Geeninsiirto X-kytketyn vakavan yhdistelmä-immuunipuutokselle äskettäin diagnosoiduilla vauvoilla (LVXSCID-ND)

Luuytimen CD34+-solut hankitaan leikkaussalissa, transdusoidaan lentivirusvektorilla, joka sisältää normaalin kopion yc-geenistä, ja infusoidaan uudelleen ilman myeloreduktiivista hoitoa. Osallistujia seurataan hematopoieettisen toipumisen varalta busulfaanista ja vakavien haittatapahtumien varalta 42 päivän ajan geeniterapian jälkeen. Tämän lähestymistavan tehokkuutta arvioiva ensisijainen päätetapahtuma on T-solujen immuunijärjestelmän palautuminen 52 viikkoa (± 4) viikkoa transplantaation jälkeen. Lisäksi suoritetaan jatkuva ja yksityiskohtainen arviointi kaikista immuunijärjestelmän uudelleenmuodostumisen, protokollaan liittyvän toksisuuden ja retroviruksen integraatiokohtien näkökohdista. Tässä tutkimuksessa arvioidaan SIN-lentivirusvektorin ensimmäistä käyttöä SCID-X1:n hoidossa ja se voi johtaa uuteen hoitomuotoon, jota voitaisiin soveltaa valtaosaan äskettäin diagnosoiduista potilaista.

TAVOITTEET

Arvioi lentivirusgeeninsiirron turvallisuutta, toteutettavuutta ja tehokkuutta äskettäin diagnosoiduilla SCID-X1-potilailla, joille on siirretty autologisia CD34+-soluja, jotka on transdusoitu itseinaktivoivalla lentivirusvektorilla (CL20-i4-EF1α-hγc-OPT), joka ilmentää γc-geeniä.

Ensisijainen tavoite 1: Arvioi vähintään 1 miljoonan transdusoidun CD34+-solun infusoinnin turvallisuus ja toteutettavuus painokiloa kohden SCID-X1-vauvoilla.

Ensisijainen tavoite 2: Arvioi lentiviruksen geeninsiirron tehokkuus merkittävän T-solujen uudelleenmuodostumisen indusoimiseksi 52 viikkoa (± 4 viikkoa) transplantaation jälkeen. Merkittävä T-solujen muodostuminen määritellään, kun vähintään 2 seuraavista kolmesta kriteeristä on olemassa:

• T-solujen proliferatiivisten vasteiden kehittyminen fytohemagglutiniinille (PHA), jotka ovat ≥ 50 % normaaleissa kontrolleissa havaitusta arvosta
• ≥ 1000 autologista CD3+ T-solua/μl ääreisveressä
• ≥ 500 autologista CD4+ T-solua/μl ääreisveressä
• ≥ 200 autologista CD4+ CD45RA T-solua/μl ääreisveressä

MUUT ennakolta MÄÄRITELMÄT TAVOITTEET:

• Korreloi busulfaanin ja sen metaboliitin farmakokinetiikka toksisuuden, tehon, vektorin välittämien solujen siirtämisen sekä tapahtumattoman eloonjäämisen ja kokonaiseloonjäämisen kanssa.
• Arvioi busulfaaniannoskohdistuksen tehokkuus busulfaania annettaessa 24 tunnin välein yhteensä 2 annoksella, jotta saavutetaan kumulatiivinen busulfaanipinta-ala käyrän alla 22 mg*h/l.
• Arvioi B-solujen toiminta protokollapotilaiden pitkäaikaisen seurannan aikana. Arviointi sisältää γc:n ilmentymisen kiertävissä B-soluissa, seerumin IgG-, IgA- ja IgM-pitoisuuden mittaamisen, vasta-ainevasteiden mittaamisen rokotuksissa, IgG-tuotannon arvioinnin suonensisäisen gammaglobuliinihoidon lopettamisen jälkeen potilailla, joilla on kliinisiä aiheita IVIG:n lopettamiseen.
• Arvioi NK-solujen määrä protokollapotilaiden pitkäaikaisessa seurannassa. Arviointi sisältää NK-solujen määrän virtaussytometrisen arvioinnin.
• Määritä vektorin kopioluku ja vektorin integraatiokohtien sijainti lajitelluissa verisoluissa. Lajitellut T-solut, B-solut, NK-solut, granulosyytit ja monosyytit arvioidaan vektorin kopiomäärän suhteen. Vektorikopioiden lukumäärä lajitetuissa T-soluissa arvioidaan mahdollisena turvatoimena ja ilmoitetaan FDA:lle, jos vektorin kopiomäärä on suurempi kuin 5 kopiota T-solua kohden missä tahansa potilaassa milloin tahansa. Lajiteltujen solujen tutkimukset sisältävät myös syvän sekvensoinnin automatisoidulla sekvensoijalla insertiokohtien karakterisoimiseksi ja T-solukloonien ilmentymisrivianalyysin geeniekspression muutosten määrittämiseksi 100 kb:n sisällä insertiokohdista.
• Arvioi lentiviruksen geeninsiirron yleistä pitkän aikavälin turvallisuutta. Tämä sisältää täydellisen kliinisen arvioinnin kaikista geeninsiirtomenettelystä johtuvista haittavaikutuksista. Jos havaitaan onkogeenistä tapahtumaa, tämä arviointi sisältää kasvainkloonin täydellisen molekyylin karakterisoinnin, mukaan lukien insertiokohdan analyysi, geeniekspressioanalyysi ja LMO2-, Cdkn2a-, Notch1-, Cyclin D2-geenimuutosten arviointi.