Transferência de genes para imunodeficiência combinada grave ligada ao X em recém-nascidos diagnosticados (LVXSCID-ND)

As células CD34+ da medula óssea serão obtidas na sala de cirurgia, transduzidas com o vetor lentiviral que contém uma cópia normal do gene γc e reinfundidas sem nenhum condicionamento mielorredutor. Os participantes serão monitorados quanto à recuperação hematopoiética do busulfan e quanto a eventos adversos graves por 42 dias após a terapia genética. O endpoint primário avaliando a eficácia desta abordagem será a reconstituição imune de células T 52 semanas (± 4) semanas após o transplante. A avaliação contínua e detalhada de todos os aspectos da reconstituição imune, toxicidade relacionada ao protocolo e locais de integração retroviral também será realizada. Este estudo avaliará o primeiro uso de um vetor lentiviral SIN para o tratamento de SCID-X1 e pode levar a uma nova forma de terapia que pode ser aplicada à maioria dos pacientes recém-diagnosticados.

OBJETIVOS

Avaliar a segurança, viabilidade e eficácia da transferência de genes lentivirais em pacientes SCID-X1 recém-diagnosticados transplantados com células CD34+ autólogas que foram transduzidas com um vetor lentiviral auto-inativado (CL20-i4-EF1α-hγc-OPT) expressando um gene γc.

Objetivo Primário 1: Avaliar a segurança e a viabilidade de infundir pelo menos 1 milhão de células CD34+ transduzidas por quilograma de peso corporal em bebês SCID-X1.

Objetivo primário 2: Avaliar a eficácia da transferência de genes lentivirais para induzir reconstituição significativa de células T 52 semanas (± 4 semanas) após o transplante. A reconstituição significativa de células T é definida como pelo menos 2 dos 3 critérios seguintes presentes:

• O desenvolvimento de respostas proliferativas de células T à fitohemaglutinina (PHA) que são ≥ 50% do valor observado em controles normais
• ≥ 1000 células T CD3+ autólogas/μl no sangue periférico
• ≥ 500 células T CD4+ autólogas/μl no sangue periférico
• ≥ 200 células T CD4+ CD45RA autólogas/μl no sangue periférico

OUTROS OBJETIVOS PRÉ-ESPECIFICADOS:

• Correlacione o busulfan e a farmacocinética de seu metabólito com toxicidade, eficácia, enxerto de células transduzidas por vetor e sobrevida livre de eventos e sobrevida global.
• Avalie a eficácia do direcionamento da dose de bussulfano com administração de bussulfano a cada 24 horas para um total de 2 doses, a fim de atingir uma área cumulativa de bussulfano sob a curva de 22 mg*h/L.
• Avalie a função das células B durante o acompanhamento de longo prazo dos pacientes do protocolo. A avaliação incluirá a expressão γc nas células B circulantes, medição da concentração sérica de IgG, IgA e IgM, medição das respostas de anticorpos à vacinação, avaliação da produção de IgG após a interrupção da terapia intravenosa com gamaglobulina em pacientes com indicações clínicas para descontinuar IVIG.
• Avalie o número de células NK no acompanhamento de longo prazo de pacientes do protocolo. A avaliação incluirá a avaliação por citometria de fluxo dos números de células NK.
• Determine o número de cópias do vetor e a localização dos locais de integração do vetor nas células sanguíneas classificadas. Células T, células B, células NK, granulócitos e monócitos selecionados serão avaliados quanto ao número de cópias do vetor. O número de cópias do vetor em células T classificadas será avaliado como uma medida de segurança potencial e será relatado ao FDA se o número de cópias do vetor for maior que 5 cópias por célula T em qualquer paciente a qualquer momento. Estudos em células selecionadas também incluirão sequenciamento profundo com um sequenciador automático para caracterizar locais de inserção e análise de matriz de expressão de clones de células T para testar alterações de expressão gênica dentro de 100 kb dos locais de inserção.
• Avalie a segurança geral e de longo prazo da transferência de genes lentivirais. Isso incluirá avaliação clínica completa de quaisquer EAs resultantes do procedimento de transferência de genes. Se algum evento oncogênico for observado, esta avaliação incluirá a caracterização molecular completa do clone do tumor, incluindo análise do local de inserção, análise da expressão gênica e avaliação das alterações nos genes LMO2, Cdkn2a, Notch1 e Ciclina D2.