Transferencia de genes para la inmunodeficiencia combinada grave ligada al cromosoma X en lactantes recién diagnosticados (LVXSCID-ND)

Las células CD34+ de la médula ósea se obtendrán en el quirófano, se transducirán con el vector lentiviral que contiene una copia normal del gen γc y se reinfundirán sin ningún condicionamiento mielorreductor. Se controlará a los participantes para determinar la recuperación hematopoyética del busulfán y los eventos adversos graves durante 42 días después de la terapia génica. El criterio de valoración principal que evalúa la eficacia de este enfoque será la reconstitución inmunitaria de células T 52 semanas (± 4) semanas después del trasplante. También se realizará una evaluación continua y detallada de todos los aspectos de la reconstitución inmunitaria, la toxicidad relacionada con el protocolo y los sitios de integración retroviral. Este estudio evaluará el primer uso de un vector lentiviral SIN para el tratamiento de SCID-X1 y puede conducir a una nueva forma de terapia que podría aplicarse a la mayoría de los pacientes recién diagnosticados.

OBJETIVOS

Evaluar la seguridad, viabilidad y eficacia de la transferencia de genes lentivirales en pacientes SCID-X1 recién diagnosticados trasplantados con células CD34+ autólogas que se han transducido con un vector lentiviral autoinactivante (CL20-i4-EF1α-hγc-OPT) que expresa un gen γc.

Objetivo primario 1: Evaluar la seguridad y viabilidad de la infusión de al menos 1 millón de células CD34+ transducidas por kilogramo de peso corporal en lactantes SCID-X1.

Objetivo primario 2: Evaluar la eficacia de la transferencia de genes lentivirales para inducir una reconstitución significativa de células T 52 semanas (± 4 semanas) después del trasplante. La reconstitución significativa de células T se define como la presencia de al menos 2 de los 3 criterios siguientes:

• El desarrollo de respuestas proliferativas de células T a la fitohemaglutinina (PHA) que son ≥ 50 % del valor observado en los controles normales
• ≥ 1000 células T CD3+ autólogas/μl en sangre periférica
• ≥ 500 células T CD4+ autólogas/μl en sangre periférica
• ≥ 200 células T CD4+ CD45RA autólogas/μl en sangre periférica

OTROS OBJETIVOS PREESPECIFICADOS:

• Correlacione la farmacocinética del busulfán y su metabolito con la toxicidad, la eficacia, el injerto de células transducidas por vector y la supervivencia libre de eventos y la supervivencia general.
• Evaluar la eficacia de la orientación de la dosis de busulfán con la administración de busulfán cada 24 horas durante un total de 2 dosis para lograr un área acumulada de busulfán bajo la curva de 22 mg*h/L.
• Evalúe la función de las células B durante el seguimiento a largo plazo de los pacientes del protocolo. La evaluación incluirá la expresión de γc en las células B circulantes, la medición de la concentración sérica de IgG, IgA e IgM, la medición de las respuestas de anticuerpos a la vacunación, la evaluación de la producción de IgG después de la interrupción de la terapia con gammaglobulina intravenosa en pacientes con indicaciones clínicas para interrumpir la IVIG.
• Evalúe el número de células NK en el seguimiento a largo plazo de los pacientes del protocolo. La evaluación incluirá la evaluación por citometría de flujo del número de células NK.
• Determine el número de copias del vector y la ubicación de los sitios de integración del vector en las células sanguíneas ordenadas. Se evaluarán las células T, las células B, las células NK, los granulocitos y los monocitos clasificados para determinar el número de copias del vector. El número de copias del vector en las células T clasificadas se evaluará como una posible medida de seguridad y se informará a la FDA si el número de copias del vector es superior a 5 copias por célula T en cualquier paciente en cualquier momento. Los estudios sobre células clasificadas también incluirán la secuenciación profunda con un secuenciador automático para caracterizar los sitios de inserción y el análisis de matrices de expresión de clones de células T para analizar las alteraciones de la expresión génica dentro de los 100 kb de los sitios de inserción.
• Evaluar la seguridad general a largo plazo de la transferencia de genes lentivirales. Esto incluirá una evaluación clínica completa de cualquier evento adverso resultante del procedimiento de transferencia de genes. Si se observa algún evento oncogénico, esta evaluación incluirá la caracterización molecular completa del clon tumoral, incluido el análisis del sitio de inserción, el análisis de la expresión génica y la evaluación de las alteraciones del gen LMO2, Cdkn2a, Notch1, Cyclin D2.