Transfert de gène pour le déficit immunitaire combiné sévère lié à l'X chez les nourrissons nouvellement diagnostiqués (LVXSCID-ND)

Des cellules CD34+ de moelle osseuse seront obtenues au bloc opératoire, transduites avec le vecteur lentiviral qui contient une copie normale du gène γc, et réinfusées sans aucun conditionnement myéloréducteur. Les participants seront surveillés pour la récupération hématopoïétique du busulfan et pour les événements indésirables graves pendant 42 jours après la thérapie génique. Le critère d'évaluation principal évaluant l'efficacité de cette approche sera la reconstitution immunitaire des lymphocytes T 52 semaines (± 4) semaines après la transplantation. Une évaluation continue et détaillée de tous les aspects de la reconstitution immunitaire, de la toxicité liée au protocole et des sites d'intégration rétrovirale sera également effectuée. Cette étude évaluera la première utilisation d'un vecteur lentiviral SIN pour le traitement du SCID-X1 et pourrait conduire à une nouvelle forme de thérapie qui pourrait être appliquée à la majorité des patients nouvellement diagnostiqués.

OBJECTIFS

Évaluer l'innocuité, la faisabilité et l'efficacité du transfert de gène lentiviral chez les patients nouvellement diagnostiqués SCID-X1 transplantés avec des cellules CD34+ autologues qui ont été transduites avec un vecteur lentiviral auto-inactivant (CL20-i4-EF1α-hγc-OPT) exprimant un gène γc.

Objectif principal 1 : Évaluer l'innocuité et la faisabilité de la perfusion d'au moins 1 million de cellules CD34+ transduites par kilogramme de poids corporel chez les nourrissons SCID-X1.

Objectif principal 2 : Évaluer l'efficacité du transfert de gène lentiviral pour induire une reconstitution significative des lymphocytes T 52 semaines (± 4 semaines) après la transplantation. Une reconstitution significative des lymphocytes T est définie par la présence d'au moins 2 des 3 critères suivants :

• Le développement de réponses prolifératives des lymphocytes T à la phytohémagglutinine (PHA) qui sont ≥ 50 % de la valeur observée chez les témoins normaux
• ≥ 1000 lymphocytes T CD3+ autologues/μl dans le sang périphérique
• ≥ 500 lymphocytes T CD4+ autologues/μl dans le sang périphérique
• ≥ 200 lymphocytes T CD4+ CD45RA autologues/μl dans le sang périphérique

AUTRES OBJECTIFS PRE-SPECIFIES :

• Corréler le busulfan et la pharmacocinétique de son métabolite avec la toxicité, l'efficacité, la greffe de cellules transduites par vecteur, la survie sans événement et la survie globale.
• Évaluer l'efficacité du ciblage de la dose de busulfan avec l'administration de busulfan toutes les 24 heures pour un total de 2 doses afin d'obtenir une aire cumulée de busulfan sous la courbe de 22 mg*h/L.
• Évaluer la fonction des lymphocytes B lors du suivi à long terme des patients du protocole. L'évaluation comprendra l'expression de γc dans les lymphocytes B circulants, la mesure de la concentration sérique d'IgG, d'IgA et d'IgM, la mesure des réponses d'anticorps à la vaccination, l'évaluation de la production d'IgG après l'arrêt du traitement par gammaglobuline intraveineuse chez les patients présentant des indications cliniques pour interrompre IVIG.
• Évaluer le nombre de cellules NK dans le suivi à long terme des patients du protocole. L'évaluation comprendra une évaluation par cytométrie en flux du nombre de cellules NK.
• Déterminez le nombre de copies vectorielles et l'emplacement des sites d'intégration vectorielle dans les cellules sanguines triées. Les cellules T triées, les cellules B, les cellules NK, les granulocytes et les monocytes seront évalués pour le nombre de copies de vecteur. Le nombre de copies vectorielles dans les cellules T triées sera évalué comme une mesure de sécurité potentielle et sera signalé à la FDA si le nombre de copies vectorielles est supérieur à 5 copies par cellule T chez n'importe quel patient à tout moment. Les études sur les cellules triées comprendront également un séquençage en profondeur avec un séquenceur automatisé pour caractériser les sites d'insertion et une analyse de matrice d'expression de clones de lymphocytes T pour tester les altérations de l'expression génique à moins de 100 kb des sites d'insertion.
• Évaluer l'innocuité globale à long terme du transfert de gènes lentiviraux. Cela comprendra une évaluation clinique complète de tout EI résultant de la procédure de transfert de gènes. Si un événement oncogène est observé, cette évaluation comprendra une caractérisation moléculaire complète du clone tumoral, y compris l'analyse du site d'insertion, l'analyse de l'expression génique et l'évaluation des altérations des gènes LMO2, Cdkn2a, Notch1, Cycline D2.