beadásával, összesen 2 adaggal, hogy elérje a 22 mg*óra/l görbe alatti kumulatív buszulfán területet.
• Értékelje a B-sejt funkciót a protokollban szereplő betegek hosszú távú követése során. Az értékelés magában foglalja a γc expresszióját a keringő B-sejtekben, a szérum IgG, IgA és IgM koncentrációjának mérését, az oltásra adott antitestválasz mérését, az IgG termelés értékelését az intravénás gamma globulin terápia abbahagyása után olyan betegeknél, akiknél klinikai javallatok az IVIG leállítására.
• Értékelje az NK-sejtek számát a protokollban szereplő betegek hosszú távú követése során. Az értékelés magában foglalja az NK-sejtek számának áramlási citometriás értékelését.
• Határozza meg a vektor kópiaszámát és a vektor-integrációs helyek helyét a szétválogatott vérsejtekben. A szétválogatott T-sejteket, B-sejteket, NK-sejteket, granulocitákat és monocitákat a vektorkópiaszám szempontjából értékeljük. A szétválogatott T-sejtekben lévő vektorkópiaszámot potenciális biztonsági intézkedésként értékelik, és jelenteni fogják az FDA-nak, ha a vektor kópiaszáma bármely betegben bármikor meghaladja a T-sejtenkénti 5 kópiát. A szétválogatott sejtekkel végzett vizsgálatok magukban foglalják az inszerciós helyek jellemzésére szolgáló automatizált szekvenátorral végzett mély szekvenálást, valamint a T-sejt klónok expressziós tömb elemzését, hogy megvizsgálják a génexpressziós változásokat az inszerciós helyektől számított 100 kb-on belül.
• Értékelje a lentivírus géntranszfer általános, hosszú távú biztonságosságát. Ez magában foglalja a génátviteli eljárásból eredő esetleges mellékhatások teljes klinikai értékelését. Ha bármilyen onkogén esemény észlelhető, ez az értékelés magában foglalja a tumorklón teljes molekuláris jellemzését, beleértve az inszerciós hely elemzését, a génexpressziós elemzést és az LMO2, Cdkn2a, Notch1, Cyclin D2 génváltozások értékelését.