Trasferimento genico per immunodeficienza combinata grave legata all'X in neonati di nuova diagnosi (LVXSCID-ND)

Cellule CD34+ di midollo osseo saranno prelevate in sala operatoria, trasdotte con il vettore lentivirale che contiene una copia normale del gene γc, e reinfuse senza alcun condizionamento mieloriduttivo. I partecipanti saranno monitorati per il recupero ematopoietico da busulfan e per eventi avversi gravi per 42 giorni dopo la terapia genica. L'endpoint primario per valutare l'efficacia di questo approccio sarà la ricostituzione immunitaria delle cellule T 52 settimane (± 4) settimane dopo il trapianto. Verrà inoltre eseguita una valutazione continua e dettagliata di tutti gli aspetti della ricostituzione immunitaria, della tossicità correlata al protocollo e dei siti di integrazione retrovirale. Questo studio valuterà il primo utilizzo di un vettore lentivirale SIN per il trattamento di SCID-X1 e potrebbe portare a una nuova forma di terapia che potrebbe essere applicata alla maggior parte dei pazienti di nuova diagnosi.

OBIETTIVI

Valutare la sicurezza, la fattibilità e l'efficacia del trasferimento genico lentivirale in pazienti SCID-X1 di nuova diagnosi trapiantati con cellule CD34+ autologhe che sono state trasdotte con un vettore lentivirale autoinattivante (CL20-i4-EF1α-hγc-OPT) che esprime un gene γc.

Obiettivo primario 1: valutare la sicurezza e la fattibilità dell'infusione di almeno 1 milione di cellule CD34+ trasdotte per chilogrammo di peso corporeo nei neonati SCID-X1.

Obiettivo primario 2: valutare l'efficacia del trasferimento genico lentivirale per indurre una significativa ricostituzione delle cellule T 52 settimane (± 4 settimane) dopo il trapianto. La ricostituzione significativa delle cellule T è definita quando almeno 2 dei seguenti 3 criteri sono presenti:

• Lo sviluppo di risposte proliferative delle cellule T alla fitoemoagglutinina (PHA) che sono ≥ 50% del valore osservato nei controlli normali
• ≥ 1000 cellule T CD3+ autologhe/μl nel sangue periferico
• ≥ 500 cellule T CD4+ autologhe/μl nel sangue periferico
• ≥ 200 cellule T CD4+ CD45RA autologhe/μl nel sangue periferico

ALTRI OBIETTIVI PRE-SPECIFICATI:

• Correlare busulfan e la farmacocinetica del suo metabolita con tossicità, efficacia, attecchimento di cellule trasdotte da vettori e sopravvivenza libera da eventi e sopravvivenza globale.
• Valutare l'efficacia del dosaggio mirato di busulfan con la somministrazione di busulfan ogni 24 ore per un totale di 2 dosi al fine di ottenere un'area cumulativa di busulfan sotto la curva di 22 mg*ora/L.
• Valutare la funzione delle cellule B durante il follow-up a lungo termine dei pazienti sottoposti a protocollo. La valutazione includerà l'espressione di γc nelle cellule B circolanti, la misurazione della concentrazione sierica di IgG, IgA e IgM, la misurazione delle risposte anticorpali alla vaccinazione, la valutazione della produzione di IgG dopo l'interruzione della terapia con gammaglobuline per via endovenosa in pazienti con indicazioni cliniche per interrompere IVIG.
• Valutare i numeri delle cellule NK nel follow-up a lungo termine dei pazienti sottoposti a protocollo. La valutazione includerà la valutazione della citometria a flusso dei numeri delle cellule NK.
• Determinare il numero di copie del vettore e la posizione dei siti di integrazione del vettore nelle cellule del sangue ordinate. Cellule T, cellule B, cellule NK, granulociti e monociti saranno valutate per il numero di copie del vettore. Il numero di copie del vettore nelle cellule T ordinate sarà valutato come potenziale misura di sicurezza e verrà segnalato alla FDA se il numero di copie del vettore è superiore a 5 copie per cellula T in qualsiasi paziente in qualsiasi momento. Gli studi sulle cellule selezionate includeranno anche il sequenziamento profondo con un sequenziatore automatizzato per caratterizzare i siti di inserimento e l'analisi dell'array di espressione dei cloni di cellule T per saggiare le alterazioni dell'espressione genica entro 100 kb dai siti di inserimento.
• Valutare la sicurezza complessiva a lungo termine del trasferimento genico lentivirale. Ciò includerà una valutazione clinica completa di qualsiasi evento avverso derivante dalla procedura di trasferimento genico. Se si osserva un evento oncogenico, questa valutazione includerà la caratterizzazione molecolare completa del clone tumorale, compresa l'analisi del sito di inserimento, l'analisi dell'espressione genica e la valutazione delle alterazioni del gene LMO2, Cdkn2a, Notch1, Cyclin D2.