Перенос генов для Х-сцепленного тяжелого комбинированного иммунодефицита у новорожденных с впервые выявленным диагнозом (LVXSCID-ND)

Клетки CD34+ костного мозга будут получены в операционной, трансдуцированы лентивирусным вектором, содержащим нормальную копию гена γc, и реинфузированы без какого-либо миелоредуктивного кондиционирования. В течение 42 дней после генной терапии участников будут контролировать на предмет восстановления кроветворения после бусульфана и серьезных побочных эффектов. Первичной конечной точкой, оценивающей эффективность этого подхода, будет восстановление Т-клеточного иммунитета через 52 недели (± 4) недели после трансплантации. Также будет проводиться постоянная и подробная оценка всех аспектов восстановления иммунитета, токсичности, связанной с протоколом, и сайтов интеграции ретровирусов. Это исследование оценит первое использование лентивирусного вектора SIN для лечения SCID-X1 и может привести к новой форме терапии, которая может быть применена к большинству недавно диагностированных пациентов.

ЦЕЛИ

Оценить безопасность, осуществимость и эффективность переноса лентивирусного гена у пациентов с недавно диагностированным SCID-X1, которым трансплантировали аутологичные клетки CD34+, трансдуцированные самоинактивирующимся лентивирусным вектором (CL20-i4-EF1α-hγc-OPT), экспрессирующим ген γc.

Основная цель 1: Оценить безопасность и осуществимость инфузии не менее 1 миллиона трансдуцированных клеток CD34+ на килограмм массы тела у младенцев с SCID-X1.

Основная цель 2: оценить эффективность переноса лентивирусного гена для индукции значительного восстановления Т-клеток через 52 недели (± 4 недели) после трансплантации. Значительное восстановление Т-клеток определяется как наличие по крайней мере 2 из следующих 3 критериев:

• Развитие пролиферативных ответов Т-клеток на фитогемагглютинин (ФГА), которые составляют ≥ 50% значения, наблюдаемого в нормальных контролях.
• ≥ 1000 аутологичных CD3+ Т-клеток/мкл в периферической крови
• ≥ 500 аутологичных CD4+ Т-клеток/мкл в периферической крови
• ≥ 200 аутологичных CD4+ CD45RA Т-клеток/мкл в периферической крови

ДРУГИЕ ПРЕДВАРИТЕЛЬНО ОПРЕДЕЛЕННЫЕ ЦЕЛИ:

• Соотнесите фармакокинетику бусульфана и его метаболитов с токсичностью, эффективностью, приживлением клеток, трансдуцированных вектором, а также бессобытийной выживаемостью и общей выживаемостью.
• Оцените эффективность таргетной дозы бусульфана при введении бусульфана каждые 24 часа, всего 2 дозы, чтобы достичь кумулятивной площади бусульфана под кривой 22 мг*ч/л.
• Оценить функцию В-клеток во время длительного наблюдения за протокольными пациентами. Оценка будет включать экспрессию γc в циркулирующих В-клетках, измерение концентрации IgG, IgA и IgM в сыворотке, измерение ответа антител на вакцинацию, оценку продукции IgG после прекращения внутривенной терапии гамма-глобулином у пациентов с клиническими показаниями к прекращению ВВИГ.
• Оценить количество NK-клеток при длительном наблюдении за протокольными пациентами. Оценка будет включать оценку количества NK-клеток с помощью проточной цитометрии.
• Определите количество копий вектора и расположение сайтов интеграции вектора в отсортированных клетках крови. Отсортированные Т-клетки, В-клетки, NK-клетки, гранулоциты и моноциты будут оцениваться на количество копий вектора. Количество копий вектора в отсортированных Т-клетках будет оцениваться как потенциальная мера безопасности, и о нем будет сообщено в FDA, если количество копий вектора превышает 5 копий на Т-клетку у любого пациента в любое время. Исследования отсортированных клеток также будут включать глубокое секвенирование с помощью автоматического секвенатора для характеристики сайтов вставки и анализ массива экспрессии клонов Т-клеток для анализа изменений экспрессии генов в пределах 100 т.п.н. от сайтов вставки.
• Оцените общую долгосрочную безопасность переноса лентивирусного гена. Это будет включать полную клиническую оценку любых нежелательных явлений, возникающих в результате процедуры переноса генов. Если наблюдается какое-либо онкогенное событие, эта оценка будет включать полную молекулярную характеристику опухолевого клона, включая анализ места вставки, анализ экспрессии генов и оценку изменений генов LMO2, Cdkn2a, Notch1, Cyclin D2.